| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 中英文对照 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-28页 |
| 1.细胞核移植发展过程 | 第13-17页 |
| ·哺乳动物胚胎细胞核移植发展历程 | 第13-14页 |
| ·哺乳动物胚胎干细胞核移植进展 | 第14-15页 |
| ·哺乳动物体细胞核移植研究进展 | 第15页 |
| ·山羊细胞核移植研究进展 | 第15-17页 |
| 2.核移植技术程序 | 第17-25页 |
| ·供核细胞的准备 | 第17-19页 |
| ·供体细胞类型对核移植效率的影响 | 第17-18页 |
| ·供核细胞的周期 | 第18页 |
| ·供体细胞的培养代数 | 第18-19页 |
| ·受体细胞的准备 | 第19-23页 |
| ·受体细胞的选择 | 第19-20页 |
| ·卵母细胞的体外成熟 | 第20-22页 |
| ·受体细胞的去核 | 第22-23页 |
| ·重构胚的构建 | 第23-24页 |
| ·透明带下注射法 | 第23页 |
| ·胞质内注射法 | 第23-24页 |
| ·重构胚的激活 | 第24页 |
| ·重构胚的体外培养 | 第24-25页 |
| ·胚胎移植 | 第25页 |
| 3.体细胞核移植技术的应用前景 | 第25-27页 |
| ·在畜牧业上的应用 | 第25-26页 |
| ·优良家畜的快速扩繁 | 第25-26页 |
| ·生产转基因动物 | 第26页 |
| ·保护濒危动物 | 第26页 |
| ·在医学上的应用 | 第26-27页 |
| 4 本项目研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二部分 试验研究 | 第28-58页 |
| 第一章 波尔山羊皮肤成纤维细胞的分离和培养 | 第28-36页 |
| 1 材料与方法 | 第28-31页 |
| ·试验材料 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·试验试剂 | 第28-29页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·主要溶液的配制 | 第29页 |
| ·试验方法 | 第29-31页 |
| ·原种波尔山羊皮肤成纤维细胞系的建立 | 第29-31页 |
| ·组织块培养法 | 第29-30页 |
| ·酶消化法 | 第30页 |
| ·原代细胞的传代培养 | 第30页 |
| ·成纤维细胞的纯化 | 第30页 |
| ·成纤维细胞的冻存 | 第30-31页 |
| ·成纤维细胞的解冻复苏 | 第31页 |
| ·成纤维细胞生长曲线 | 第31页 |
| 2 结果 | 第31-33页 |
| ·皮肤成纤维细胞原代和传代培养 | 第31-33页 |
| ·成纤维细胞的生长曲线 | 第33页 |
| 3 讨论 | 第33-35页 |
| ·供体细胞的选择 | 第33页 |
| ·原代细胞的培养方法 | 第33-34页 |
| ·成纤维细胞的分离纯化 | 第34页 |
| ·成纤维细胞的冷冻与解冻 | 第34-35页 |
| ·成纤维细胞的生长曲线 | 第35页 |
| 4 小结 | 第35-36页 |
| 第二章 成纤维细胞体外培养过程中β-半乳糖苷酶的表达 | 第36-46页 |
| 1 材料与方法 | 第36-37页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·主要溶液的配制 | 第36-37页 |
| ·试验方法 | 第37页 |
| ·成纤维细胞的分离培养 | 第37页 |
| ·细胞的形态学观察 | 第37页 |
| ·成纤维细胞β-半乳糖苷酶染色 | 第37页 |
| ·统计学分析 | 第37页 |
| 2 结果 | 第37-42页 |
| ·细胞的形态学观察 | 第37-39页 |
| ·β-半乳糖苷酶染色检测 | 第39-42页 |
| ·β-半乳糖苷酶染色形态 | 第39-40页 |
| ·β-半乳糖苷酶染色阳性率与细胞代龄之间的相关分析 | 第40页 |
| ·年龄对成纤维细胞衰老的影响 | 第40-41页 |
| ·代龄对成纤维细胞衰老的影响 | 第41-42页 |
| ·性别对成纤维细胞衰老的影响 | 第42页 |
| 3 讨论 | 第42-45页 |
| ·皮肤成纤维细胞的体外长期培养 | 第43页 |
| ·衰老相关β-半乳糖苷酶染色的研究 | 第43-45页 |
| ·年龄对成纤维细胞衰老的影响 | 第43页 |
| ·代龄对成纤维细胞衰老的影响 | 第43-44页 |
| ·性别对成纤维细胞衰老的影响 | 第44-45页 |
| 4 小结 | 第45-46页 |
| 第三章 山羊卵母细胞的体外成熟 | 第46-53页 |
| 1 材料与方法 | 第46-48页 |
| ·山羊卵巢的采集 | 第46页 |
| ·FSH 超数排卵处理山羊卵巢的采集 | 第46页 |
| ·屠宰场山羊卵巢的采集 | 第46页 |
| ·主要仪器和耗材 | 第46页 |
| ·试验试剂 | 第46-47页 |
| ·主要试剂 | 第46-47页 |
| ·溶液的配制 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-48页 |
| ·卵丘-卵母细胞复合体（Cumulus Oocyte Complexes, COCs）的采集 | 第47页 |
| ·COCs 的体外成熟培养 | 第47页 |
| ·成熟的检查 | 第47-48页 |
| ·数据分析 | 第48页 |
| 2、结果与分析 | 第48-50页 |
| ·卵母细胞级别对体外成熟率的影响 | 第48页 |
| ·卵巢来源对卵母细胞采集数量和质量的影响 | 第48-49页 |
| ·卵巢来源对卵母细胞体外成熟率的影响 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| ·卵母细胞级别对体外成熟率的影响 | 第50-51页 |
| ·卵巢来源对卵母细胞采集数量和质量的影响 | 第51-52页 |
| ·卵巢来源对卵母细胞体外成熟率的影响 | 第52页 |
| 4、小结 | 第52-53页 |
| 第四章 成年体细胞克隆波尔山羊的研究 | 第53-58页 |
| 1 材料与方法 | 第53-55页 |
| ·试验材料 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| ·试验试剂 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·溶液的配制 | 第53页 |
| ·方法 | 第53-55页 |
| ·供体细胞的准备 | 第53-54页 |
| ·受体卵母细胞的获得 | 第54页 |
| ·核移植 | 第54页 |
| ·融合 | 第54页 |
| ·重构胚的激活与体外培养 | 第54-55页 |
| ·受体山羊的同期发情与胚胎移植 | 第55页 |
| ·妊娠检查 | 第55页 |
| 2、结果与分析 | 第55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| ·克隆动物的获得 | 第55页 |
| ·核移植 | 第55-56页 |
| ·融合 | 第56页 |
| ·重构胚的激活与体外培养 | 第56-57页 |
| ·胚胎移植 | 第57页 |
| 4 小结 | 第57-58页 |
| 全文总结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
