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氯化镧诱导MDCC-MSB1细胞凋亡机制的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
1. 前言第9-15页
   ·稀土元素的生物医学活性第9页
   ·稀土元素与肿瘤细胞凋亡第9-13页
     ·稀土元素对Ca~(2+)与钙调蛋白的影响第10-11页
     ·稀土元素对核酸内切酶的影响第11-12页
     ·稀土对细胞周期的影响第12页
     ·稀土元素对线粒体的影响第12-13页
   ·试验的目的与意义第13-15页
2 材料与方法第15-22页
   ·主要仪器与材料第15-16页
     ·主要仪器第15页
     ·主要试剂第15-16页
     ·试验药品及细胞株第16页
   ·MDCC-MSB1 细胞培养及处理第16页
   ·检测项目与方法第16-21页
     ·LaCl_3对MDCC-MSB1 细胞活性影响的检测第16-17页
     ·流式细胞术检测细胞周期第17页
     ·LaCl_3对MDCC-MSB1 细胞细胞凋亡的形态学观察第17-18页
     ·流式细胞术检测磷脂酰丝氨酸(PS 外翻)第18页
     ·MDCC-MSB1 细胞DNA 损伤的检测第18页
     ·LaCl_3对MDCC-MSB1 细胞氧化损伤的检测第18-19页
     ·MDCC-MSB1 细胞[Ca~(2+)]i 浓度影响的检测第19页
     ·流式细胞术检测细胞线粒体膜电位(Δψm)第19页
     ·Caspase-3、Caspase-9 蛋白活性的检测第19-20页
     ·半定量RT-PCR 法测定MDCC-MSB1 细胞内CaM、Caspase-3 mRNA的表达第20-21页
   ·实验数据分析与统计第21-22页
3. 结果与分析第22-41页
   ·LACL_3对MDCC-MSB1 细胞活性影响的检测结果第22-24页
     ·MTT 比色法检测结果第22页
     ·LDH 活性的检测结果第22-23页
     ·LaCl_3对MDCC-MSB1 细胞周期影响的检测结果第23-24页
   ·LACL_3诱导MDCC-MSB1 细胞凋亡的形态学检测结果第24-28页
     ·不同浓度LaCl_3作用MDCC-MSB1 细胞24h 后的形态学观察第24-25页
     ·HE 染色观察结果第25页
     ·AO/EB 双荧光染色检测结果第25-27页
     ·电镜观察结果第27-28页
   ·LACL_3对MDCC-MSB1 细胞磷脂酰丝氨酸外翻的检测结果第28-29页
   ·LACL_3致MDCC-MSB1 细胞DNA 损伤的检测结果第29-32页
     ·DNA Ladder 检测结果第29-30页
     ·碱性SCGE 检测结果第30-31页
     ·TUNEL 的检测结果第31-32页
   ·LACL_3诱导MDCC-MSB1 细胞凋亡的氧化损伤检测结果第32-34页
     ·MDCC-MSB1 细胞内NOS 活性及NO 含量的检测结果第32-33页
     ·MDCC-MSB1 细胞内ROS 含量的检测结果第33-34页
   ·LACL_3对MDCC-MSB1 细胞[Ca~(2+)]I 影响的检测结果第34-35页
   ·LACL_3对肿瘤细胞ΔΨM 变化的检测结果第35-36页
   ·LACL_3对肿瘤细胞CASPASE-3、CASPASE-9活性影响的检测结果第36-37页
   ·LACL_3对MDCC-MSB1 细胞内CAM、CASPASE-3MRNA 的表达的影响第37-41页
     ·LaCl_3对MDCC-MSB1 细胞内β-actin、CaM 与Caspase-3 基因片断 PCR产物的鉴定结果第37-39页
     ·最佳PCR 反应条件的摸索结果第39页
     ·LaCl_3对MDCC-MSB1 细胞内Caspase-3、CaMmRNA 表达的检测结果第39-41页
4. 讨论第41-49页
   ·LACL_3对MDCC-MSB1 细胞增殖抑制作用研究第41-42页
     ·MTT 法检测LaCl_3对细胞增殖抑制率的影响第41页
     ·LaCl_3对MDCC-MSB1 细胞培养上清液中LDH 活性的影响第41-42页
     ·LaCl_3对MDCC-MSB1 细胞周期抑制的影响第42页
   ·LACL_3对MDCC-MSB1 细胞CAMMRNA 表达的影响第42-43页
   ·LACL_3诱导MDCC-MSB1 细胞促凋亡作用的研究第43-45页
     ·LaCl_3对MDCC-MSB1 细胞的形态和结构的影响第43页
     ·LaCl_3对MDCC-MSB1 细胞膜结构的影响第43-44页
     ·LaCl_3对MDCC-MSB1 细胞DNA 损伤的影响第44-45页
   ·LACL_3诱导MDCC-MSB1 细胞发生氧化应激的研究第45-46页
     ·LaCl_3对MDCC-MSB1 细胞中NOS 活性及NO 含量变化的影响第45页
     ·LaCl_3对MDCC-MSB1 细胞内ROS 含量变化的影响第45-46页
   ·LACL_3对MDCC-MSB1 细胞[Ca~(2+)]I 的影响第46-47页
   ·LACL_3诱导MDCC-MSB1 细胞内线粒体膜电位改变的影响第47页
   ·LACL_3对CASPASE-3MRNA 表达及CASPASE-3、9 蛋白活性的影响第47-49页
5. 结论第49-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-57页
攻读学位期间发表的学术论文第57页

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