| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 文献综述 | 第9-23页 |
| 1 乳房的结构与乳腺的生物学研究 | 第9-10页 |
| ·乳房的结构 | 第9页 |
| ·乳腺的生物学研究 | 第9-10页 |
| 2 乳腺细胞培养方法的研究进展 | 第10-11页 |
| 3 乳腺上皮细胞的类型及相互关系 | 第11-12页 |
| 4 现有的动物乳腺细胞系 | 第12-16页 |
| 5 激素和细胞外基质对乳腺上皮细胞生长的调控 | 第16-21页 |
| ·细胞外基质的作用 | 第16-18页 |
| ·激素等调节因子的作用 | 第18-21页 |
| 6 本论文研究的意义及主要内容 | 第21-23页 |
| 试验部分 | 第23-67页 |
| 试验一 山羊乳腺上皮细胞的分离与纯化 | 第23-33页 |
| 1 材料与方法 | 第23-26页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·有关试剂的配置 | 第23页 |
| ·培养仪器和用具 | 第23-24页 |
| ·乳腺组织来源 | 第24页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞的获取方法 | 第24页 |
| ·组织块培养法 | 第24页 |
| ·酶消化法 | 第24页 |
| ·细胞活力的评定 | 第24-25页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞的纯化 | 第25页 |
| ·刮除法 | 第25页 |
| ·相差消化法 | 第25页 |
| ·相差贴壁法 | 第25页 |
| ·细胞生长曲线的测定 | 第25-26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-29页 |
| ·不同分离方法获得山羊乳腺上皮细胞的比较 | 第26-27页 |
| ·组织块培养法 | 第26-27页 |
| ·酶消化法 | 第27页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞的纯化 | 第27页 |
| ·细胞生长曲线 | 第27页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞的形态观察 | 第27-29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| ·组织来源 | 第29页 |
| ·分离方法 | 第29-30页 |
| ·纯化方法 | 第30页 |
| ·细胞生长曲线 | 第30-31页 |
| 4 小结 | 第31-33页 |
| 试验二 山羊乳腺上皮细胞单细胞克隆的制备与鉴定 | 第33-41页 |
| 1 材料与方法 | 第33-35页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·培养用液 | 第33页 |
| ·培养仪器和用具 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞单克隆的制备 | 第33-34页 |
| ·口吸管法 | 第33-34页 |
| ·克隆环法 | 第34页 |
| ·细胞稀释法 | 第34页 |
| ·羊乳腺上皮细胞的鉴定 | 第34-35页 |
| ·形态学鉴定 | 第34页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞角蛋白18的鉴定 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-36页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞单克隆的制备 | 第35-36页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞的鉴定结果 | 第36页 |
| ·形态学鉴定 | 第36页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞角蛋白18的鉴定 | 第36页 |
| 3 讨论 | 第36-39页 |
| 4 小结 | 第39-41页 |
| 试验三 不同生物活性因子对传代细胞生长的影响 | 第41-57页 |
| 1 材料与方法 | 第41-42页 |
| ·试剂与材料 | 第41页 |
| ·试剂 | 第41页 |
| ·测定用液 | 第41页 |
| ·培养仪器和用具 | 第41页 |
| ·实验方案 | 第41页 |
| ·MTT 法测定山羊乳腺上皮细胞生长活性 | 第41-42页 |
| ·数据分析及处理 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-53页 |
| ·五因素二次回归正交旋转组合试验结果 | 第42-44页 |
| ·回归方程的建立及检验 | 第44-53页 |
| ·数学模型的建立 | 第44-45页 |
| ·二次回归模型的显著性检验及重建二次回归模型 | 第45-47页 |
| ·回归方程的优化分析 | 第47-53页 |
| ·主效应分析 | 第47页 |
| ·单效应分析 | 第47-51页 |
| ·双因素交互效应分析 | 第51-53页 |
| ·细胞生长最优培养条件的确定 | 第53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 4 小结 | 第55-57页 |
| 试验四 酪蛋白产品的诱导 | 第57-67页 |
| 1 材料与方法 | 第57-62页 |
| ·试剂与材料 | 第57-58页 |
| ·试剂 | 第57页 |
| ·有关试剂的配置 | 第57-58页 |
| ·培养仪器和用具 | 第58页 |
| ·从羊奶中分离酪蛋白 | 第58页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞乳蛋白的诱导 | 第58页 |
| ·间接ELISA 法检测细胞上清中β-酪蛋白的表达 | 第58-59页 |
| ·不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳测定乳蛋白 | 第59-62页 |
| ·原理 | 第59页 |
| ·试剂制备 | 第59-62页 |
| ·电泳 | 第62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-63页 |
| ·酪蛋白的分离 | 第62-63页 |
| ·间接ELISA法检测细胞上清中β-酪蛋白的表达检测 | 第63页 |
| ·不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳结果 | 第63页 |
| 3 讨论 | 第63-66页 |
| ·酪蛋白的分离 | 第63-64页 |
| ·间接ELISA法检测细胞上清中β-酪蛋白的表达检测 | 第64-65页 |
| ·不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳测定乳蛋白 | 第65-66页 |
| 4 小结 | 第66-67页 |
| 总结 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第76-77页 |
