五龄柞蚕后部丝腺差异表达蛋白研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-22页 |
| ·蛋白质组学 | 第9-12页 |
| ·蛋白质组学的主要研究技术 | 第9-10页 |
| ·比较蛋白质组学及其研究进展 | 第10-12页 |
| ·样品处理 | 第12-14页 |
| ·样品预分离 | 第12页 |
| ·蛋白提取 | 第12-14页 |
| ·干扰物去除 | 第14页 |
| ·双向电泳技术 | 第14-17页 |
| ·一向等电聚焦电泳 | 第15页 |
| ·二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第15页 |
| ·染色方法 | 第15-16页 |
| ·双向电泳研究进展 | 第16-17页 |
| ·蛋白质组学在昆虫中的应用 | 第17-19页 |
| ·在模式昆虫中的应用 | 第17-18页 |
| ·在非模式昆虫中的应用 | 第18-19页 |
| ·展望 | 第19页 |
| ·柞蚕 | 第19-21页 |
| ·柞蚕简介 | 第19-20页 |
| ·丝腺及其功能 | 第20-21页 |
| ·本实验的研究意义 | 第21-22页 |
| 2 柞蚕丝腺蛋白提取 | 第22-27页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-24页 |
| ·柞蚕丝腺材料准备 | 第22-23页 |
| ·丝腺蛋白的提取 | 第23页 |
| ·蛋白质定量 | 第23-24页 |
| ·结果与讨论 | 第24-26页 |
| ·柞蚕丝腺蛋白提取 | 第24-26页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第26页 |
| ·本章小结 | 第26-27页 |
| 3 柞蚕丝腺蛋白双向电泳条件的建立与优化 | 第27-37页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-33页 |
| ·第一向等电聚焦 | 第29-30页 |
| ·第一向胶条的平衡 | 第30页 |
| ·第二向SDS-PAGE | 第30-31页 |
| ·染色 | 第31页 |
| ·pH范围的选择 | 第31页 |
| ·加样量对第一向等电聚焦的影响 | 第31-32页 |
| ·聚焦时间对双向电泳图谱的影响 | 第32页 |
| ·样品预处理改善横条纹 | 第32-33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-36页 |
| ·双向电泳结果 | 第33-34页 |
| ·pH范围的选择 | 第34-35页 |
| ·加样量对第一向等电聚焦的影响 | 第35页 |
| ·聚焦时间对双向电泳图谱的影响 | 第35页 |
| ·样品预处理改善横条纹 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 4 五龄柞蚕后部丝腺差异表达蛋白鉴定 | 第37-50页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-43页 |
| ·第一向等电聚焦 | 第37-39页 |
| ·第二向SDS-PAGE | 第39-40页 |
| ·染色 | 第40-41页 |
| ·双向电泳图谱比对 | 第41页 |
| ·肽指纹图谱分析 | 第41-42页 |
| ·数据库查询 | 第42-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-49页 |
| ·双向电泳图谱比对 | 第43-44页 |
| ·质谱分析鉴定 | 第44-47页 |
| ·表达量上调蛋白分析 | 第47-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 5 GSTT和RPL8的克隆以及RNA水平分析 | 第50-61页 |
| ·实验材料 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-54页 |
| ·柞蚕丝腺总RNA提取 | 第50页 |
| ·引物设计及RT-PCR | 第50-52页 |
| ·基因克隆及鉴定 | 第52-53页 |
| ·实时定量PCR分析 | 第53-54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-60页 |
| ·柞蚕GSTT和RPL8基因的扩增结果 | 第54-55页 |
| ·柞蚕GSTT和RPL8基因的序列分析 | 第55-57页 |
| ·柞蚕GSTT和RPL8基因的同源性与进化分析 | 第57-59页 |
| ·柞蚕GSTT和RPL8基因的表达变化规律分析 | 第59-60页 |
| ·本章小结 | 第60-61页 |
| 结论与展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
