| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-14页 |
| ·研究背景 | 第10-11页 |
| ·柑桔衰退病毒的经济重要性 | 第10页 |
| ·柑桔衰退病毒已有的检测方法 | 第10页 |
| ·植物病害微生物检测技术的发展趋势 | 第10-11页 |
| ·研究目的 | 第11-12页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第12-13页 |
| ·样品RNA 的快速制备 | 第12页 |
| ·以柑桔聚合酶Ⅱ为内参照的柑桔衰退病常规RT-PCR 检测体系的建立 | 第12-13页 |
| ·柑桔衰退病荧光定量RT-PCR 检测体系的建立 | 第13页 |
| ·本研究的创新点 | 第13-14页 |
| 2 文献综述 | 第14-24页 |
| ·CTV 研究历史与为害 | 第14-15页 |
| ·CTV 的历史 | 第14页 |
| ·CTV 对柑桔产业造成的为害与损失 | 第14-15页 |
| ·CTV 的生物学特征 | 第15-17页 |
| ·寄主范围 | 第15-16页 |
| ·株系分化 | 第16页 |
| ·传播途径 | 第16-17页 |
| ·分子生物学特性 | 第17-19页 |
| ·基因组 | 第17-18页 |
| ·亚基因组 | 第18-19页 |
| ·衣壳蛋白 | 第19页 |
| ·CTV 的检测方法 | 第19-22页 |
| ·指示植物检测 | 第19页 |
| ·内含体的镜检 | 第19-20页 |
| ·血清学检测 | 第20-21页 |
| ·分子生物学检测 | 第21-22页 |
| ·柑桔衰退病的防治 | 第22-24页 |
| ·防治策略 | 第22页 |
| ·交叉保护防治柑桔衰退病（MSCP） | 第22-23页 |
| ·抗病毒基因工程 | 第23-24页 |
| 3 材料和方法 | 第24-33页 |
| ·供试材料及采集方法 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第25-26页 |
| ·样品RNA 的快速制备 | 第26-27页 |
| ·浸泡法 | 第26页 |
| ·异硫氰酸胍法 | 第26页 |
| ·改进CTAB 法 | 第26-27页 |
| ·微柱离心法 | 第27页 |
| ·试剂盒提取法 | 第27页 |
| ·CTV 阳性标准品制备 | 第27-28页 |
| ·内参柑桔衰退病毒常规RT-PCR 检测体系的建立 | 第28-29页 |
| ·柑桔衰退病毒和内参引物设计 | 第28页 |
| ·内参常规RT-PCR 体系的优化 | 第28页 |
| ·内参常规RT-PCR 检测性能测定 | 第28-29页 |
| ·内参常规 RT-PCR 对田间柑桔苗木CTV 检测 | 第29页 |
| ·扩增靶片段的克隆与测序 | 第29-31页 |
| ·柑桔衰退病毒荧光定量RT-PCR 检测体系的建立 | 第31-33页 |
| ·引物和TaqMan 探针的设计 | 第31页 |
| ·荧光定量RT-PCR 体系的优化 | 第31页 |
| ·荧光定量RT-PCR 特异性检测 | 第31-32页 |
| ·荧光定量RT-PCR 灵敏度检测及标准曲线的绘制 | 第32页 |
| ·荧光定量RT-PCR 对田间柑桔苗木CTV 检测 | 第32-33页 |
| 4 结果 | 第33-44页 |
| ·不同制样方法比较 | 第33页 |
| ·CTV 阳性标准品制备 | 第33-34页 |
| ·内参常规RT-PCR 检测体系 | 第34-37页 |
| ·内参常规RT-PCR 检测体系的优化 | 第34页 |
| ·内参常规RT-PCR 检测体系性能测定 | 第34-36页 |
| ·应用内参常规RT-PCR 对田间柑桔苗木CTV 检测 | 第36-37页 |
| ·扩增靶片段的克隆与测序结果 | 第37-38页 |
| ·荧光定量RT-PCR 检测体系 | 第38-44页 |
| ·荧光定量 RT-PCR 体系的优化 | 第38-40页 |
| ·荧光定量RT-PCR 特异性检测 | 第40页 |
| ·荧光定量RT-PCR 灵敏度的检测及标准曲线的绘制 | 第40-42页 |
| ·应用荧光定量RT-PCR 对田间柑桔苗木CTV 检测 | 第42-44页 |
| 5 讨论 | 第44-48页 |
| ·不同制样方法对检测结果的影响 | 第44页 |
| ·引物探针检测性能的比较 | 第44-45页 |
| ·两种RT-PCR 检测性能对检测结果的影响 | 第45页 |
| ·RT-PCR 检测假阳性与假阴性的排除与降低 | 第45-46页 |
| ·无害化参照体系的构建与意义 | 第46-47页 |
| ·常规RT-PCR 与荧光定量RT-PCR 检测柑桔衰退病毒的比较 | 第47-48页 |
| 6 结论与后续工作 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 附录 | 第57-64页 |
