摘要 | 第1-4页 |
SUMMARY | 第4-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-35页 |
口蹄疫病毒免疫原性及其整联蛋白受体研究进展 | 第11-27页 |
1 口蹄疫病毒免疫原性研究进展 | 第11-19页 |
·FMDV 编码的蛋白 | 第11-14页 |
·结构蛋白 | 第11-12页 |
·非结构蛋白 | 第12-14页 |
·L 蛋白 | 第12页 |
·P2 区的非结构蛋白 | 第12页 |
·P3 区的非结构蛋白 | 第12-14页 |
·FMDV 的抗原表位 | 第14-15页 |
·型间抗原位点的一致性 | 第14页 |
·O 型FMDV 的抗原表位 | 第14-15页 |
·A 型FMDV 的抗原表位 | 第15页 |
·C 型FMDV 的抗原表位 | 第15页 |
·其它型FMDV 的抗原表位 | 第15页 |
·VP1G-H 环的结构特点及其重要作用 | 第15-17页 |
·VP1 G-H 环的结构特点 | 第16页 |
·VP1 G-H 环的作用 | 第16-17页 |
·FMDV 所诱发的免疫反应 | 第17-19页 |
·B 淋巴细胞与抗体反应 | 第17-18页 |
·B 淋巴细胞抗原表位 | 第17页 |
·FMDV 诱发的抗体 | 第17-18页 |
·抗体中和机制 | 第18页 |
·抗体反应 | 第18页 |
·Th 淋巴细胞的的反应 | 第18-19页 |
·T 淋巴细胞抗原决定簇 | 第18-19页 |
·T 淋巴细胞反应特点 | 第19页 |
2 口蹄疫病毒整联蛋白受体的研究进展 | 第19-27页 |
·整联蛋白的结构 | 第20-21页 |
·整联蛋白构象的转变 | 第21-22页 |
·整联蛋白作为病毒受体的确定 | 第22-24页 |
·整联蛋白的组织分布 | 第24-25页 |
·α_νβ_1 的组织分布 | 第24页 |
·α_νβ_3 的组织 | 第24-25页 |
·α-νβ_6 的组织分布 | 第25页 |
·各型口蹄疫病毒对整联蛋白受体的利用率 | 第25-26页 |
·配体结合区介导病毒感染的作用 | 第26页 |
·各整联蛋白β亚基胞质区的作用 | 第26-27页 |
·展望 | 第27页 |
参考文献 | 第27-35页 |
第二部分 实验研究 | 第35-65页 |
试验一口蹄疫病毒整联蛋白受体β1 亚基的克隆及配体结合区的原核表达 | 第35-50页 |
1 材料与方法 | 第36-40页 |
·材料 | 第36页 |
·组织材料 | 第36页 |
·菌株和质粒 | 第36页 |
·酶和试剂 | 第36页 |
·仪器和设备 | 第36页 |
·方法 | 第36-40页 |
·引物的设计和合成 | 第36-37页 |
·牛源β_1 亚基RNA 的克隆及目的片段的克隆 | 第37-38页 |
·重组质粒pCDNAβ_1 的构建和鉴定 | 第38-40页 |
·β_1 蛋白抗原位点的预测 | 第40页 |
·重组质粒pETLBD 的构建和鉴定 | 第40页 |
·pETLBD 在大肠杆菌中的诱导表达与鉴定 | 第40页 |
2 结果 | 第40-47页 |
·β_1 的扩增、克隆和序列分析 | 第40-43页 |
·真核表达质粒pCDNAβ_1 的构建和鉴定 | 第43-44页 |
·β_1 亚基的抗原性分析 | 第44-46页 |
·LBD 表达载体的构建 | 第46页 |
·融合蛋白的诱导表达 | 第46-47页 |
3 讨论 | 第47-50页 |
试验二口蹄疫病毒整联蛋白β1亚基LBD重组蛋白的纯化 | 第50-56页 |
1 材料与方法 | 第50-53页 |
·材料 | 第50-51页 |
·试剂 | 第50页 |
·仪器 | 第50-51页 |
·相关溶液的配制 | 第51页 |
·方法 | 第51-53页 |
·LBD 重组蛋白的纯化 | 第51-52页 |
·LBD 重组蛋白的复性 | 第52-53页 |
·LBD 重组蛋白的浓缩 | 第53页 |
·浓缩LBD 蛋白浓度、纯度的测定 | 第53页 |
2 结果 | 第53-54页 |
·亲和层析法纯化流程结果 | 第53页 |
·浓缩LBD 蛋白浓度、纯度的测定 | 第53-54页 |
3 讨论 | 第54-56页 |
试验三重组LBD 蛋白多克隆抗体的制备与鉴定 | 第56-63页 |
1 材料和方法 | 第56-60页 |
·材料 | 第56-58页 |
·抗原 | 第56页 |
·试剂 | 第56-57页 |
·免疫动物 | 第57页 |
·溶液配制 | 第57-58页 |
·方法 | 第58-60页 |
·免疫方案 | 第58页 |
·抗体水平的监测 | 第58页 |
·抗体的ELISA 检测 | 第58-59页 |
·抗体的纯化 | 第59页 |
·抗体的特异性检测 | 第59-60页 |
2 结果 | 第60-63页 |
·抗体效价检测 | 第60-62页 |
·抗体特异性检测 | 第62-63页 |
3 讨论 | 第63页 |
参考文献 | 第63-65页 |
结论 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
个人简介 | 第67-68页 |
导师简介 | 第68-69页 |