摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 引言 | 第9-11页 |
2 材料和方法 | 第11-22页 |
·菌种与玉米品种 | 第11页 |
·供试培养基 | 第11页 |
·供试药品及主要试剂 | 第11页 |
·主要仪器 | 第11-12页 |
·玉米大斑病菌小柱孢酮脱水酶基因SCD的克隆 | 第12-15页 |
·引物设计 | 第12页 |
·病菌基因组DNA及总RNA提取 | 第12-13页 |
·cDNA第一链的合成 | 第13页 |
·病菌SCD和PKS基因组DNA和cDNA同源片段的获得 | 第13页 |
·DNA片段的纯化 | 第13-14页 |
·PCR产物与pMD18-T载体的连接 | 第14页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第14页 |
·连接产物转化感受态细胞 | 第14-15页 |
·碱裂解法小量提取质粒 | 第15页 |
·基因全长的获得 | 第15-19页 |
·5’RACE扩增 | 第15-17页 |
·3’RACE扩增 | 第17-18页 |
·Genome Walking技术获得PKS基因下游DNA序列 | 第18-19页 |
·基因的拼结和全长cDNA的获得 | 第19页 |
·基因的功能分析 | 第19页 |
·基因DNA全长的获得和基因结构分析 | 第19页 |
·基因的拷贝数分析 | 第19-21页 |
·小柱孢酮脱水酶基因SCD的抑制剂分析 | 第21-22页 |
·Carpropamid对玉米大斑病菌分生孢子萌发的影响 | 第21页 |
·Carpropamid对玉米大斑病菌附着胞形成的影响 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22-42页 |
·基因组DNA和总RNA的提取及cDNA的合成 | 第22页 |
·SCD和PKS基因同源片段的获得 | 第22-25页 |
·基因简并引物的设计 | 第22-23页 |
·PCR产物的纯化、克隆、测序 | 第23-25页 |
·SCD和PKS基因全序列的获得 | 第25-30页 |
·RACE技术获得SCD的cDNA全长 | 第25-26页 |
·SMART RACE和Genome Walking技术获得PKS基因序列 | 第26-30页 |
·玉米大斑病菌SCD基因DNA全长和基因的结构分析 | 第30-32页 |
·基因的相似性及基因可能功能分析 | 第32-40页 |
·SCD基因的相似性及基因可能功能分析 | 第32-36页 |
·PKS基因的相似性及基因可能功能分析 | 第36-40页 |
·SOUTHERN杂交 | 第40-41页 |
·探针的制备 | 第40页 |
·Southern杂交 | 第40-41页 |
·玉米大斑病菌小柱孢酮脱水酶基因SCD的抑制剂分析 | 第41-42页 |
·Carpropamid对分生孢子萌发的影响 | 第41页 |
·Carpropamid对附着孢形成的影响 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-46页 |
·利用蛋白质的保守性氨基酸序列进行同源基因克隆 | 第42页 |
·RACE技术获得基因cDNA全长 | 第42-43页 |
·GENOME WALKING技术获得已知基因片段的侧翼序列 | 第43页 |
·PKS的结构域及可能功能 | 第43-44页 |
·SCD基因的结构及可能功能 | 第44-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
在读期间发表的学术论文 | 第53-54页 |
作者简历 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |