| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-30页 |
| 1. 引言 | 第12页 |
| 2. 黑麦草转基因技术的研究进展 | 第12-22页 |
| ·黑麦草遗传转化的受体系统 | 第13-17页 |
| ·愈伤组织培养 | 第13-15页 |
| ·悬浮细胞培养 | 第15页 |
| ·原生质体培养 | 第15-16页 |
| ·花药培养 | 第16页 |
| ·茎尖分生组织培养 | 第16-17页 |
| ·黑麦草的遗传转化方法 | 第17-21页 |
| ·原生质体直接吸入方法 | 第17页 |
| ·硅碳纤维介导的直接基因转化 | 第17-18页 |
| ·基因枪轰击法 | 第18-19页 |
| ·农杆菌介导法 | 第19-21页 |
| ·转基因草坪草外源基因的表达和鉴定 | 第21-22页 |
| 3. 草坪地下害虫蛴螬的危害及防治 | 第22-23页 |
| ·蛴螬的危害 | 第22-23页 |
| ·蛴螬的防治 | 第23页 |
| 4. 苏云金芽孢杆菌cry8 类基因的研究 | 第23-27页 |
| ·Bt 杀虫晶体蛋白及其分类 | 第23-24页 |
| ·cry8 类基因的研究 | 第24页 |
| ·转Bt 基因植物的研究进展 | 第24-27页 |
| ·转Bt 基因植物概述 | 第24-25页 |
| ·提高外源抗虫基因在植物体内的表达 | 第25-26页 |
| ·防止害虫产生抗性的策略 | 第26-27页 |
| 5. 利用转基因技术对草坪草除草剂抗性的改良 | 第27-28页 |
| 6. 草坪草遗传转化中存在的主要问题和展望 | 第28-30页 |
| 7. 本实验的研究目的和意义 | 第30页 |
| 第二章 黑麦草成熟胚离体再生体系的建立 | 第30-36页 |
| 1. 材料 | 第30-31页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30-31页 |
| 2. 方法 | 第31-32页 |
| ·黑麦草种子的消毒 | 第31页 |
| ·愈伤组织的诱导与继代 | 第31页 |
| ·胚性愈伤组织的继代 | 第31页 |
| ·植株的再生 | 第31-32页 |
| ·炼苗和移栽 | 第32页 |
| ·除草剂梯度筛选实验 | 第32页 |
| ·数据处理 | 第32页 |
| 3. 结果与分析 | 第32-36页 |
| ·不同2,4-D 浓度对愈伤组织的诱导及状态的影响 | 第32-34页 |
| ·不同浓度的6-BA 对愈伤组织分化的影响 | 第34-35页 |
| ·再生植株的生根和移栽 | 第35-36页 |
| ·筛选剂浓度测定实验 | 第36页 |
| 第三章 农杆菌介导的黑麦草的遗传转化及分子鉴定 | 第36-51页 |
| 1. 材料 | 第36-40页 |
| ·所用植物材料及菌株 | 第36-37页 |
| ·质粒载体的构造 | 第37-39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·培养基 | 第39-40页 |
| 2. 方法 | 第40-44页 |
| ·表达载体的构建 | 第40-42页 |
| ·基因片段的扩增 | 第40页 |
| ·基因片段（8c、8e、89）的测序 | 第40-42页 |
| ·双元表达载体的构建 | 第42页 |
| ·质粒的提取及浓度的测定 | 第42页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第42页 |
| ·双元载体转化农杆菌 | 第42-43页 |
| ·农杆菌介导的黑麦草的遗传转化 | 第43页 |
| ·方法 | 第43页 |
| ·β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因表达分析 | 第43-44页 |
| ·β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因的瞬时表达分析 | 第43-44页 |
| ·β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因在转基因植株中的表达分析 | 第44页 |
| 3. 转基因植株的分子鉴定 | 第44-45页 |
| ·黑麦草基因组DNA 的提取 | 第44-45页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第45页 |
| 4. 结果与分析 | 第45-51页 |
| ·表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·不同菌液浓度对gus 基因瞬时表达的影响 | 第46-48页 |
| ·黑麦草转基因植株的PCR 检测 | 第48-50页 |
| ·转基因黑麦草植株中β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因的表达分析 | 第50页 |
| ·转基因植株的除草剂抗性实验 | 第50-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-54页 |
| ·外植体的选择 | 第51-52页 |
| ·生长激素2,4-D 对愈伤组织状态的调控作用 | 第52页 |
| ·6-BA 对愈伤组织分化的作用 | 第52-53页 |
| ·农杆菌转化条件的优化及增强抑菌效果 | 第53页 |
| ·选择剂的选用 | 第53-54页 |
| 第五章 结论和后继工作 | 第54-56页 |
| ·结论 | 第54页 |
| ·后继工作 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 附录 主要药品母液及贮存液配制 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 个人简历 | 第65页 |
