提要 | 第1-9页 |
英文缩略词表 | 第9-11页 |
第一篇 前言 | 第11-36页 |
第一章 人肝细胞再生因子基因研究进展 | 第11-19页 |
第二章 HGF 的生物学功能及其应用 | 第19-26页 |
第三章 肝纤维化机制及基因治疗研究进展 | 第26-34页 |
第四章 论文的提出及意义 | 第34-36页 |
第二篇 实验研究 | 第36-96页 |
第一章 人肝细胞再生因子真核表达载体的构建及C057 细胞中表达 | 第36-57页 |
第一节 实验材料和实验方法 | 第36-46页 |
一、实验材料 | 第36-40页 |
二、实验方法 | 第40-46页 |
(一) 人HGFcDNA 的真核表达载体(PCT-neo-HGF)的构建及阳性克降筛选 | 第40-43页 |
(二) PCI-neo-HGF 转染C057 细胞 | 第43-45页 |
(三) 重组人HGF 表达产物检测采用ELISA 法进行检测 | 第45-46页 |
第二节 结果 | 第46-54页 |
一、人肝细胞再生因子真核表达载体的构建 | 第46-53页 |
二、PCI-HGF 在C057 细胞中的表达 | 第53-54页 |
第三节 讨论 | 第54-57页 |
第二章 人肝细胞再生因子基因(PCI-neo-HGF)的生物学效应及机制体外初步的研究 | 第57-78页 |
第一节 实验材料和实验方法 | 第57-69页 |
一、实验材料 | 第57-61页 |
二、实验方法 | 第61-69页 |
(一) 细胞的培养 | 第61-62页 |
(二) PCI-neo-HGF 基因转染和克隆筛选 | 第62-64页 |
(三) 转染后细胞鉴定-HGF 蛋白表达检测 | 第64-67页 |
(四) 转染PCI-neo-HGF 对正常肝细胞的生物学效应 | 第67-68页 |
(五) 转染PCI-neo-HGF/HL-7702 细胞、转染 PCI-new-HGF/CFSC-2G 细胞caspase-3、-8、-9 的测定 | 第68-69页 |
第二节 结果 | 第69-74页 |
(一) PCI-neo-HGF 基因转染HL-7702 细胞和克隆筛选结果 | 第69页 |
(二) 转染后细胞鉴定 | 第69-70页 |
(三) 细胞形态学观察 | 第70-71页 |
(四) 转染PCI-new-HGF 的HL-7702 细胞增殖活性测定结果 | 第71-74页 |
(五) 转染PCI-neo-HGF /HL-7702细胞、转染PCI-new-HGF /CFSC-2G细胞caspase-3、-8、-9 蛋白表达的变化 | 第74页 |
第三节 讨论 | 第74-78页 |
第三章 PCI-neo--HGF 对实验性大鼠肝纤维化的基因治疗 | 第78-96页 |
第一节 实验材料和实验方法 | 第78-82页 |
一、实验材料 | 第78-79页 |
二、实验方法 | 第79-81页 |
(一) 大鼠纤维化模型的建立 | 第79-80页 |
(二) 肝纤维化大鼠HGF 表达情况 | 第80-81页 |
(三) 透明酯酸、层粘蛋白、Ⅲ、Ⅳ型胶原的检测 | 第81页 |
(四) 肝功能测定采用日立7170A 全自动生化分析仪测定 | 第81页 |
(五) 石蜡切片HE 及Masson 染色观察病理形态 | 第81页 |
三、观察指标 | 第81-82页 |
第二节 结果 | 第82-93页 |
一、大鼠一般情况 | 第82页 |
二、各组大鼠肝组织中HGF 表达情况 | 第82-84页 |
三、血清HGF 表达情况 | 第84-85页 |
四、PCI-neo-HGF 对大鼠肝功能的影响 | 第85页 |
五、PCI-neo-HGF 对大鼠肝纤维化指标的影响 | 第85页 |
六、病理形态学观察结果 | 第85-93页 |
第三节 讨论 | 第93-96页 |
结论 | 第96-97页 |
本研究创新点及意义 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-112页 |
攻读期间发表论文 | 第112-113页 |
中文摘要 | 第113-116页 |
英文摘要 | 第116-120页 |
致谢 | 第120页 |