猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及结构蛋白基因的克隆与序列分析
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-32页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征及历史 | 第12-13页 |
| ·PRRS的危害及流行病学特点 | 第13-15页 |
| ·PRRS的危害 | 第13页 |
| ·PRRS的流行病学 | 第13-15页 |
| ·PRRS的病原特性 | 第15-20页 |
| ·PRRSV的分类 | 第15页 |
| ·PRRSV理化特性 | 第15-16页 |
| ·PRRSV的抗原性 | 第16页 |
| ·PRRSV的细胞增殖特性 | 第16-17页 |
| ·PRRSV的致病机理 | 第17-20页 |
| ·PRRSV分子生物学特征 | 第20-27页 |
| ·抗体依赖性增强作用 | 第20-21页 |
| ·PRRSV持续感染 | 第21页 |
| ·PRRSV的基因组变异和RNA重组 | 第21-23页 |
| ·PRRSV的抗原性变异 | 第23-24页 |
| ·PRRSV的毒力变异 | 第24-25页 |
| ·PRRSV的准种 | 第25-27页 |
| ·PRRSV分子生物学研究进展 | 第27-32页 |
| ·PRRSV基因组的结构与功能 | 第27-28页 |
| ·PRRSV的蛋白质 | 第28-32页 |
| 第2章 研究目的和意义 | 第32-33页 |
| 第3章 实验材料与方法 | 第33-43页 |
| ·实验材料 | 第33-36页 |
| ·细胞与菌珠 | 第33页 |
| ·载体与质粒 | 第33页 |
| ·主要药品与试剂盒 | 第33-34页 |
| ·主要培养基及其配制 | 第34页 |
| ·缓冲液 | 第34-35页 |
| ·本实验所用的引物与扩增条件 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-43页 |
| ·病料采集与处理 | 第36页 |
| ·细胞的培养 | 第36-37页 |
| ·病毒的分离 | 第37页 |
| ·TCID_(50)的测定 | 第37页 |
| ·微量中和试验(固定病毒-稀释血清法) | 第37-38页 |
| ·电镜观察(负染法) | 第38页 |
| ·PRRSV基因组RNA的提取 | 第38页 |
| ·RT-PCR扩增与检测 | 第38-39页 |
| ·PCR与酶切产物的回收与纯化 | 第39页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第39-40页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第40页 |
| ·连接产物的转化 | 第40页 |
| ·质粒的小量制备(改良的碱裂解法) | 第40-41页 |
| ·质粒的大量制备 | 第41-42页 |
| ·阳性克隆质粒的酶切鉴定 | 第42页 |
| ·序列分析 | 第42-43页 |
| 第4章 结果与分析 | 第43-60页 |
| ·病料接种后细胞病变 | 第43-44页 |
| ·所分离病毒的TCID_(50)的测定结果 | 第44页 |
| ·中和试验结果 | 第44页 |
| ·电镜观察结果 | 第44-45页 |
| ·HS结构蛋白基因的扩增与克隆 | 第45-47页 |
| ·核苷酸同源性分析 | 第47-48页 |
| ·氨基酸同源性分析 | 第48-58页 |
| ·核苷酸进化树绘制 | 第58-60页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第60-63页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| ·病毒的分离鉴定 | 第60页 |
| ·PRRSV的遗传变异分析 | 第60-62页 |
| ·结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
