| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-21页 |
| ·问题的提出 | 第10-11页 |
| ·葡萄卷叶病研究进展 | 第11-19页 |
| ·葡萄卷叶病的症状及危害 | 第11-12页 |
| ·葡萄卷叶病的病原及病毒的寄主范围 | 第12页 |
| ·GLRaVs的传播 | 第12-13页 |
| ·GLRaVs的分类及基本特征 | 第13-15页 |
| ·GLRaVs的检测方法 | 第15-18页 |
| ·生物学检测 | 第15-16页 |
| ·血清学检测 | 第16页 |
| ·分子生物学检测 | 第16-18页 |
| ·dsRNA技术 | 第16-17页 |
| ·分子杂交 | 第17页 |
| ·PCR技术 | 第17-18页 |
| ·GLD的防治措施 | 第18-19页 |
| ·GLRaV-1研究进展 | 第19-20页 |
| ·研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-28页 |
| ·供试植物及主要试剂 | 第21页 |
| ·供试植物 | 第21页 |
| ·试验试剂 | 第21页 |
| ·研究方法 | 第21-28页 |
| ·双抗体夹心ELISA | 第21-22页 |
| ·dsRNA提取 | 第22页 |
| ·RT-PCR检测 | 第22-24页 |
| ·引物设计与合成 | 第22-23页 |
| ·反转录合成第一链cDNA | 第23页 |
| ·PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·1%琼脂糖凝胶电泳 | 第24页 |
| ·6%聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第24页 |
| ·免疫捕捉RT-PCR | 第24-25页 |
| ·基因克隆与序列测定 | 第25-28页 |
| ·PCR产物的纯化与回收 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| ·连接 | 第26页 |
| ·热击转化 | 第26页 |
| ·PCR法鉴定阳性克隆 | 第26页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第26-27页 |
| ·阳性克隆的酶切鉴定 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-36页 |
| ·田间葡萄植株GLD症状的调查 | 第28-29页 |
| ·GLRaV-1和GLRaV-7的血清学检测结果 | 第29页 |
| ·GLRaVs的RT-PCR检测结果 | 第29-33页 |
| ·GLRaVs的IC-RT-PCR检测结果 | 第33页 |
| ·GLRaV-1及GLRaV-7基因片段的克隆与序列分析 | 第33-36页 |
| ·GLRaV-1 CPd2基因片段的克隆和序列分析 | 第33-34页 |
| ·GLRaV-7 HSP70基因片段的克隆与序列分析 | 第34-36页 |
| 4 结论与讨论 | 第36-38页 |
| 参考文献 | 第38-43页 |
| 附 试验所用溶液的配制 | 第43-46页 |
| 致谢 | 第46页 |
