| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| 1 核盘菌的致病机理 | 第11-17页 |
| ·核盘菌及其危害 | 第11页 |
| ·核盘菌的致病机理及致病相关因子研究 | 第11-16页 |
| ·认识核盘菌致病机理的重要意义 | 第16-17页 |
| 2 基因功能的研究方法 | 第17-18页 |
| ·正向遗传学 | 第17页 |
| ·反向遗传学 | 第17-18页 |
| 3 农杆菌介导的真菌遗传转化研究 | 第18-19页 |
| ·真菌遗传转化研究手段 | 第18页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第18-19页 |
| 4 RNAi技术在基因功能研究中的应用 | 第19-22页 |
| ·RNAi的发现 | 第19-20页 |
| ·RNAi的分子机制 | 第20页 |
| ·获得siRNAs的途径 | 第20-21页 |
| ·RNAi技术在真菌基因功能研究上的应用 | 第21-22页 |
| 5 Cyclophilin基因在病原真菌中的研究 | 第22-25页 |
| ·肽脯氨酰顺反异构酶 | 第22-23页 |
| ·Cyclophilin基因家族 | 第23-24页 |
| ·Cyclophilin在病原真菌中的作用 | 第24-25页 |
| 6 本项研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 农杆菌介导的核盘菌菌丝转化体系的建立 | 第26-44页 |
| 1 材料与方法 | 第26-33页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-41页 |
| ·转化载体的构建 | 第33页 |
| ·重组质粒pTFSS导入农杆菌的鉴定 | 第33页 |
| ·潮霉素抑制核盘菌生长的最低浓度的筛选 | 第33-34页 |
| ·头孢霉素抑制农杆菌生长的浓度筛选 | 第34-35页 |
| ·头孢霉素对核盘菌生长的影响 | 第35页 |
| ·农杆菌介导的核盘菌转化 | 第35-36页 |
| ·转化子的PCR鉴定 | 第36页 |
| ·转化子的测序结果分析 | 第36-37页 |
| ·转化子的Southern点杂交鉴定 | 第37页 |
| ·核盘菌转化子的稳定性分析 | 第37-39页 |
| ·核盘菌转化子的生物学特性 | 第39-41页 |
| 3 小结和讨论 | 第41-44页 |
| ·小结 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-44页 |
| 第三章 农杆菌介导核盘菌菌丝转化方法的改进和优化 | 第44-55页 |
| 1 材料和方法 | 第44-47页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-52页 |
| ·农杆菌介导的核盘菌菌丝块的转化 | 第47-48页 |
| ·农杆菌介导的核盘菌菌核的转化 | 第48页 |
| ·农杆菌介导的核盘菌酶解后菌丝的转化 | 第48-49页 |
| ·农杆菌介导的核盘菌菌丝转化体系的优化 | 第49-52页 |
| 3 小结与讨论 | 第52-55页 |
| ·小结 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| 第四章 核盘菌SSDRV下调基因SS-CYP1的功能初步研究 | 第55-76页 |
| 1 材料与方法 | 第55-61页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-73页 |
| ·核盘菌Ss-CYP1基因的DNA序列分析 | 第61-62页 |
| ·核盘菌Cyclophilin基因家族成员的分析 | 第62-64页 |
| ·赤霉菌内含子序列的获取 | 第64-65页 |
| ·核盘菌Ss-CYP1基因沉默载体的构建 | 第65页 |
| ·质粒pSILENCE导入农杆菌后的鉴定 | 第65-66页 |
| ·核盘菌Ss-CYP1基因超量表达载体和反向表达载体的构建 | 第66页 |
| ·质粒pCYO和pCYS导入农杆菌后的鉴定 | 第66-67页 |
| ·Ss-CYP1基因沉默载体的转化子的生物学特性 | 第67-69页 |
| ·Ss-CYP1基因超量表达载体的转化子的生物学特性 | 第69-71页 |
| ·Ss-CYP1基因反向表达的转化子的生物学特性 | 第71-73页 |
| 3 小结与讨论 | 第73-76页 |
| ·小结 | 第73页 |
| ·讨论 | 第73-76页 |
| 第五章 结论和展望 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 附录 | 第88-92页 |
