中文摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表(ABBREVIATIONS) | 第11-12页 |
主要性状的中英文对照和缩写 | 第12-13页 |
1 文献综述 | 第13-20页 |
·前言 | 第13页 |
·猪生长性状相关转录因子研究进展 | 第13-14页 |
·猪转录因子新基因的分离方法 | 第14-16页 |
·生物信息学在分离克隆基因中的应用 | 第15页 |
·基因文库技术分离目的基因 | 第15页 |
·基因芯片技术分离目的基因 | 第15-16页 |
·SNP的发现与检测 | 第16页 |
·四个拟分离基因的研究进展 | 第16-20页 |
·TEAD基因家族两个基因TEF-1和RTEF-1的研究进展 | 第16-18页 |
·KLF家族两个基因KLF6和KLF7的研究进展 | 第18-20页 |
2 研究的目的和意义 | 第20-21页 |
3 材料与方法 | 第21-35页 |
·材料 | 第21-25页 |
·组织样品 | 第21页 |
·DNA样品 | 第21页 |
·载体和菌株 | 第21-22页 |
·主要试剂 | 第22-23页 |
·试剂的配制 | 第23-25页 |
·主要仪器设备 | 第25页 |
·主要分子生物学软件和网站 | 第25页 |
·方法 | 第25-35页 |
·候选基因的分离 | 第25-28页 |
·电脑克隆 | 第25页 |
·引物设计 | 第25-26页 |
·总RNA提取及电泳检测 | 第26-27页 |
·反转录反应(Reverse transcription RT) | 第27页 |
·PCR产物的纯化、克隆和测序 | 第27-28页 |
·基因染色体定位的SCHP和RH法 | 第28-29页 |
·引物设计 | 第28页 |
·PCR扩增分型方法 | 第28-29页 |
·数据分析方法 | 第29页 |
·基因组织表达谱与时空表达谱研究 | 第29-30页 |
·总RNA的提取及RNA浓度与质量的检测 | 第29页 |
·RT-PCR扩增体系 | 第29-30页 |
·PCR扩增、检测及数据分析 | 第30页 |
·基因的多态性检测方法 | 第30-31页 |
·PCR反应 | 第30-31页 |
·RFLP | 第31页 |
·基因多态性与性状的关联分析方法 | 第31-32页 |
·猪RTEF-1基因的原核表达及蛋白纯化 | 第32-35页 |
·pET28a-RTEF-1重组原核表达载体的构建 | 第32-33页 |
·RTEF-1蛋白的诱导表达 | 第33页 |
·判断蛋白质的可溶性 | 第33-34页 |
·RTEF-1蛋白的纯化 | 第34-35页 |
4 结果 | 第35-49页 |
·基因的克隆结果 | 第35-39页 |
·猪TEF-1基因分离及其序列分析 | 第35-37页 |
·猪RTEF-1基因分离及其序列分析 | 第37-38页 |
·猪KLF6基因分离及其序列分析 | 第38-39页 |
·猪KLF7基因分离及其序列分析 | 第39页 |
·基因的染色体定位结果 | 第39-41页 |
·染色体区域定位结果 | 第39-40页 |
·TEF-1基因染色体区域定位结果 | 第39-40页 |
·精细定位结果 | 第40-41页 |
·基因的时空表达结果 | 第41-43页 |
·TEF-1和RTEF-1基因的时空表达结果 | 第41-42页 |
·KLF6和KLF7基因的组织表达结果 | 第42-43页 |
·猪TEF-1基因遗传多态检测分析结果 | 第43-44页 |
·猪TEF-1的遗传变异与部分经济性状的关联分析结果 | 第44-45页 |
·KLF6基因的多态检测分析 | 第45页 |
·RTEF-1基因的原核表达及纯化 | 第45-49页 |
·RT-PCR扩增结果 | 第45-46页 |
·猪RTEF-1基因的原核表达载体的构建 | 第46页 |
·原核表达载体pET28a—RTEF-1的鉴定 | 第46-47页 |
·重组子的菌液PCR鉴定结果 | 第46-47页 |
·重组子的酶切鉴定结果 | 第47页 |
·重组子中的插入基因片段的测序鉴定结果 | 第47页 |
·IPTG诱导重组原核表达载体表达RTEF-1蛋白 | 第47-48页 |
·RTEF-1重组蛋白的纯化结果 | 第48-49页 |
5 讨论 | 第49-53页 |
·基于表达序列标签(EST)的基因的功能研究 | 第49页 |
·利用EST信息分离基因 | 第49页 |
·利用EST信息分析基因变异 | 第49页 |
·关于基因的定位 | 第49-50页 |
·关于基因的时空表达谱 | 第50-51页 |
·关于TEF-1基因的多态检测及性状关联分析 | 第51页 |
·关于基因的原核表达及蛋白纯化 | 第51-52页 |
·关于选择性剪接 | 第52-53页 |
6 小结 | 第53-54页 |
·本研究获得的结果 | 第53页 |
·本研究的创新点 | 第53页 |
·本研究不足之处及下一步值得研究的工作 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60页 |