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猪四个转录因子基因克隆、表达、定位及其与部分性状的关联分析

中文摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表(ABBREVIATIONS)第11-12页
主要性状的中英文对照和缩写第12-13页
1 文献综述第13-20页
   ·前言第13页
   ·猪生长性状相关转录因子研究进展第13-14页
   ·猪转录因子新基因的分离方法第14-16页
     ·生物信息学在分离克隆基因中的应用第15页
     ·基因文库技术分离目的基因第15页
     ·基因芯片技术分离目的基因第15-16页
   ·SNP的发现与检测第16页
   ·四个拟分离基因的研究进展第16-20页
     ·TEAD基因家族两个基因TEF-1和RTEF-1的研究进展第16-18页
     ·KLF家族两个基因KLF6和KLF7的研究进展第18-20页
2 研究的目的和意义第20-21页
3 材料与方法第21-35页
   ·材料第21-25页
     ·组织样品第21页
     ·DNA样品第21页
     ·载体和菌株第21-22页
     ·主要试剂第22-23页
     ·试剂的配制第23-25页
     ·主要仪器设备第25页
     ·主要分子生物学软件和网站第25页
   ·方法第25-35页
     ·候选基因的分离第25-28页
       ·电脑克隆第25页
       ·引物设计第25-26页
       ·总RNA提取及电泳检测第26-27页
       ·反转录反应(Reverse transcription RT)第27页
       ·PCR产物的纯化、克隆和测序第27-28页
     ·基因染色体定位的SCHP和RH法第28-29页
       ·引物设计第28页
       ·PCR扩增分型方法第28-29页
       ·数据分析方法第29页
     ·基因组织表达谱与时空表达谱研究第29-30页
       ·总RNA的提取及RNA浓度与质量的检测第29页
       ·RT-PCR扩增体系第29-30页
       ·PCR扩增、检测及数据分析第30页
     ·基因的多态性检测方法第30-31页
       ·PCR反应第30-31页
       ·RFLP第31页
     ·基因多态性与性状的关联分析方法第31-32页
     ·猪RTEF-1基因的原核表达及蛋白纯化第32-35页
       ·pET28a-RTEF-1重组原核表达载体的构建第32-33页
       ·RTEF-1蛋白的诱导表达第33页
       ·判断蛋白质的可溶性第33-34页
       ·RTEF-1蛋白的纯化第34-35页
4 结果第35-49页
   ·基因的克隆结果第35-39页
     ·猪TEF-1基因分离及其序列分析第35-37页
     ·猪RTEF-1基因分离及其序列分析第37-38页
     ·猪KLF6基因分离及其序列分析第38-39页
     ·猪KLF7基因分离及其序列分析第39页
   ·基因的染色体定位结果第39-41页
     ·染色体区域定位结果第39-40页
       ·TEF-1基因染色体区域定位结果第39-40页
     ·精细定位结果第40-41页
   ·基因的时空表达结果第41-43页
     ·TEF-1和RTEF-1基因的时空表达结果第41-42页
     ·KLF6和KLF7基因的组织表达结果第42-43页
   ·猪TEF-1基因遗传多态检测分析结果第43-44页
   ·猪TEF-1的遗传变异与部分经济性状的关联分析结果第44-45页
   ·KLF6基因的多态检测分析第45页
   ·RTEF-1基因的原核表达及纯化第45-49页
     ·RT-PCR扩增结果第45-46页
     ·猪RTEF-1基因的原核表达载体的构建第46页
     ·原核表达载体pET28a—RTEF-1的鉴定第46-47页
       ·重组子的菌液PCR鉴定结果第46-47页
       ·重组子的酶切鉴定结果第47页
       ·重组子中的插入基因片段的测序鉴定结果第47页
     ·IPTG诱导重组原核表达载体表达RTEF-1蛋白第47-48页
     ·RTEF-1重组蛋白的纯化结果第48-49页
5 讨论第49-53页
   ·基于表达序列标签(EST)的基因的功能研究第49页
     ·利用EST信息分离基因第49页
     ·利用EST信息分析基因变异第49页
   ·关于基因的定位第49-50页
   ·关于基因的时空表达谱第50-51页
   ·关于TEF-1基因的多态检测及性状关联分析第51页
   ·关于基因的原核表达及蛋白纯化第51-52页
   ·关于选择性剪接第52-53页
6 小结第53-54页
   ·本研究获得的结果第53页
   ·本研究的创新点第53页
   ·本研究不足之处及下一步值得研究的工作第53-54页
参考文献第54-60页
致谢第60页

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