| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-14页 |
| 目录 | 第14-17页 |
| 缩写词简表 | 第17-18页 |
| 论文正文 | 第18页 |
| 第一章 前言 | 第18-22页 |
| 技术路线图 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-38页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·细胞和实验动物 | 第22页 |
| ·菌株和质粒载体 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22-24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-38页 |
| ·RT-PCR检测内源性c-Myc在各种鼻咽癌细胞中的表达 | 第24-27页 |
| ·总RNA的抽提 | 第25页 |
| ·用DNase-Ⅰ消化RNA中痕量的DNA | 第25-26页 |
| ·差异RT-PCR | 第26-27页 |
| ·Western Blot检测内源性c-Myc在鼻咽癌细胞株的表达 | 第27-28页 |
| ·制备用于Western Blot的蛋白质 | 第27页 |
| ·BCA测蛋白浓度 | 第27-28页 |
| ·Western Blot | 第28页 |
| ·RNAi表达载体的构建及5-8F稳定干扰细胞系的建立 | 第28-33页 |
| ·siRNA-c-Myc靶序列的设计和合成 | 第28-30页 |
| ·构建真核表达载体pRNAT-siRNA-c-Myc | 第30-32页 |
| ·siRNA-c-Myc Ⅰ和siRNA-c-Myc Ⅱ的稳定转染 | 第32-33页 |
| ·Western Blot检测稳定转染细胞5-8F中c-Myc的表达 | 第33页 |
| ·差异RT-PCR检测稳定转染细胞5-8F中c-Myc的表达 | 第33页 |
| ·透射电镜扫描观察干扰前后对5-8F细胞超微结构的影响 | 第33-34页 |
| ·细胞平板克隆形成试验 | 第34页 |
| ·MTT检测 | 第34-35页 |
| ·细胞生长曲线的绘制 | 第35页 |
| ·流式细胞仪分析细胞周期 | 第35-36页 |
| ·细胞划痕试验 | 第36页 |
| ·Western Blot检测干扰前后对5-8F细胞Rb/E2F信号转导通路的影响 | 第36页 |
| ·体内裸鼠成瘤试验 | 第36-38页 |
| 第三章 结果 | 第38-52页 |
| ·RT-PCR和Western Blot检测各种鼻咽癌细胞中内源性c-Myc的表达 | 第38-39页 |
| ·pRNAT-siRNA-c-Myc真核表达载体的构建和鉴定 | 第39-41页 |
| ·稳定转染siRNA-c-Myc Ⅰ、siRNA-c-Myc Ⅱ和siRNA-Control的5-8F细胞株的建立和筛选 | 第41-43页 |
| ·透射电镜观察抑制c-Myc表达后5-8F细胞超微结构的改 | 第43-44页 |
| ·RNAi抑制c-Myc表达后降低5-8F细胞的平板克隆形成能力 | 第44-45页 |
| ·MTT检测 | 第45-46页 |
| ·生长曲线的绘制 | 第46页 |
| ·细胞周期分析 | 第46-48页 |
| ·抑制c-Myc表达影响Rb/E2F信号转导通路相关分子的表达 | 第48页 |
| ·划痕试验 | 第48-49页 |
| ·体内裸鼠成瘤试验 | 第49-52页 |
| 第四章 讨论 | 第52-63页 |
| ·RNAi的原理与研究进展 | 第52-55页 |
| ·c-myc通过RNAi在鼻咽癌中的功能研究 | 第55-60页 |
| ·RNAi应用于c-myc基因的研究 | 第55-56页 |
| ·c-myc通过调控细胞周期进程参与鼻咽癌的发生 | 第56-60页 |
| ·c-myc基因及蛋白与肿瘤治疗 | 第60页 |
| ·有待进一步研究的问题及意义 | 第60-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 综述 | 第70-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 个人简历 | 第82页 |
