| 论文摘要(中文) | 第1-7页 |
| 论文摘要(英文) | 第7-11页 |
| 英文缩略词表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-16页 |
| 实验仪器与试剂 | 第16-20页 |
| 1 实验仪器 | 第16-17页 |
| 2 试剂 | 第17-20页 |
| 第一部分 三株肺癌细胞APC基因启动子区甲基化状态的检测 | 第20-37页 |
| 一 实验方法 | 第21-29页 |
| 1 标本收集 | 第21页 |
| 2 细胞培养 | 第21页 |
| 3 细胞克隆培养 | 第21页 |
| 4 脐带血单个核细胞分离 | 第21-22页 |
| 5 酚/氯仿抽提法提取DNA | 第22页 |
| 6 DNA浓度和纯度的检测 | 第22-23页 |
| 7 甲基化阳性和阴性标准品的制备 | 第23页 |
| 8 DNA的亚硫酸氢盐化学修饰 | 第23-24页 |
| 9 MSP | 第24-25页 |
| 10 BSP | 第25页 |
| 11 TA克隆测序 | 第25-27页 |
| 12 基因芯片 | 第27-29页 |
| 二 实验结果 | 第29-33页 |
| 1 MSP | 第29页 |
| 2 TA克隆测序 | 第29-32页 |
| 3 基因芯片 | 第32-33页 |
| 三 分析讨论 | 第33-37页 |
| 第二部分 三株肺癌细胞株APC基因表达的研究 | 第37-48页 |
| 一 实验方法 | 第37-42页 |
| 1 细胞培养 | 第37页 |
| 2 脱甲基化处理NCI-H460细胞 | 第37-38页 |
| 3 样本制备 | 第38-39页 |
| 4 荧光定量RT-PCR | 第39-40页 |
| 5 Western blot蛋白印迹术分析 | 第40-42页 |
| 二 实验结果 | 第42-45页 |
| 1 荧光定量RT-PCR | 第42-43页 |
| 2 Western blot | 第43-45页 |
| 三 分析讨论 | 第45-48页 |
| 第三部分 模拟肺癌患者血浆中APC基因甲基化最低检测限的研究 | 第48-57页 |
| 一 实验方法 | 第49-51页 |
| 1 样本收集 | 第49页 |
| 2 肿瘤病人血浆的模拟 | 第49页 |
| 3 磁珠法提取DNA | 第49-50页 |
| 4 化学修饰 | 第50页 |
| 5 MSP与SYBR Green Ⅰ染料实时荧光定量MSP检测 | 第50页 |
| 6 TaqMan荧光探针实时荧光定量MSP | 第50-51页 |
| 二 实验结果 | 第51-53页 |
| 1 MSP | 第51页 |
| 2 SYBR Green Ⅰ模式荧光定量MSP | 第51-52页 |
| 3 TaqMan荧光探针模式实时荧光定量MSP | 第52-53页 |
| 三 分析讨论 | 第53-57页 |
| 小结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 综述 | 第65-77页 |
| 发表论文 | 第77-86页 |
