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云南蚕豆叶片铝胁迫响应基因的筛选与表达分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
目录第8-11页
插图和附表清单第11-12页
缩略词第12-14页
第一章 前言第14-32页
   ·铝在土壤中的存在形态第14页
   ·酸性土壤的特性和现状第14-16页
   ·铝对植物的毒害第16-18页
   ·植物的耐铝机理第18-29页
     ·植物耐铝的生理学机理第18-24页
     ·植物耐铝的分子机理第24-29页
   ·蚕豆生产现状及蚕豆耐铝机制研究进展第29-30页
   ·本研究的目的与意义第30-32页
第二章 材料与方法第32-45页
   ·植物材料及培养方法第32页
   ·蚕豆叶片的生理学实验第32-34页
     ·样品的铝胁迫处理及叶片的收集第32页
     ·铝胁迫下蚕豆叶片丙二醛含量的测定第32页
     ·铝胁迫下蚕豆叶片过氧化氢含量的测定第32-33页
     ·铝胁迫下蚕豆叶片蛋白质羰基含量的测定第33页
     ·铝胁迫下蚕豆叶片总蛋白含量的测定第33页
     ·铝胁迫下蚕豆叶片可溶性糖含量的测定第33-34页
     ·铝胁迫下蚕豆叶片气孔开度的观测第34页
   ·Al胁迫下蚕豆叶片SSH文库的构建第34-42页
     ·样品的铝胁迫处理及叶片的收集第34页
     ·总RNA提取与纯化第34-35页
     ·mRNA的分离第35-36页
     ·cDNA第一链的合成第36页
     ·cDNA第二链的合成第36-37页
     ·RSaI酶消化第37页
     ·Tester cDNA与接头连接第37-38页
     ·抑制性差减杂交第38页
     ·PCR扩增第38-39页
     ·大量PCR及PCR产物回收第39-40页
     ·PCR产物与载体连接第40页
     ·连接产物转化第40-41页
     ·菌液PCR筛选第41页
     ·序列测定及生物信息学分析第41-42页
   ·基因表达谱分析第42-45页
     ·样品的铝胁迫处理及叶片的收集第42页
     ·引物设计第42-43页
     ·RNA的提取与纯化第43页
     ·cDNA第一链的合成第43-44页
     ·RT-PCR第44-45页
第三章 结果与分析第45-68页
   ·铝胁迫对蚕豆叶片生理生化指标的影响第45-48页
     ·铝胁迫对蚕豆叶片丙二醛和H_2O_2含量的影响第45页
     ·铝胁迫对蚕豆叶片PC含量的影响第45-46页
     ·铝胁迫对蚕豆叶片总蛋白和可溶性糖含量的影响第46-47页
     ·铝胁迫对蚕豆叶片气孔导度的影响第47-48页
   ·蚕豆叶片在铝胁迫下正向SSH cDNA文库的构建第48-65页
     ·蚕豆品种83324叶片总RNA的提取与质量分析第48-49页
     ·mRNA的分离第49页
     ·双链cDNA合成与RsaI的酶切第49-50页
     ·Tester cDNA与接头连接、消减杂交和抑制PCR第50页
     ·大量PCR产物回收第50-51页
     ·连接与转化第51页
     ·SSH cDNA文库筛选第51页
     ·SSH cDNA文库克隆的序列分析及基因功能聚类第51-65页
   ·基因表达谱分析第65-68页
     ·50μM的Al胁迫处理时间梯度表达谱第65-66页
     ·100gM的Al胁迫处理时间梯度表达谱第66-68页
第四章 讨论第68-79页
   ·铝胁迫对蚕豆叶片生理生化指标的影响第68-71页
     ·铝胁迫对蚕豆叶片丙二醛和H_2O_2含量的影响第68-69页
     ·铝胁迫对蚕豆叶片PC含量的影响第69页
     ·铝胁迫对蚕豆叶片总蛋白含量和可溶性糖含量的影响第69-70页
     ·铝胁迫对蚕豆叶片气孔导度的影响第70-71页
   ·蚕豆铝胁迫响应相关基因第71-79页
     ·代谢和能量相关基因第71-73页
     ·光合作用相关基因第73-74页
     ·信号转导及转录相关基因第74-76页
     ·防御胁迫与细胞凋亡相关基因第76-78页
     ·转运相关基因第78-79页
第五章 总结与展望第79-81页
   ·铝胁迫对云南蚕豆品种83324生理生化指标的影响第79页
   ·云南蚕豆品种83324铝胁迫下基因文库的构建第79-80页
   ·展望第80-81页
致谢第81-82页
参考文献第82-99页
附录A 攻读硕士期间发表论文第99页

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