| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 第一部分: 文献综述 | 第13-25页 |
| 1. 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的概述 | 第13-15页 |
| ·猪传染胸膜肺炎放线杆菌的病原学 | 第13-14页 |
| ·猪传染胸膜肺炎放线杆菌的血清分型和流行病学 | 第14页 |
| ·猪传染胸膜肺炎放线杆菌的毒素研究 | 第14-15页 |
| 2. 副猪嗜血杆菌的概述 | 第15-18页 |
| ·副猪嗜血杆菌的病原学 | 第15-16页 |
| ·副猪嗜血杆菌的血清型和流行病学 | 第16-17页 |
| ·副猪嗜血杆菌的毒力因子 | 第17-18页 |
| 3. SD序列 | 第18-19页 |
| 4. 猪传染性胸膜肺炎和副猪嗜血杆菌病疫苗研究进展 | 第19-21页 |
| ·灭活疫苗和亚单位疫苗 | 第19-20页 |
| ·口服疫苗 | 第20页 |
| ·弱毒疫苗 | 第20-21页 |
| 5. 猪胸膜肺炎放线杆菌缺失减毒株的研究进展 | 第21-23页 |
| 6. 研究目的与意义 | 第23-25页 |
| 第二部分: 试验研究 | 第25-49页 |
| 1. 材料 | 第25-27页 |
| ·细菌菌株和培养条件 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·质粒与载体 | 第25页 |
| ·引物 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·试验动物 | 第26-27页 |
| 2 试验方法 | 第27-36页 |
| ·重组转移载体pBOSKΔIC/ompP2的构建 | 第27-31页 |
| ·构建重组转移载体pBOSKΔIC/ompP2的技术路线图 | 第27-28页 |
| ·重组转移中间载体pBOSKΔIC-1的构建 | 第28-29页 |
| ·含有Hps ompP2基因的最终重组转移载体pBOSKΔIC/ompP2的构建 | 第29-31页 |
| ·嵌合Hps ompP2基因的APP ApxIC基因缺失突变株的构建 | 第31-33页 |
| ·构建嵌合Hps ompP2基因的APP ApxIC基因缺失突变株的技术路线图 | 第31-32页 |
| ·嵌合Hps ompP2基因的APP ApxIC基因缺失突变株的构建 | 第32-33页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的生物学特性研究 | 第33-34页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的生长特性试验 | 第33页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的遗传稳定性试验 | 第33页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的溶血活性试验 | 第33-34页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的细胞毒性试验 | 第34页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的免疫原性研究 | 第34-36页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2对小鼠的毒力试验及其LD_(50)测定 | 第34页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的小鼠免疫保护试验 | 第34-35页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2对小鼠的免疫抗体检测 | 第35-36页 |
| 3. 结果 | 第36-45页 |
| ·重组转移载体pBOSK△IC/ompP2的构建 | 第36-38页 |
| ·右同源臂(R)的扩增及TA克隆 | 第36页 |
| ·右同源臂(R)连接重组转移载体pBOSK△IC,构建重组转移中间载体 | 第36-37页 |
| ·Hps ompP2基因的扩增及TA克隆 | 第37-38页 |
| ·Hps ompP2基因连接到pBOSKΔIC-1载体,构建最终重组转移载体 | 第38页 |
| ·嵌合Hps ompP2基因的APP ApxIC基因缺失突变株的构建 | 第38-39页 |
| ·嵌合Hps基因的APP重组菌的正向筛选 | 第38-39页 |
| ·嵌合Hps基因的APP重组菌的反向筛选 | 第39页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的生物学特性研究 | 第39-42页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的生长特性试验 | 第39-40页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的遗传稳定性试验 | 第40-41页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的溶血活性试验 | 第41页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的细胞毒性试验 | 第41-42页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的免疫原性研究 | 第42-45页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2对小鼠的毒力试验及其LD_(50)测定 | 第42-43页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的小鼠免疫保护试验 | 第43-44页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2对小鼠的免疫抗体检测 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-49页 |
| ·菌株的选择 | 第45页 |
| ·载体的选择 | 第45-46页 |
| ·基因的选择 | 第46-47页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的毒力 | 第47页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的免疫保护 | 第47-48页 |
| ·突变株△apxIC/ompP2的应用前景 | 第48-49页 |
| 第三部分: 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附录 | 第59-65页 |
| 附录Ⅰ | 第59-61页 |
| 附录Ⅱ | 第61-62页 |
| 附录Ⅲ | 第62-65页 |
| 1. 培养基及抗生素的配制 | 第62-63页 |
| 2. 细菌基因组的提取 | 第63页 |
| 3. 质粒的提取 | 第63-64页 |
| 4. PCR产物和酶切产物的回收 | 第64-65页 |
| 5. 大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第65页 |
| 6. 连接产物的转化 | 第65页 |
