| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-14页 |
| 第一章 神经系统疾病的基因治疗 | 第14-29页 |
| ·基因治疗的基本原理 | 第14页 |
| ·神经系统疾病基因治疗的基础 | 第14-15页 |
| ·神经系统疾病基因治疗的基本方法 | 第15页 |
| ·神经系统疾病基因治疗的关键因素 | 第15页 |
| ·神经系统疾病基因治疗中的治疗基因 | 第15-19页 |
| ·癫痫基因治疗中的治疗基因 | 第16-17页 |
| ·帕金森病基因治疗中的治疗基因 | 第17-19页 |
| ·神经系统疾病基因治疗的载体系统 | 第19-29页 |
| ·神经系统疾病基因治疗载体概述 | 第19-21页 |
| ·非病毒载体在神经系统疾病中的应用 | 第21页 |
| ·病毒载体在神经系统疾病基因治疗中的应用 | 第21-29页 |
| 第二章 人泡沫病毒及其作为基因治疗载体的研究进展 | 第29-49页 |
| ·人泡沫病毒的历史背景 | 第29-30页 |
| ·人泡沫病毒的分离 | 第29-30页 |
| ·人泡沫病毒的起源推测 | 第30页 |
| ·人泡沫病毒的基因组结构 | 第30-32页 |
| ·人泡沫病毒的转录特性 | 第32-35页 |
| ·人泡沫病毒长末端重复序列及其转录调控 | 第32-33页 |
| ·人泡沫病毒基因表达的调控 | 第33-35页 |
| ·人泡沫病毒独特的复制过程 | 第35-37页 |
| ·人泡沫病毒感染的动物模型 | 第37-39页 |
| ·人泡沫病毒感染与人类疾病的关系 | 第39-40页 |
| ·人泡沫病毒非致病性的可能原因 | 第40-42页 |
| ·Bet蛋白的作用 | 第41页 |
| ·转录调控的作用 | 第41-42页 |
| ·免疫应答的作用 | 第42页 |
| ·人泡沫病毒作为基因治疗载体的应用前景 | 第42-49页 |
| ·人泡沫病毒可复制载体的构建及其应用 | 第43页 |
| ·人泡沫病毒复制缺陷型载体的构建及其应用 | 第43-46页 |
| ·人泡沫病毒杂交载体的构建及其应用 | 第46-49页 |
| 第三章 复制缺陷型人泡沫病毒载体辅助质粒P△GP的构建及转染小肠癌细胞的研究 | 第49-63页 |
| ·前言 | 第49-50页 |
| ·实验材料 | 第50-53页 |
| ·菌株和载体 | 第50页 |
| ·细胞系 | 第50-51页 |
| ·主要工具酶与试剂 | 第51页 |
| ·寡核苷酸引物的合成 | 第51页 |
| ·LB培养基的制备 | 第51页 |
| ·HIC细胞培养试剂 | 第51-52页 |
| ·常用溶液的配制 | 第52-53页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-58页 |
| ·质粒DNA的小量提取和纯化 | 第53-54页 |
| ·质粒提取试剂盒提取质粒 | 第54页 |
| ·聚合酶链式反应(polymerase chain reaction， PCR) | 第54-55页 |
| ·DNA片段的回收 | 第55-56页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及电转化法 | 第56-57页 |
| ·酶切和连接 | 第57页 |
| ·细胞的培养、转染及其荧光检测 | 第57-58页 |
| ·结果 | 第58-61页 |
| ·复制缺陷型HFV载体辅助质粒p△GP的构建 | 第58-60页 |
| ·辅助质粒p△GP的酶切鉴定 | 第60页 |
| ·复制缺陷型HFV载体和辅助质粒p△GP共转染HIC细胞 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 HFV载体介导EGFP在培养的大鼠海马神经元中的表达 | 第63-73页 |
| ·前言 | 第63-64页 |
| ·材料与方法 | 第64-67页 |
| ·质粒 | 第64-65页 |
| ·试剂 | 第65页 |
| ·细胞及细胞培养 | 第65-66页 |
| ·免疫组织化学 | 第66页 |
| ·转染与缺陷型病毒颗粒的产生 | 第66-67页 |
| ·缺陷型病毒载体感染海马神经元 | 第67页 |
| ·结果 | 第67-70页 |
| ·海马神经元的形态学观察 | 第67-68页 |
| ·海马神经元的免疫组织化学鉴定 | 第68页 |
| ·rdvGFP在大鼠海马神经元中的转导和EGFP表达 | 第68-69页 |
| ·流式细胞仪检测EGFP荧光 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-73页 |
| ·海马神经元的体外培养 | 第70-71页 |
| ·HFV载体转导海马神经元 | 第71-73页 |
| 第五章 HFV载体介导谷氨酸脱羧酶基因在培养的大鼠海马神经元中的表达 | 第73-92页 |
| ·前言 | 第73-75页 |
| ·材料与方法 | 第75-80页 |
| ·质粒与菌株 | 第75页 |
| ·细胞及细胞培养 | 第75-76页 |
| ·引物 | 第76页 |
| ·主要工具酶与试剂 | 第76页 |
| ·质粒DNA的提取、纯化、酶切、重组和克隆 | 第76-77页 |
| ·转染与缺陷型病毒颗粒的产生 | 第77-78页 |
| ·免疫组织化学 | 第78页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)测定氨基酸 | 第78-80页 |
| ·结果 | 第80-85页 |
| ·复制缺陷型人泡沫病毒重组载体质粒pGPSNI-hGAD67和pGPSNI-hGAD65的构建 | 第80-82页 |
| ·HFV介导GAD基因对海马神经元GAD表达的影响 | 第82-83页 |
| ·HFV介导GAD基因对海马神经元GABA合成和释放的影响 | 第83-85页 |
| ·讨论 | 第85-92页 |
| ·GABA与神经系统疾病 | 第85-87页 |
| ·关于谷氨酸脱羧酶 | 第87-89页 |
| ·关于HFV载体介导GAD基因在海马神经元中的表达 | 第89-92页 |
| 第六章 HFV介导外源基因在培养的星形胶质细胞中的表达 | 第92-108页 |
| ·前言 | 第92-94页 |
| ·材料与方法 | 第94-99页 |
| ·质粒 | 第94-95页 |
| ·试剂 | 第95页 |
| ·细胞及细胞培养 | 第95-97页 |
| ·转染与缺陷型病毒颗粒的产生 | 第97页 |
| ·缺陷型病毒载体rdvGFP感染星形胶质细胞 | 第97-98页 |
| ·缺陷型病毒载体rdvGAD67和rdvGAD65感染星形胶质细胞及其免疫组织化学反应 | 第98页 |
| ·HPLC测定氨基酸 | 第98-99页 |
| ·结果 | 第99-105页 |
| ·星形胶质细胞的形态学观察 | 第99页 |
| ·星形胶质细胞的免疫组织化学鉴定 | 第99-100页 |
| ·rdvGFP在星形胶质细胞中的转导和EGFP的表达 | 第100-101页 |
| ·流式细胞仪检测EGFP荧光 | 第101-102页 |
| ·HFV介导GAD基因在星形胶质细胞中的表达 | 第102-103页 |
| ·HFV介导GAD基因对星形胶质细胞GABA合成和释放的影响 | 第103-105页 |
| ·讨论 | 第105-108页 |
| ·星形胶质细胞体外培养 | 第105-106页 |
| ·HFV载体转导星形胶质细胞 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-135页 |
| 本研究工作的创新点 | 第135-136页 |
| 博士研究生期间发表论文情况 | 第136-137页 |
| 致谢 | 第137页 |
