香樟体胚发生途径的植株再生体系的建立以及农杆菌介导遗传转化的初步研究
| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-31页 |
| ·植物组培技术的发展概况 | 第15-21页 |
| ·木本植物器官发生途径研究进展 | 第15-17页 |
| ·木本植物体胚发生途径研究进展 | 第17-21页 |
| ·木本被子植物 | 第17-18页 |
| ·裸子植物 | 第18-21页 |
| ·木本植物原生质体再生研究进展 | 第21-23页 |
| ·木本植物基因工程研究进展 | 第23-29页 |
| ·木本植物雄性不育基因工程研究进展 | 第25-27页 |
| ·木本植物抗虫基因工程研究进展 | 第27-29页 |
| ·本研究课题的目的和意义 | 第29-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-45页 |
| ·香樟微繁体系的建立 | 第31-32页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·培养条件 | 第31页 |
| ·胚芽萌发 | 第31页 |
| ·幼芽增殖 | 第31-32页 |
| ·试管苗的生根和移栽 | 第32页 |
| ·香樟叶片愈伤组织的诱导 | 第32-33页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·生长素种类及浓度对叶片愈伤组织的诱导 | 第32页 |
| ·细胞分裂素种类及浓度对叶片愈伤组织的诱导 | 第32-33页 |
| ·香樟体胚再生体系的建立 | 第33-35页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·诱导未成熟合子胚体胚发生的因素 | 第33页 |
| ·体胚的保持与增殖 | 第33-34页 |
| ·体胚的植株再生 | 第34页 |
| ·胚性愈伤组织的获得和保持 | 第34页 |
| ·胚性愈伤组织诱导植株再生 | 第34页 |
| ·石蜡切片的制作 | 第34-35页 |
| ·数据统计与分析 | 第35页 |
| ·香樟根癌农杆菌遗传转化体系的建立 | 第35-41页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·胚性愈伤组织对卡那霉素的敏感性试验 | 第35页 |
| ·胚性愈伤组织对潮霉素的敏感性试验 | 第35-36页 |
| ·根癌农杆菌菌株及质粒 | 第36页 |
| ·根癌农杆菌的活化和工程菌液的制备 | 第36-37页 |
| ·浸染和共培养 | 第37页 |
| ·转化条件的优化 | 第37页 |
| ·脱菌和选择培养 | 第37页 |
| ·GFP基因转化香樟胚性愈伤 | 第37-38页 |
| ·人工雄性不育基因的转化香樟胚性愈伤 | 第38页 |
| ·GUS基因瞬间表达的检测 | 第38-39页 |
| ·GFP基因绿色荧光蛋白表达的检测 | 第39页 |
| ·试验培养基及各种试剂的配制 | 第39-41页 |
| ·抗性愈伤组织的PCR检测 | 第41-42页 |
| ·抗性愈伤组织基因组DNA和质粒DNA的提取 | 第41页 |
| ·抗性愈伤组织的PCR检测 | 第41-42页 |
| ·抗性愈伤组织的植株再生的诱导 | 第42页 |
| ·香樟原生质体分离，培养及植株再生 | 第42-45页 |
| ·细胞悬浮体系的建立 | 第42页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·混合酶液的制备 | 第42页 |
| ·原生质体的制备，洗涤和纯化 | 第42-43页 |
| ·原生质体产量的测定 | 第43页 |
| ·原生质体活力的测力 | 第43页 |
| ·影响原生质体分离的因素 | 第43-44页 |
| ·影响原生质体培养的因素 | 第44页 |
| ·原生质体再生 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-74页 |
| ·香樟微繁体系的建立 | 第45-46页 |
| ·胚芽萌发 | 第45页 |
| ·不同浓度BA对胚芽增殖诱导的影响 | 第45-46页 |
| ·试管苗的生根和移栽 | 第46页 |
| ·香樟叶片愈伤组织的诱导 | 第46-48页 |
| ·细胞分裂素种类及浓度对叶片愈伤组织诱导的影响 | 第46-47页 |
| ·细胞分裂素种类及浓度对叶片愈伤诱导组织的影响 | 第47-48页 |
| ·香樟体胚再生体系的建立 | 第48-56页 |
| ·基本培养基种类对香樟幼胚体胚发生的影响 | 第48页 |
| ·碳源种类对香樟幼胚体胚发生的影响 | 第48-49页 |
| ·腺嘌呤浓度对香樟幼胚体胚发生的影响 | 第49-50页 |
| ·植物生长调节剂对体胚发生的影响 | 第50-51页 |
| ·体胚的保持与增殖以及体胚的植株再生 | 第51-54页 |
| ·胚性愈伤组织的获得 | 第54-55页 |
| ·从胚性愈伤组织诱导植株再生 | 第55-56页 |
| ·香樟根癌农杆菌遗传转化体系的建立 | 第56-67页 |
| ·胚性愈伤组织对卡那霉素的敏感性分析 | 第56-57页 |
| ·胚性愈伤组织对潮霉素的敏感性分析 | 第57-58页 |
| ·外植体对遗传转化的影响 | 第58页 |
| ·浸染时间对胚性愈伤组织遗传转化的影响 | 第58-59页 |
| ·菌液浓度对胚性愈伤组织遗传转化的影响 | 第59-60页 |
| ·共培养时间对胚性愈伤组织遗传转化的影响 | 第60-61页 |
| ·抗性愈伤组织的获得及继代增殖 | 第61页 |
| ·胚性愈伤组织的GES基因表达的检测 | 第61-62页 |
| ·胚性愈伤组织的GFP基因表达的检测 | 第62-63页 |
| ·含有GUS基因的抗性愈伤组织的PCR检测 | 第63-64页 |
| ·含有GFP基因的抗性愈伤组织的PCR检测 | 第64-65页 |
| ·含有人工雄性不育基因的抗性愈伤组织的PCR检测 | 第65-67页 |
| ·抗性愈伤组织的植株再生的诱导 | 第67页 |
| ·香樟原生质体植株再生 | 第67-74页 |
| ·悬浮培养体系的建立 | 第67-68页 |
| ·起始材料对原生质体分离的影响 | 第68-69页 |
| ·酶浓度对原生质体分离的影响 | 第69-70页 |
| ·酶解时间对原生质体分离的影响 | 第70-71页 |
| ·原生质体的培养 | 第71-72页 |
| ·原生质体再生 | 第72-74页 |
| 4 问题与讨论 | 第74-84页 |
| ·香樟体胚发生途径获得的植株的遗传稳定性 | 第74-75页 |
| ·体胚的形成过程 | 第75-77页 |
| ·影响体胚发生途径再生频率的因素 | 第77-80页 |
| ·影响香樟胚性愈伤组织遗传转化的因素 | 第80-81页 |
| ·应用遗传转化技术改良香樟的应用前景 | 第81-82页 |
| ·本研究的下一步工作 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 附录 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
