摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1. 前言 | 第8-22页 |
1.1 文献综述 | 第8-22页 |
1.1.1 IBV的基因组结构 | 第9页 |
1.1.2 IBV的结构蛋白和功能 | 第9-12页 |
1.1.3 IBV增殖过程的分子生物学 | 第12-15页 |
1.1.4 IBV的理化性质 | 第15页 |
1.1.5 IBV的流行病学 | 第15-16页 |
1.1.6 IB的临床症状和病理变化 | 第16页 |
1.1.7 IB的诊断和防治 | 第16-18页 |
1.1.8 噬菌体展示技术 | 第18-22页 |
1.2 目的和意义 | 第22页 |
2 材料与方法 | 第22-32页 |
2.1 材料 | 第22-26页 |
2.1.1 病毒、细胞及多肽 | 第22页 |
2.1.2 质粒及菌株 | 第22-23页 |
2.1.3 培养基 | 第23页 |
2.1.4 酶及试剂盒 | 第23-24页 |
2.1.5 其它相关试剂 | 第24页 |
2.1.6 主要溶液 | 第24-26页 |
2.2 方法 | 第26-32页 |
2.2.1 IBV增殖与纯化 | 第26页 |
2.2.2 病毒RNA的提取 | 第26页 |
2.2.3 IBV S基因的RT-PCR扩增 | 第26-27页 |
2.2.4 DNA胶快速回收试剂盒的使用 | 第27-28页 |
2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
2.2.6 连接产物的转化 | 第28页 |
2.2.7 重组质粒的快速鉴定 | 第28页 |
2.2.8 质粒的少量制备(碱裂解法) | 第28-29页 |
2.2.9 质粒的大量制备(碱裂解法)及PEG纯化 | 第29页 |
2.2.10 IBV纯病毒EID50的测定 | 第29页 |
2.2.11 抗IBV抗血清制备 | 第29-30页 |
2.2.12 特异性多肽的淘筛和鉴定 | 第30-32页 |
3 结果与分析 | 第32-45页 |
3.1 IBV S基因的克隆及序列分析 | 第32-34页 |
3.1.1 RT-PCR扩增及重组质粒的酶切鉴定 | 第32-33页 |
3.1.2 IBV S基因的测序与分析 | 第33-34页 |
3.2 IBV纯病毒的电镜检测 | 第34-35页 |
3.3 纯病毒EID_(50)的测定 | 第35-36页 |
3.4 抗血清的制备 | 第36页 |
3.5 阳性噬菌体的淘筛和鉴定 | 第36-45页 |
3.5.1 阳性噬菌体的ELISA检测 | 第36-38页 |
3.5.2 阳性噬菌体的测序 | 第38-40页 |
3.5.3 阳性噬菌体的鉴定 | 第40-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
附录 | 第56页 |