农杆菌介导CryIAc基因高效转化辣椒的改进方法
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 一、前言 | 第10-20页 |
| 1.植物遗传转化的研究进展 | 第10-11页 |
| 2.农杆菌介导的植物基因转化方法 | 第11-12页 |
| 3.Bt转基因抗虫植物研究进展 | 第12-14页 |
| 4.转基因植物生态风险性评价 | 第14-15页 |
| 5.食品安全性评价 | 第15-17页 |
| 6.辣椒基因转化研究进展 | 第17-20页 |
| 二、材料与方法 | 第20-31页 |
| 1.实验材料 | 第20-25页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌种、质粒 | 第20页 |
| ·常用贮存液 | 第20页 |
| ·化学试剂 | 第20页 |
| ·主要试剂配方 | 第20-22页 |
| ·CryIAc蛋白检测试剂盒 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23-25页 |
| 2.实验器材 | 第25-26页 |
| 3.实验方法 | 第26-31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第26页 |
| ·质粒DNA的碱解法小量制备 | 第26-27页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备、转化 | 第27页 |
| ·辣椒外植体的准备和预培养 | 第27页 |
| ·农杆菌的活化与制备 | 第27-28页 |
| ·农杆菌侵染转化过程 | 第28页 |
| ·培养条件 | 第28页 |
| ·组织化学染色法检测GUS活性 | 第28页 |
| ·CryIAc蛋白试剂盒法检测 | 第28-30页 |
| ·子叶柄诱导生根 | 第30-31页 |
| 三、实验结果 | 第31-41页 |
| 1.外植体转化 | 第31-37页 |
| ·转化材料对转化结果的影响 | 第32-33页 |
| ·农杆菌菌液浓度对转化结果的影响 | 第33-34页 |
| ·农杆菌侵染时间对转化结果的影响 | 第34-35页 |
| ·清洗步骤对转化结果的影响 | 第35-37页 |
| 2.gus检测 | 第37-38页 |
| 3.CryIAc蛋白表达检测 | 第38-39页 |
| 4.外植体诱导生根试验 | 第39-41页 |
| 四、讨论 | 第41-45页 |
| 1.关于转化用外植体材料的选择 | 第41页 |
| 2.关于农杆菌转化条件 | 第41-42页 |
| 3.植物基因工程的潜在问题及解决途径 | 第42-44页 |
| 4.关于下一步实验的计划 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 本文缩写词 | 第51-52页 |
| 在读期间发表论文 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-57页 |
