中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-15页 |
缩略语 | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-40页 |
1 棉铃虫的分布与为害 | 第16-17页 |
2 棉铃虫对拟除虫菊酯的抗药性 | 第17-22页 |
2.1 抗药性概况 | 第17-18页 |
2.2 对拟除虫菊酯的抗性机理 | 第18-22页 |
3 实时荧光定量PCR技术 | 第22-34页 |
3.1 PCR技术从定性到定量的飞跃 | 第22-24页 |
3.2 实时荧光定量PCR技术原理 | 第24-26页 |
3.3 荧光化学 | 第26-31页 |
3.4 定量方法 | 第31-33页 |
3.5 常用的定量PCR仪 | 第33-34页 |
4 实时荧光定量PCR技术在昆虫学研究中的应用 | 第34-40页 |
4.1 基因拷贝数的确定 | 第34-35页 |
4.2 mRNA表达研究 | 第35-37页 |
4.3 等位基因诊断 | 第37-40页 |
第二章 棉铃虫对拟除虫菊酯代谢抗性的生化机理 | 第40-61页 |
1 材料和方法 | 第42-47页 |
1.1 供试昆虫 | 第42页 |
1.2 供试药剂 | 第42-43页 |
1.3 生物测定 | 第43页 |
1.4 酶液制备 | 第43-44页 |
1.5 细胞色素P450氧化酶活力测定 | 第44-45页 |
1.5.1 对硝基苯甲醚氧脱甲基活力(PNOD)测定 | 第44页 |
1.5.2 甲基试卤灵氧脱甲基活力(MROD)测定 | 第44页 |
1.5.3 7—乙氧基香豆素氧脱甲基活力(MROD)测定 | 第44-45页 |
1.5.4 艾氏剂环氧化活力(AE)测定 | 第45页 |
1.5.5 血红素过氧化物酶活力(heme-peroxidase)测定 | 第45页 |
1.6 谷胱甘肽—S—转移酶活力测定 | 第45-46页 |
1.7 酯酶活力测定 | 第46页 |
1.8 蛋白含量测定 | 第46页 |
1.9 数据统计分析 | 第46-47页 |
2 结果与分析 | 第47-57页 |
2.1 棉铃虫对不同杀虫剂的抗性 | 第47-48页 |
2.2 增效剂对拟除虫菊酯杀虫剂的增效作用 | 第48-50页 |
2.3 棉铃虫细胞色素P450氧化酶活力测定 | 第50-54页 |
2.3.1 不同pH值条件下细胞色素P450氧化酶活力的变化 | 第50页 |
2.3.2 不同品系的细胞色素P450氧化酶活力 | 第50-52页 |
2.3.3 细胞色素P450氧化酶的组织分布 | 第52-54页 |
2.3.4 不同品系的血红素过氧化物酶活力 | 第54页 |
2.4 不同品系棉铃虫的酯酶和谷胱甘肽—S—转移酶活力 | 第54-57页 |
3 讨论 | 第57-61页 |
3.1 细胞色素P450氧化酶的底物多型性与抗药性 | 第57-58页 |
3.2 细胞色素P450氧化酶在棉铃虫对拟除虫菊酯抗性中的作用 | 第58-59页 |
3.3 其它抗性机理在棉铃虫对拟除虫菊酯抗性中的作用 | 第59-61页 |
第三章 棉铃虫抗性品系和敏感品系六龄幼虫中肠微粒体对溴氰菊酯的离体代谢 | 第61-69页 |
1 材料和方法 | 第62-64页 |
1.1 供试昆虫 | 第62页 |
1.2 供试药剂 | 第62页 |
1.3 微粒体制备 | 第62-63页 |
1.4 微粒体代谢酶活性的测定 | 第63页 |
1.5 蛋白含量测定 | 第63页 |
1.6 ~(14)C-溴氰菊酯的离体代谢 | 第63-64页 |
2 结果与分析 | 第64-67页 |
2.1 棉铃虫的微粒体代谢酶活性 | 第64页 |
2.2 微粒体对~(14)C-溴氰菊酯的离体代谢 | 第64-67页 |
3 讨论 | 第67-69页 |
第四章 棉铃虫抗性品系和敏感品系细胞色素P450基因mRNA表达水平的比较 | 第69-88页 |
1 材料和方法 | 第71-76页 |
1.1 供试材料 | 第71-72页 |
1.2 总RNA提取 | 第72-73页 |
1.3 cDNA第一链合成 | 第73页 |
1.4 引物设计 | 第73-75页 |
1.5 实时荧光定量PCR反应 | 第75页 |
1.6 实时荧光定量PCR反应效率的确定 | 第75页 |
1.7 细胞色素P450基因mRNA表达量的比较 | 第75-76页 |
2 结果与分析 | 第76-84页 |
2.1 PCR产物融解曲线及荧光定量PCR扩增效率一致性分析 | 第76-81页 |
2.2 基因相对表达量的比较 | 第81-84页 |
3 讨论 | 第84-88页 |
3.1 昆虫细胞色素P450研究技术路线的变迁 | 第84-85页 |
3.2 单个P450基因的组成型过量表达与昆虫抗药性 | 第85页 |
3.3 多个P450基因的组成型过量表达与昆虫抗药性 | 第85-87页 |
3.4 昆虫P450基因的离体表达研究 | 第87-88页 |
全文总结与展望 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-102页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第102-103页 |
致谢 | 第103页 |