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棉铃虫对拟除虫菊酯氧化代谢抗性的生化与分子机理

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-15页
缩略语第15-16页
第一章 文献综述第16-40页
 1 棉铃虫的分布与为害第16-17页
 2 棉铃虫对拟除虫菊酯的抗药性第17-22页
  2.1 抗药性概况第17-18页
  2.2 对拟除虫菊酯的抗性机理第18-22页
 3 实时荧光定量PCR技术第22-34页
  3.1 PCR技术从定性到定量的飞跃第22-24页
  3.2 实时荧光定量PCR技术原理第24-26页
  3.3 荧光化学第26-31页
  3.4 定量方法第31-33页
  3.5 常用的定量PCR仪第33-34页
 4 实时荧光定量PCR技术在昆虫学研究中的应用第34-40页
  4.1 基因拷贝数的确定第34-35页
  4.2 mRNA表达研究第35-37页
  4.3 等位基因诊断第37-40页
第二章 棉铃虫对拟除虫菊酯代谢抗性的生化机理第40-61页
 1 材料和方法第42-47页
  1.1 供试昆虫第42页
  1.2 供试药剂第42-43页
  1.3 生物测定第43页
  1.4 酶液制备第43-44页
  1.5 细胞色素P450氧化酶活力测定第44-45页
   1.5.1 对硝基苯甲醚氧脱甲基活力(PNOD)测定第44页
   1.5.2 甲基试卤灵氧脱甲基活力(MROD)测定第44页
   1.5.3 7—乙氧基香豆素氧脱甲基活力(MROD)测定第44-45页
   1.5.4 艾氏剂环氧化活力(AE)测定第45页
   1.5.5 血红素过氧化物酶活力(heme-peroxidase)测定第45页
  1.6 谷胱甘肽—S—转移酶活力测定第45-46页
  1.7 酯酶活力测定第46页
  1.8 蛋白含量测定第46页
  1.9 数据统计分析第46-47页
 2 结果与分析第47-57页
  2.1 棉铃虫对不同杀虫剂的抗性第47-48页
  2.2 增效剂对拟除虫菊酯杀虫剂的增效作用第48-50页
  2.3 棉铃虫细胞色素P450氧化酶活力测定第50-54页
   2.3.1 不同pH值条件下细胞色素P450氧化酶活力的变化第50页
   2.3.2 不同品系的细胞色素P450氧化酶活力第50-52页
   2.3.3 细胞色素P450氧化酶的组织分布第52-54页
   2.3.4 不同品系的血红素过氧化物酶活力第54页
  2.4 不同品系棉铃虫的酯酶和谷胱甘肽—S—转移酶活力第54-57页
 3 讨论第57-61页
  3.1 细胞色素P450氧化酶的底物多型性与抗药性第57-58页
  3.2 细胞色素P450氧化酶在棉铃虫对拟除虫菊酯抗性中的作用第58-59页
  3.3 其它抗性机理在棉铃虫对拟除虫菊酯抗性中的作用第59-61页
第三章 棉铃虫抗性品系和敏感品系六龄幼虫中肠微粒体对溴氰菊酯的离体代谢第61-69页
 1 材料和方法第62-64页
  1.1 供试昆虫第62页
  1.2 供试药剂第62页
  1.3 微粒体制备第62-63页
  1.4 微粒体代谢酶活性的测定第63页
  1.5 蛋白含量测定第63页
  1.6 ~(14)C-溴氰菊酯的离体代谢第63-64页
 2 结果与分析第64-67页
  2.1 棉铃虫的微粒体代谢酶活性第64页
  2.2 微粒体对~(14)C-溴氰菊酯的离体代谢第64-67页
 3 讨论第67-69页
第四章 棉铃虫抗性品系和敏感品系细胞色素P450基因mRNA表达水平的比较第69-88页
 1 材料和方法第71-76页
  1.1 供试材料第71-72页
  1.2 总RNA提取第72-73页
  1.3 cDNA第一链合成第73页
  1.4 引物设计第73-75页
  1.5 实时荧光定量PCR反应第75页
  1.6 实时荧光定量PCR反应效率的确定第75页
  1.7 细胞色素P450基因mRNA表达量的比较第75-76页
 2 结果与分析第76-84页
  2.1 PCR产物融解曲线及荧光定量PCR扩增效率一致性分析第76-81页
  2.2 基因相对表达量的比较第81-84页
 3 讨论第84-88页
  3.1 昆虫细胞色素P450研究技术路线的变迁第84-85页
  3.2 单个P450基因的组成型过量表达与昆虫抗药性第85页
  3.3 多个P450基因的组成型过量表达与昆虫抗药性第85-87页
  3.4 昆虫P450基因的离体表达研究第87-88页
全文总结与展望第88-90页
参考文献第90-102页
攻读博士学位期间发表的论文第102-103页
致谢第103页

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