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无筛选标记转基因抗旱水稻新材料的创制

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
英文缩略表第13-14页
第一章 前言第14-25页
   ·植物的抗逆生理机制第14-16页
     ·植物的抗逆性机制第15-16页
   ·抗坏血酸过氧化物酶基因研究进展第16-18页
     ·活性氧和活性氧在植物体内的作用第16页
     ·植物体内活性氧的清除机制第16-17页
     ·抗坏血酸过氧化物酶在清除活性氧过程中的作用第17页
     ·抗坏血酸过氧化物酶 APX 的转基因研究第17-18页
   ·无筛选标记转基因作物的研究进展第18-23页
     ·共转化-分离的方法(Co-Transformation-Segregation method)第18-19页
     ·基因枪介导的共转化方法第19-20页
     ·位点特异性重组系统(Site-Specific Recombination Method)第20-22页
     ·利用转座子(Transposons)清除筛选标记第22页
     ·染色体重组(Intrachromosomal recombination)消除筛选标记第22页
     ·清除叶绿体筛选标记第22-23页
     ·直接获取无筛选标记的转基因植株第23页
   ·本研究的目的和意义第23-25页
第二章 UBIQUTIN-OSAPX2-NOS 表达盒的获得第25-30页
   ·实验材料第25页
   ·主要试剂和仪器第25页
   ·质粒的大量提取第25-26页
     ·大肠杆菌的富集第25页
     ·集菌第25页
     ·裂解第25页
     ·上柱第25-26页
     ·第一次清洗第26页
     ·第二次清洗第26页
     ·洗脱第26页
     ·沉淀第26页
     ·清洗第26页
     ·烘干第26页
   ·质粒的酶切和片段的回收第26-28页
   ·实验结果第28-30页
     ·载体的酶切鉴定和目的基因表达盒获得示意图第28-29页
     ·质粒验证和表达盒的获得第29页
     ·质粒的大量酶切及回收第29-30页
第三章 OSAPX2 基因转化吉林粳稻绥 8第30-35页
   ·实验材料第30-31页
     ·植物材料第30页
     ·主要试剂第30页
     ·主要培养基第30-31页
   ·实验方法第31-34页
     ·种子灭菌和无菌苗的培养第31页
     ·基因枪转化第31-32页
     ·恢复培养第32页
     ·抗性愈伤组织的筛选第32页
     ·愈伤组织的预分化第32-33页
     ·抗性愈伤的分化第33页
     ·生根培养第33页
     ·移栽第33-34页
   ·实验结果第34-35页
第四章 T1 中挑选筛选标记和目的基因分离的转基因植株第35-39页
   ·材料第35页
     ·实验材料第35页
     ·主要试剂第35页
     ·主要溶液配置第35页
     ·主要仪器第35页
   ·实验方法第35-37页
     ·种子的萌发第35页
     ·PCR 筛选出含有目的基因的转基因系第35-37页
   ·主要实验结果第37-39页
     ·PCR 筛选无筛选标记转基因植株第37-39页
第五章 转基因水稻的分子检测第39-49页
   ·材料第39-40页
     ·供试植株第39页
     ·主要试剂第39页
     ·主要溶液第39-40页
     ·主要仪器第40页
   ·方法第40-45页
     ·Southern Blot 检测第40-42页
     ·RT-PCR 检测第42-44页
     ·Real-time PCR 检测外源基因的表达第44页
     ·Tail-PCR 扩增插入位点侧翼序列第44-45页
   ·实验结果第45-49页
     ·RT-PCR 验证目的基因在转基因植株中的表达第45页
     ·Real-Time PCR 验证目的基因在转基因植株中的表达第45-46页
     ·Southern Blot 检测转基因植株插入位点第46-47页
     ·TAIR-PCR 扩增插入位点侧翼序列第47-49页
第六章 转基因水稻的抗旱性及农艺性状分析第49-53页
   ·自然干旱处理转基因水稻幼苗第49-51页
     ·干旱处理四叶期幼苗第49-51页
   ·聚乙二醇处理培养基萌发的幼苗第51-52页
   ·转基因水稻农艺性状的统计第52-53页
第七章 主要结论与讨论第53-55页
   ·全文结论第53页
   ·后继工作第53页
   ·讨论第53-55页
参考文献第55-61页
致谢第61-62页
作者简历第62页

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