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农杆菌介导的紫花苜蓿BADH基因高效转化体系的优化和转基因植株的检测

主要英文缩略词表第1-6页
摘  要第6-7页
Abstract第7-9页
前    言第9-10页
第一章 农杆菌介导的苜蓿甜菜碱醛脱氢酶基因转化体系的优化第10-28页
 1 材料与方法第10-14页
   ·材料第10-11页
     ·植物材料第10页
     ·农杆菌菌株第10页
     ·抗生素第10-11页
     ·农杆菌培养基第11页
     ·GUS组织化学染色试剂第11页
   ·方法第11-14页
     ·选择培养中抗菌素及其浓度的确定第11-12页
     ·抗菌素对苜蓿胚性愈伤组织诱导的影响第12页
     ·选择培养中Kan选择压的确定第12页
     ·农杆菌介导的遗化转化方法第12-13页
     ·GUS组织化学染色分析第13页
     ·转化效率评价指标第13页
     ·转化体系的优化第13-14页
 2 结果与分析第14-24页
   ·选择培养中抗菌素及其浓度的确定第14-15页
   ·抗菌素对胚性愈伤组织诱导的影响第15-16页
   ·选择培养中选择压的确定第16-17页
   ·转化体系的优化第17-24页
     ·不同基因型对转化的影响第17页
     ·不同外植体类型对转化效率的影响第17-18页
     ·外植体生理状态对转化效率的影响第18页
     ·农杆菌菌液浓度对转化效率的影响第18-19页
     ·侵染方式对转化效率的影响第19-20页
     ·侵染时间对转化效率的影响第20页
     ·乙酰丁香酮(AS)对转化效率的影响第20-21页
     ·不同pH值对转化效率的影响第21-22页
     ·预培养时间对转化效率的影响第22-23页
     ·共培养时间对转化效率的影响第23-24页
   ·再生植株的获得第24页
 3 讨论第24-27页
   ·农杆菌介导的基因转化机理第24页
   ·外植体对转化效率的影响第24-25页
   ·农杆菌菌株对转化的影响第25-26页
   ·共培养与预培养时间第26-27页
   ·选择方法和选择时间对转化的影响第27页
 4 结论第27-28页
第二章 转化植株的分子生物学检测第28-35页
 1 材料与方法第28-32页
   ·材料第28页
   ·方法第28-32页
     ·植物基因组DNA的提取第28-29页
     ·农杆菌质粒DNA的提取第29-30页
     ·PCR扩增及电泳检测第30-32页
     ·PCR-Southern分子杂交第32页
 2 结果与分析第32-33页
   ·植物基因组DNA的提取效果第32-33页
   ·农杆菌质粒DNA的提取效果第33页
   ·PCR扩增结果第33页
   ·PCR-Southern分子杂交检测结果第33页
 3 讨论第33-34页
   ·特定基因克隆鉴定的可靠性第33-34页
   ·转化植株PCR扩增结果的说明第34页
   ·基因在植株体内表达量的问题第34页
 4 结论第34-35页
第三章 转基因苜蓿组培苗耐盐性鉴定第35-41页
 1 材料与方法第35页
   ·材料第35页
   ·方法第35页
     ·不同NaCl浓度对转基因苜蓿生长分化的影响第35页
     ·不同NaCl浓度对转基因苜蓿根系发生的影响第35页
 2 结果与分析第35-38页
   ·不同盐份浓度对转基因苜蓿生长和分化的影响第35-37页
     ·不同盐份浓度对转基因苜蓿始分化天数的影响第35-36页
     ·不同盐份浓度对转基因苜蓿分化率的影响第36页
     ·不同NaCl浓度对转基因苜蓿生长势的影响第36-37页
   ·不同NaCl浓度对转基因苜蓿根系发生的影响第37-38页
     ·不同盐份浓度对转基因苜蓿始生根天数的影响第37页
     ·不同盐份浓度对转基因苜蓿生根率的影响第37-38页
     ·抗盐生根培养50天后转基因植株与对照性状变化情况第38页
 3 组培苗的移栽第38-39页
 4 讨论第39-40页
   ·外源基因的表达与沉默第39页
   ·苜蓿的耐盐性研究第39-40页
 5 结论第40-41页
文献综述第41-51页
 1 植物的耐盐性与植物耐盐基因工程第41-47页
   ·植物与盐胁迫第41-42页
   ·植物耐盐机理第42-45页
     ·渗透调节第42-43页
     ·拒盐机理第43页
     ·盐的区隔化第43-44页
     ·调控钾离子运输系统第44页
     ·调控水通道蛋白第44页
     ·改变光合作用途径第44-45页
   ·甜菜碱与植物耐盐基因工程第45-47页
     ·甜菜碱对盐胁迫下植物的保护作用第45页
     ·甜菜碱的合成部位及途径第45页
     ·甜菜碱植物基因工程第45-46页
     ·外源基因整合的鉴定第46-47页
 2 苜蓿基因工程第47-49页
   ·常用的基因转化法第47-48页
     ·PEG介导基因转化法第47页
     ·硅碳纤维介导基因转化法第47页
     ·基因枪转化法第47-48页
     ·农杆菌转化法第48页
   ·转化内容第48-49页
     ·抗虫基因第48页
     ·抗病毒基因第48页
     ·抗除草剂基因第48-49页
     ·抗逆基因第49页
     ·改良品质基因第49页
     ·其它第49页
 3 小结第49-51页
参考文献第51-58页
致    谢第58-60页

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