| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-16页 |
| ·猪多杀性巴氏杆菌病及其危害 | 第8-10页 |
| ·猪传染性萎缩性鼻炎的病原学 | 第10-12页 |
| ·多杀性巴氏杆菌毒素的生物学特性 | 第12-13页 |
| ·产毒素多杀性巴氏杆菌的检测方法 | 第13-14页 |
| ·猪传染性萎缩性鼻炎疫苗的发展 | 第14-16页 |
| 2 研究目的和意义 | 第16-18页 |
| 3 材料与方法 | 第18-25页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·质粒与菌株 | 第18页 |
| ·酶、试剂盒及常用试剂 | 第18页 |
| ·质粒抽取液、SDS-PAGE、Western-blot、包涵体提取液 | 第18页 |
| ·PCR引物 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-25页 |
| ·病原菌的分离 | 第19页 |
| ·Pm的生化鉴定 | 第19-20页 |
| ·Pm的PCR检测方法的建立与应用 | 第20-21页 |
| ·药敏实验 | 第21页 |
| ·Pm的PCR分型和毒素检测 | 第21页 |
| ·菌种保存 | 第21页 |
| ·Pm基因组的提取 | 第21页 |
| ·ompH基因的克隆、重组质粒构建及测序 | 第21-22页 |
| ·toxA基因的克隆、重组质粒构建及测序 | 第22-23页 |
| ·重组质粒的诱导表达及样品处理 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE电泳和Western-blot | 第23-24页 |
| ·包涵体的制备 | 第24-25页 |
| 4 结果与分析 | 第25-34页 |
| ·细菌的分离鉴定 | 第25页 |
| ·Pm的PCR检测方法 | 第25页 |
| ·12种抗菌素对66株多杀性巴氏杆菌的抗药谱 | 第25-26页 |
| ·Pm的PCR分型和毒素检测 | 第26-27页 |
| ·66株Pm的来源、分型及保种记录 | 第27-29页 |
| ·ompH基因的克隆、序列分析及原核表达 | 第29-31页 |
| ·toxA基因的克隆、序列分析及原核表达 | 第31-34页 |
| 5 讨论 | 第34-39页 |
| ·细菌的分离鉴定 | 第34-35页 |
| ·Pm的PCR检测 | 第35页 |
| ·药敏试验 | 第35页 |
| ·Pm的PCR分型 | 第35-36页 |
| ·T~+Pm的PCR检测 | 第36页 |
| ·ompH基因的克隆、原核表达 | 第36-37页 |
| ·toxA基因的克隆、原核表达 | 第37-39页 |
| 6 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 附录1 | 第48-49页 |
| 附录2 | 第49页 |