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草莓β-1,4-葡聚糖酶基因的克隆与遗传转化

第一章 前言第1-24页
   ·草莓离体培养的研究进展第12-17页
     ·花药培养第12-14页
       ·脱毒第12-13页
       ·单倍体育种第13页
       ·草莓无性系变异及突变体筛选第13页
       ·发育途径第13-14页
       ·花粉发育时期第14页
       ·激素的影响第14页
       ·其他影响因素第14页
     ·叶片离体培养第14-16页
       ·草莓基因型第14-15页
       ·培养基成分对不定芽再生的影响第15页
       ·外植体类型第15页
       ·外界环境条件的影响第15-16页
     ·茎尖培养第16页
       ·茎尖快速繁殖第16页
       ·茎尖培养脱毒第16页
     ·原生质体培养第16-17页
     ·细胞悬浮培养第17页
   ·草莓遗传转化研究进展第17-21页
     ·草莓遗传转化的方法第17-19页
       ·农杆菌介导的遗传转化第17-19页
       ·DNA直接导入第19页
     ·草莓遗传转化所涉及的基因第19页
     ·影响转化率的主要因素第19-20页
       ·再生系统第19-20页
       ·农杆菌的侵染第20页
       ·外植体的脱菌培养第20页
       ·转化体的选择培养第20页
     ·草莓遗传转化中存在的问题第20-21页
       ·转化率低第20-21页
       ·外源基因整合的随机性第21页
   ·β-1,4-葡聚糖酶及其在植物基因工程中的应用第21-23页
     ·β-1,4-葡聚糖酶的生化特性第21页
     ·葡聚糖酶与植物的发育调节第21-22页
       ·葡聚糖酶在植物发育调节中的作用第21页
       ·β-1,4-葡聚糖酶在草莓果实成熟中作用第21-22页
     ·β-1,4-葡聚糖酶在植物基因工程中的应用第22-23页
   ·本研究的目的和意义第23-24页
第二章 草莓高效离体再生体系的建立第24-42页
   ·材料与方法第24-28页
     ·材料第24-26页
       ·草莓品种第24页
       ·培养基第24-26页
     ·方法第26-28页
       ·花药培养第26-27页
       ·叶片培养第27页
       ·诱导生根第27页
       ·试管苗的移栽第27-28页
   ·结果与分析第28-39页
     ·花药培养第28-31页
       ·不同培养基类型对草莓花药愈伤组织诱导的影响第28页
       ·低温处理及不同浓度BA和NAA组合对诱导愈伤组织的影响第28-29页
       ·激素及其配比对愈伤组织诱导率和绿苗分化的影响第29-30页
       ·花粉发育时期对愈伤诱导率的影响第30-31页
     ·叶片培养第31-37页
       ·不同浓度TDZ对草莓叶盘再生的影响第31-32页
       ·TDZ与不同生长素组合对草莓叶盘再生的影响第32-33页
       ·不同外植体在同一培养基上再生能力比较第33页
       ·不同外植体在不同培养基上不定芽再生频率比较第33-34页
       ·不同叶龄对叶盘外植体不定芽诱导的影响第34页
       ·AgNO_3对叶盘芽分化率的影响第34-37页
     ·生根及移栽成苗第37-39页
   ·讨论第39-42页
     ·低温对愈伤组织产生及植株再生的影响第39页
     ·培养基中激素对不定芽再生的影响第39-40页
     ·关于AgNO_3的作用第40页
     ·外植体褐变现象及其克服方法的探讨第40-41页
     ·关于所建立的草莓高效离体再生体系的评价第41-42页
第三章 β-1,4-葡聚糖酶FaEG1与FaEG3反义基因重组质粒的构建第42-57页
   ·材料与方法第42-48页
     ·材料第42页
       ·培养基第42页
       ·质粒第42页
       ·菌株第42页
       ·抗生素第42页
       ·其他化学试剂第42页
     ·方法第42-48页
       ·草莓总RNA的提取第42-43页
       ·反转录PCR(RT-PCR)第43-48页
   ·结果与分析第48-53页
     ·β-1,4-葡聚糖酶FaEG1与FaEG3基因的序列分析第48-51页
     ·RT-PCR第51-52页
     ·PCR产物与载体的酶切、回收及连接第52页
     ·大肠杆菌及农杆菌的转化与阳性克隆的鉴定第52-53页
   ·讨论第53-57页
     ·关于草莓核酸的提取第53-54页
     ·反转录PCR(RT-PCR)第54-55页
     ·草莓cDNA质粒重组最优化条件的探讨第55-57页
第四章 β-1,4-葡聚糖酶FaEG1与FaEG3反义基因的遗传转化第57-67页
   ·材料与方法第57-59页
     ·材料第57-58页
       ·质粒及农杆菌菌株第57页
       ·受体品种第57页
       ·试验用培养基第57-58页
     ·方法第58-59页
       ·农杆菌的培养第58页
       ·转化受体的准备第58页
       ·草莓耐卡那霉素水平的筛选第58页
       ·农杆菌转染第58页
       ·转化子的筛选第58页
       ·PCR检测第58-59页
   ·结果与分析第59-65页
     ·外植体Kan抗性水平测定第59-60页
     ·预培养时间对草莓叶盘转化的影响第60-61页
     ·农杆菌不同接种时间对草莓叶盘转化的影响第61-62页
     ·洗涤方法对抑菌效果的影响第62页
     ·农杆菌与外植体共培养时间对草莓叶盘转化的影响第62-63页
     ·转化子的筛选第63页
     ·PCR检测结果第63-65页
   ·讨论第65-67页
     ·关于抗生素卡那霉素(Kan)的使用浓度第65页
     ·关于转化条件的优化第65-66页
     ·关于后期工作第66-67页
参考文献第67-73页
缩略词表第73-74页
致谢第74-75页
作者简历第75页

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