| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-27页 |
| ·青霉素G酰化酶简介 | 第11-12页 |
| ·蛋白质工程 | 第12-27页 |
| 第二章 三种PGA基因嵌合库的筛选 | 第27-36页 |
| ·引言 | 第27-28页 |
| ·材料和方法 | 第28-31页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-31页 |
| ·结果 | 第31-34页 |
| ·PGA嵌合突变库的构建和分析 | 第31-32页 |
| ·多基因DNA家族重排所获得突变嵌合库的筛选和序列分析 | 第32页 |
| ·反应物和底物浓度的HPLC分析 | 第32-33页 |
| ·突变嵌合库的合成水解比及其多样性分析 | 第33页 |
| ·突变基因的序列多样性 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 抑菌圈筛选方法的建立及五种PGA高嵌合率重排基因库的构建 | 第36-52页 |
| ·引言 | 第36-37页 |
| ·材料和方法 | 第37-42页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·方法 | 第38-42页 |
| ·结果 | 第42-51页 |
| ·抑菌圈筛选实验 | 第42-43页 |
| ·PGA同源序列的多重联配 | 第43-45页 |
| ·传统家族重排和新型家族重排的区别 | 第45-46页 |
| ·传统的家族重排改造PGA | 第46-47页 |
| ·新型家族重排改造PGA | 第47-48页 |
| ·嵌合酶氨基酸序列联配 | 第48-49页 |
| ·反应物和底物浓度的HPLC分析 | 第49-50页 |
| ·同等酰化率下四种重排PGA的S／H与野生型KcPGA的S／H比较 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| 第四章 定点突变的方法改造K.citrophila PGA | 第52-58页 |
| ·引言 | 第52页 |
| ·材料和方法 | 第52-54页 |
| ·材料 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-54页 |
| ·结果 | 第54-57页 |
| ·PCR的方法引入点突变 | 第54页 |
| ·突变酶的SDS-PAGE电泳 | 第54-55页 |
| ·突变酶和野生型酶的NIPAB水解活力比较 | 第55-56页 |
| ·酶的合成水解反应曲线比较 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| 第五章 重组SARS冠状病毒M蛋白和3CLP蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第58-77页 |
| ·摘要 | 第58页 |
| ·绪论 | 第58-59页 |
| ·材料和方法 | 第59-68页 |
| ·材料 | 第59-61页 |
| ·方法 | 第61-68页 |
| ·结果 | 第68-76页 |
| ·M蛋白的表达情况 | 第68-75页 |
| ·SARS 3CLP蛋白的表达情况 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-77页 |
| 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第86页 |
