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植物MARs的ARS功能鉴定以及对gus基因表达活性的研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
英文缩略表第9-11页
1 、引言第11-17页
   ·植物 MAR 的序列特征第11-13页
   ·MAR 对转基因表达的影响第13-14页
   ·植物 MARs 的作用机制第14-15页
   ·DNA 的复制起始调控第15-16页
   ·本课题的目的意义第16-17页
2 、材料与方法第17-32页
   ·材料第17-18页
     ·植物材料第17页
     ·菌株与质粒第17页
     ·酶及生化试剂第17页
     ·PCR 引物第17-18页
   ·实验方法第18-32页
     ·MAR序列及亚克隆的ARS功能检测第18-32页
       ·植物MARs序列以及亚克隆的获得第18-20页
       ·连接反应第20页
       ·感受态细胞制备第20-21页
       ·转化与筛选第21页
       ·碱法小量提取质粒 DNA第21-22页
       ·重组质粒DNA的酶切鉴定第22页
       ·酵母的转化第22页
       ·带 ARS 功能质粒丢失率的测定第22-32页
3、结果与分析第32-48页
   ·六个植物MAR序列的 ARS功能检测第32-34页
     ·六个植物 MAR 序列的鉴定第32-33页
     ·六个酵母穿梭载体的构建与鉴定第33页
     ·MARs 的自主复制功能的鉴定第33-34页
   ·TM1和AM4亚克隆的ARS功能分析第34-41页
     ·TM1和AM4的亚克隆与鉴定第34-37页
     ·六个亚克隆的 ARS 功能鉴定第37-38页
     ·六个植物MARs序列及其TM1和 AM4亚克隆序列特征分析第38-39页
     ·不同 ARS 片段对酵母转化效率第39-40页
     ·不同ARS对酵母转化稳定性的影响第40页
     ·不同 ARS 片段对酵母生长的影响第40-41页
   ·具有ARS活性MARs对gus基因表达的影响第41-48页
     ·植物表达载体的构建第41-43页
     ·烟草的转化和转基因植株的获得第43-45页
     ·转基因植株的PCR鉴定第45-46页
     ·转基因烟草的 GUS 酶活性的测定第46页
     ·MAR 对转基因表达的影响第46-48页
4 讨论第48-51页
   ·MAR 与 ARS 活性的关系第48页
   ·MAR的ARS功能与ACS元件的关系第48-49页
   ·不同 ARS 片段对外源基因的表达的影响第49-50页
   ·ARS 活性与高强度 MAR 的筛选第50-51页
5 、结论第51-52页
参考文献第52-60页
致谢第60-61页
硕士期间发表的主要学术论文第61页

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