中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
英文缩略表 | 第9-11页 |
1 、引言 | 第11-17页 |
·植物 MAR 的序列特征 | 第11-13页 |
·MAR 对转基因表达的影响 | 第13-14页 |
·植物 MARs 的作用机制 | 第14-15页 |
·DNA 的复制起始调控 | 第15-16页 |
·本课题的目的意义 | 第16-17页 |
2 、材料与方法 | 第17-32页 |
·材料 | 第17-18页 |
·植物材料 | 第17页 |
·菌株与质粒 | 第17页 |
·酶及生化试剂 | 第17页 |
·PCR 引物 | 第17-18页 |
·实验方法 | 第18-32页 |
·MAR序列及亚克隆的ARS功能检测 | 第18-32页 |
·植物MARs序列以及亚克隆的获得 | 第18-20页 |
·连接反应 | 第20页 |
·感受态细胞制备 | 第20-21页 |
·转化与筛选 | 第21页 |
·碱法小量提取质粒 DNA | 第21-22页 |
·重组质粒DNA的酶切鉴定 | 第22页 |
·酵母的转化 | 第22页 |
·带 ARS 功能质粒丢失率的测定 | 第22-32页 |
3、结果与分析 | 第32-48页 |
·六个植物MAR序列的 ARS功能检测 | 第32-34页 |
·六个植物 MAR 序列的鉴定 | 第32-33页 |
·六个酵母穿梭载体的构建与鉴定 | 第33页 |
·MARs 的自主复制功能的鉴定 | 第33-34页 |
·TM1和AM4亚克隆的ARS功能分析 | 第34-41页 |
·TM1和AM4的亚克隆与鉴定 | 第34-37页 |
·六个亚克隆的 ARS 功能鉴定 | 第37-38页 |
·六个植物MARs序列及其TM1和 AM4亚克隆序列特征分析 | 第38-39页 |
·不同 ARS 片段对酵母转化效率 | 第39-40页 |
·不同ARS对酵母转化稳定性的影响 | 第40页 |
·不同 ARS 片段对酵母生长的影响 | 第40-41页 |
·具有ARS活性MARs对gus基因表达的影响 | 第41-48页 |
·植物表达载体的构建 | 第41-43页 |
·烟草的转化和转基因植株的获得 | 第43-45页 |
·转基因植株的PCR鉴定 | 第45-46页 |
·转基因烟草的 GUS 酶活性的测定 | 第46页 |
·MAR 对转基因表达的影响 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
·MAR 与 ARS 活性的关系 | 第48页 |
·MAR的ARS功能与ACS元件的关系 | 第48-49页 |
·不同 ARS 片段对外源基因的表达的影响 | 第49-50页 |
·ARS 活性与高强度 MAR 的筛选 | 第50-51页 |
5 、结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
硕士期间发表的主要学术论文 | 第61页 |