| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 引言与文献综述 | 第7-22页 |
| 1 草菇的生物学特性与生产概况 | 第7-9页 |
| ·草菇的生物学特性 | 第7页 |
| ·经济价值与生产概况 | 第7页 |
| ·草菇的采后生理与保鲜 | 第7-9页 |
| 2 差异表达基因分离技术及其应用 | 第9-15页 |
| ·差示筛选(differential screening,DS) | 第9页 |
| ·mRNA差异显示反转录PCR(DDRT-PCR) | 第9-12页 |
| ·随机引物PCR扩增指纹分析(RAP-PCR) | 第12-13页 |
| ·cDNA代表性差异分析法(cDNA-RDA) | 第13页 |
| ·消减杂交(SH) | 第13-14页 |
| ·基因表达系列分析(SAGE) | 第14-15页 |
| ·DNA芯片技术(DNA chip) | 第15页 |
| 3 cDNA-AFLP技术及其在植物基因差异表达上的应用 | 第15-19页 |
| ·原理与方法 | 第16页 |
| ·技术评价 | 第16-17页 |
| ·在植物基因差异表达研究中的应用 | 第17-19页 |
| 4 食用菌启动子的克隆分离研究 | 第19-21页 |
| ·启动子克隆的意义 | 第19页 |
| ·启动子克隆的方法 | 第19-20页 |
| ·食用菌中分离的启动子 | 第20-21页 |
| 5 本研究的目的、意义及技术路线 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第21页 |
| ·研究技术路线 | 第21-22页 |
| 第一部分 草菇低温胁迫诱导表达基因片段的分离 | 第22-42页 |
| 1 材料与方法 | 第22-31页 |
| ·草菇菌株及培养基实验材料 | 第22页 |
| ·细菌与培养基 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·草菇菌丝的培养 | 第22页 |
| ·草菇菌丝的收集及总RNA的提取 | 第22-23页 |
| ·mRNA的纯化 | 第23页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第23-24页 |
| ·cDNA第二链的合成 | 第24页 |
| ·双链cDNA的纯化 | 第24-25页 |
| ·AFLP接头的设计与合成 | 第25页 |
| ·接头的退火 | 第25-26页 |
| ·EcoRⅠ和MseⅠ双酶切 | 第26页 |
| ·连接接头 | 第26-27页 |
| ·AFLP预扩增 | 第27-28页 |
| ·AFLP选择性扩增 | 第28页 |
| ·选择性PCR扩增产物的回收 | 第28-29页 |
| ·PCR扩增产物的连接与转化 | 第29页 |
| ·重组质粒的小量提取 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第30页 |
| ·重组质粒的大量提取和纯化 | 第30-31页 |
| ·回收特异片段的序列测定 | 第31页 |
| ·回收特异片段序列的同源性分析 | 第31页 |
| ·回收特异片段蛋白质序列的同源性分析 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-38页 |
| ·草菇菌丝体总RNA | 第31-32页 |
| ·cDNA酶切片段的预扩增产物 | 第32-33页 |
| ·选择性扩增产物 | 第33页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·特异片段的DNA序列及其分析 | 第34-38页 |
| 3 结论 | 第38页 |
| 4 讨论 | 第38-42页 |
| ·草菇低温诱导与草菇细胞壁合成的关系 | 第38-39页 |
| ·草菇低温诱导与草菇大分子蛋白降解的关系 | 第39-40页 |
| ·草菇低温诱导与草菇信号传导的关系 | 第40页 |
| ·关于分离片段的特异性问题 | 第40-42页 |
| 第二部分 GPD启动子的克隆 | 第42-52页 |
| 1 材料 | 第42页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·菌种 | 第42页 |
| ·试剂 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-45页 |
| ·草菇基因组DNA的提取 | 第42-43页 |
| ·GPD启动子的克隆 | 第43-44页 |
| ·目的片段的DNA序列测定及其分析 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-50页 |
| ·草菇菌丝基因组DNA | 第45页 |
| ·PCR扩增产物 | 第45页 |
| ·目的片段Glb克隆 | 第45-46页 |
| ·目的片段Glb的序列与结构 | 第46-50页 |
| 4 结论 | 第50页 |
| 5 讨论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-62页 |
| 英文摘要 | 第62-63页 |
| 附录 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
