农杆菌介导的马铃薯转基因体系的建立
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-20页 |
| ·概述 | 第9-10页 |
| ·前人研究进展 | 第10-19页 |
| ·植物遗传转化的历史及研究现状 | 第10页 |
| ·农杆菌的生物学特性及Vir区基因的活化 | 第10-12页 |
| ·农杆菌的生物学特性 | 第10-11页 |
| ·Vir区基因的活化 | 第11-12页 |
| ·农杆菌Ti质粒的T-DNA转化植物基因组的过程 | 第12页 |
| ·受体系统的建立及要考虑的因素 | 第12-16页 |
| ·受体系统的类型及选择 | 第12-14页 |
| ·受体系统建立的条件 | 第14-16页 |
| ·植物基因转化系统的建立及其主要影响因素 | 第16-19页 |
| ·成熟实用的基因转化系统的特点 | 第16页 |
| ·农杆菌侵染的敏感性检测 | 第16-17页 |
| ·外植体的预培养 | 第17-18页 |
| ·外植体的农杆菌接种 | 第18页 |
| ·共培养 | 第18页 |
| ·外植体脱菌及选择培养 | 第18-19页 |
| ·试验研究目的 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-26页 |
| ·供试材料 | 第20-21页 |
| ·受体系统建立中所用的试材 | 第20页 |
| ·供试质粒 | 第20-21页 |
| ·受体系统的建立 | 第21-22页 |
| ·本实验供试培养基配方 | 第21页 |
| ·培养方法 | 第21-22页 |
| ·转化体系的建立 | 第22-23页 |
| ·马铃薯外植体对Km的敏感性测试 | 第22页 |
| ·遗传转化及相关参数的筛选 | 第22-23页 |
| ·遗传转化的具体操作步骤如下 | 第22-23页 |
| ·薯块的转化 | 第23页 |
| ·鉴定 | 第23-26页 |
| ·马铃薯DNA的提取(小样提取法) | 第23-24页 |
| ·转化的马铃薯材料的PCR鉴定 | 第24-25页 |
| ·GUS基因表达的检测 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-43页 |
| ·受体系统的建立 | 第26-31页 |
| ·最佳外植体和培养基的选择 | 第26-30页 |
| ·基因型差异对受体系统的影响 | 第30页 |
| ·每个外植体上不定芽分化数情况 | 第30-31页 |
| ·转化体系的建立 | 第31-43页 |
| ·适宜抗生素浓度的确定 | 第31-32页 |
| ·不同预培养时间对转化的影响 | 第32-34页 |
| ·不同的侵染时间对农杆菌转化的影响 | 第34-35页 |
| ·不同共培养时间对转化的影响 | 第35-36页 |
| ·转化率的分析 | 第36-38页 |
| ·薯块转化与茎段转化间的优劣比较 | 第38-39页 |
| ·不同基因型对转化的影响 | 第39-40页 |
| ·鉴定 | 第40-43页 |
| ·PCR鉴定 | 第40-41页 |
| ·GUS鉴定 | 第41-43页 |
| 4 讨论:影响马铃薯转化率的因素 | 第43-45页 |
| ·基因型差异 | 第43页 |
| ·外植体差异 | 第43-44页 |
| ·丛生芽数目 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
