一、 中文摘要 | 第1-12页 |
二、 英文摘要 | 第12-15页 |
三、 英文缩略词 | 第15-16页 |
四、 序言 | 第16-32页 |
1 禽白血病概况 | 第16-17页 |
2 ALV-J的发生与危害 | 第17-18页 |
3 J亚群禽白血病病毒病原特性与分子病毒学 | 第18-20页 |
4 J亚群禽白血病病毒的致病性及其致病机制 | 第20-23页 |
4.1 ALV-J的致病性 | 第20-22页 |
4.2 ALV-J的致肿瘤机制 | 第22-23页 |
5 J亚群禽白血病的诊断与检测 | 第23-27页 |
5.1 临床诊断 | 第24-25页 |
5.2 实验室诊断 | 第25-27页 |
6 禽类免疫抑制病与禽白血病的感染 | 第27-29页 |
6.1 禽类免疫系统和免疫抑制 | 第27-28页 |
6.2 禽白血病引起的免疫抑制及其机理 | 第28-29页 |
7 本研究的目的意义 | 第29-31页 |
8 附图 | 第31-32页 |
五、 研究内容 | 第32-100页 |
实验一J亚群禽白血病病毒的分离、鉴定及其囊膜蛋白env基因的克隆 | 第32-49页 |
1 材料和方法 | 第34-42页 |
1.1 CEF细胞 | 第34页 |
1.2 检测ALV-J的PCR的引物 | 第34-35页 |
1.3 IFA所用单抗 | 第35页 |
1.4 阳性对照ALV-J病毒 | 第35页 |
1.5 病料来源和发病情况 | 第35-36页 |
1.6 病毒的分离 | 第36-39页 |
1.6.1 病料处理 | 第36页 |
1.6.2 病毒分离、复制 | 第36页 |
1.6.3 间接免疫荧光反应(IFA) | 第36-37页 |
1.6.4 模板DNA的提取 | 第37-38页 |
1.6.5 聚合酶链反应(PCR)检测 | 第38-39页 |
1.6.6 PCR产物DNA电泳 | 第39页 |
1.7 env基因的克隆测序 | 第39-42页 |
1.7.1 克隆载体和宿主菌 | 第39页 |
1.7.2 PCR产物的纯化 | 第39-40页 |
1.7.3 DNA的连接反应 | 第40页 |
1.7.4 BL21大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第40页 |
1.7.5 连接产物的转化 | 第40-41页 |
1.7.6 质粒DNA的提取 | 第41-42页 |
1.7.7 重组质粒DNA的酶切鉴定 | 第42页 |
1.7.8 阳性克隆序列测定 | 第42页 |
2 结果 | 第42-43页 |
2.1 PCR检测结果 | 第42-43页 |
2.2 抗ALV-J单抗间接免疫荧光反应(IFA)结果 | 第43页 |
2.3 重组质粒酶切鉴定结果 | 第43页 |
2.4 阳性克隆序列测定结果 | 第43页 |
3 讨论 | 第43-46页 |
4 附图和附表 | 第46-49页 |
实验二J亚群禽白血病病毒感染对肉鸡生长性能和免疫功能的影响 | 第49-69页 |
1 材料与方法 | 第51-58页 |
1.1 材料 | 第51-52页 |
1.2 疫苗和免疫程序 | 第52页 |
1.3 实验动物感染和饲养 | 第52-53页 |
1.4 实验设计 | 第53-54页 |
1.5 本研究实验设计(1.4)中涉及的具体实验方法 | 第54-58页 |
1.5.1 ALV-J病毒的TcID的测定 | 第54页 |
1.5.2 ALV-J感染后的临床观察和死淘记录 | 第54页 |
1.5.3 体重、胸腺、脾脏和法氏囊重量 | 第54页 |
1.5.4 实验鸡的采血和接种细胞 | 第54-55页 |
1.5.5 间接免疫荧光反应(IFA) | 第55-56页 |
1.5.6 模板DNA的制备 | 第56页 |
1.5.7 聚合酶链反应(PcR)检测及PcR产物电泳 | 第56-58页 |
1.5.8 血清中NDV抗体和IBDV抗体的测定 | 第58页 |
1.6 数据统计分析 | 第58页 |
2 结果 | 第58-61页 |
2.1 ALV-J感染雏鸡后的临床观察剖检变化 | 第58-59页 |
2.2 ALV-J感染对肉鸡生长(体重)的影响 | 第59-60页 |
2.3 各个日龄阶段肉鸡免疫器官指数(g/kg)测定结呆 | 第60页 |
2.4 ALV-J感染及NDV疫苗免疫后抗体反应的抑制作用 | 第60页 |
2.5 ALV-J感染对IBDV疫苗免疫后抗体反应的影响 | 第60-61页 |
2.6 病毒血症的检测结果和PcR检测结果 | 第61页 |
3 讨论 | 第61-63页 |
4 附图和附表 | 第63-69页 |
实验三ALV-J和REV共感染对肉鸡生长和免疫功能的抑制作用 | 第69-89页 |
1 材料与方法 | 第71-76页 |
1.1 材料 | 第71-72页 |
1.2 疫苗和免疫程序 | 第72页 |
1.3 实验动物感染和饲养 | 第72页 |
1.4 实验设计 | 第72-73页 |
1.5 本研究实验设计(1.4)中涉及的具体实验方法 | 第73-76页 |
1.5.1 ALV-J病毒的TCID的测定 | 第73页 |
1.5.2 ALV-J感染后的临床观察和死淘记录 | 第73-74页 |
1.5.3 体重、胸腺、脾脏和法氏囊重量 | 第74页 |
1.5.4 实验鸡的采血和接种细胞 | 第74页 |
1.5.5 间接免疫荧光反应(IFA | 第74页 |
1.5.6 模板DNA的制备 | 第74-75页 |
1.5.7 PCR检测及PCR产物电泳 | 第75页 |
1.5.8 血清中NDV疫苗抗体和IBDV抗体的测定 | 第75页 |
1.5.9 病理组织学观察 | 第75-76页 |
1.6 数据统计分析 | 第76页 |
2 结果 | 第76-79页 |
2.1 ALV-J和REV感染雏鸡后的临床观察 | 第76-77页 |
2.2 ALV-J和REV共感染对肉鸡生长的影响 | 第77页 |
2.3 各个日龄阶段肉鸡免疫器官指数(g/kg)测定结果 | 第77页 |
2.4 ALV-J和REV共感染对NDV疫苗抗体反应的抑制作用 | 第77-78页 |
2.5 ALV-J和REV共感染对IBDV疫苗抗体反应的影响 | 第78页 |
2.6 病理组织学观察结呆 | 第78页 |
2.7 病毒血症的检测结果和PCR检测结果 | 第78-79页 |
3 讨论 | 第79-81页 |
4 附图和附表 | 第81-89页 |
实验四人工接种ALV-J和REV的鸡群自然感染IBV的实验报道 | 第89-100页 |
1 材料与方法 | 第91-93页 |
1.1 ALV-J病毒和REV病毒 | 第91页 |
1.2 疫苗和免疫程序 | 第91-92页 |
1.3 实验动物感染和饲养 | 第92页 |
1.4 试验鸡群的临床观察和死淘记录 | 第92页 |
1.5 TBV病毒的分离鉴定 | 第92-93页 |
1.5.1 实验用鸡胚、病毒以及血清 | 第92-93页 |
1.5.2 试验鸡剖检检查 | 第93页 |
1.5.3 IBV的分离 | 第93页 |
1.5.4 致鸡胚矮小试验 | 第93页 |
2 结果 | 第93-95页 |
2.1 试验鸡群的发病情况 | 第93-94页 |
2.2 试验鸡群发病临床检查和剖检变化 | 第94-95页 |
2.3 病毒接种鸡胚情况 | 第95页 |
3 讨论 | 第95-98页 |
4 附图 | 第98-100页 |
六、 本研究主要结论和创新 | 第100-101页 |
七、 参考文献 | 第101-112页 |
八、 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第112-113页 |
九、 致谢 | 第113页 |