中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-27页 |
第一节 猪瘟病毒分子生物学研究进展 | 第10-20页 |
第二节 猪瘟病毒分子免疫学研究进展 | 第20-27页 |
第二章 猪瘟兔化弱毒的浓缩提纯与兔抗猪瘟兔化弱毒高免血清的制备 | 第27-38页 |
1. 材料 | 第27-28页 |
2. 方法与步骤 | 第28-31页 |
3. 结果 | 第31-36页 |
3.1 猪瘟兔化弱毒的提纯与鉴定 | 第31-34页 |
3.2 测猪瘟抗体水平的间接ELISA的建立 | 第34-35页 |
3.3 免疫兔的猪瘟抗体水平 | 第35-36页 |
4. 讨论 | 第36-38页 |
第三章 猪瘟病毒E2基因主要抗原结构域原核表达载体的构建和表达 | 第38-56页 |
1. 材料 | 第38-39页 |
2. 方法与步骤 | 第39-46页 |
3. 结果 | 第46-51页 |
3.1 重组表达质粒pThioHis—e2的构建示意图 | 第46页 |
3.2 pThioHisB的SalⅠ、PstⅠ单酶切结果 | 第46页 |
3.3 pcDNA3STE2的BamHⅠ EcoRⅠ双酶切结果 | 第46-47页 |
3.4 pThioHisB的SalⅠ、PstⅠ双酶切结果 | 第47页 |
3.5 PCR法扩增pcDNA3STE2上的E2基因特异片段的结果 | 第47页 |
3.6 重组质粒pThio—e2的双酶切鉴定 | 第47-50页 |
3.7 含pThio—e2的宿主菌诱导表达产物的SDS—PAGE电泳结果 | 第50-51页 |
3.8 TOPe2菌诱导表达产物Thio—e2的免疫转印结果 | 第51页 |
4. 讨论 | 第51-56页 |
第四章 表达猪瘟病毒E2全基因的原核表达载体的构建与表达 | 第56-64页 |
1. 材料 | 第56页 |
2. 方法与步骤 | 第56-58页 |
3. 结果 | 第58-62页 |
3.1 pET-32E2重组质粒的构建示意图 | 第58页 |
3.2 pcDNA3STE2的双酶切结果 | 第58页 |
3.3 E2基因试剂盒回收产物的电泳结果 | 第58页 |
3.4 含E2全基因的重组质粒的酶切鉴定 | 第58-59页 |
3.5 BL21—E2菌诱导产物的SDS—PAGE电泳检测结果 | 第59-61页 |
3.6 表达产物的免疫转印结果 | 第61-62页 |
4. 讨论 | 第62-64页 |
第五章 重组质粒pThioHisB—e2的诱导表达条件及表达产物的提取研究 | 第64-77页 |
1. 材料 | 第64-65页 |
2. 方法与步骤 | 第65-67页 |
3. 结果 | 第67-73页 |
3.1 不同诱导时间的诱导结果 | 第67-68页 |
3.2 不同诱导剂浓度的诱导结果 | 第68-69页 |
3.3 不同的培养温度条件的诱导试验结果 | 第69页 |
3.4 用不同诱导剂的诱导试验结果 | 第69页 |
3.5 优化条件下,诱导表达的目标蛋白相对含量测定 | 第69-71页 |
3.6 渗透休克法提取结果 | 第71页 |
3.7 溶菌酶法提取结果 | 第71-73页 |
4. 讨论 | 第73-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |
全文总结 | 第83-84页 |
致谢 | 第84页 |