中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-17页 |
1. 牛乳中免疫球蛋白 | 第11页 |
2. FcRn 研究进展 | 第11-16页 |
·FcRn 的分子结构 | 第12页 |
·FcRn 与IgG 的相互作用 | 第12-13页 |
·FcRn 的功能作用 | 第13-15页 |
·FcRn 在胎盘上的作用 | 第13页 |
·FcRn 在血液循环中的作用 | 第13-14页 |
·FcRn 在肠道上的作用 | 第14页 |
·FcRn 在乳腺上的作用 | 第14-15页 |
·影响FcRn 表达因素 | 第15-16页 |
·激素对FcRn 的影响 | 第15页 |
·不同生理阶段对FcRn 的影响 | 第15页 |
·基因多态性对FcRn 的影响 | 第15-16页 |
3 本研究的意义 | 第16-17页 |
第二章 奶牛 FcRn α链基因启动子 SSCP 多态性研究 | 第17-23页 |
1 材料与方法 | 第17-19页 |
·试验材料采集 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17-18页 |
·主要仪器设备 | 第18页 |
·引物的设计和PCR 扩增 | 第18页 |
·PCR 产物的克隆和测序 | 第18-19页 |
·PCR-SSCP 法检测单核苷酸多态 | 第19页 |
·数据的统计处理 | 第19页 |
2 结果与分析 | 第19-21页 |
·PCR 产物 | 第19页 |
·PCR-SSCP 多态性 | 第19-20页 |
·序列分析 | 第20-21页 |
·FCGRT 基因启动子频率和基因型频率分析 | 第21页 |
·基因位点的Hardy-Weinberg 平衡检验 | 第21页 |
3 讨论 | 第21-22页 |
4 小结 | 第22-23页 |
第三章 FCGRT 启动子不同单倍型荧光素酶报告基因载体构建及其转录活性检测 | 第23-32页 |
1 材料和方法 | 第23-26页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
·计算机软件及数据库 | 第24页 |
·方法 | 第24-26页 |
·数据统计分析 | 第26页 |
2 结果 | 第26-30页 |
·目的基因的克隆及测序 | 第26-27页 |
·FCGRT 基因启动子不同单倍型DNA 片段 | 第27页 |
·含FCGRT 基因启动子不同单倍型DNA 片段的重组质粒鉴定 | 第27-28页 |
·不同单倍型启动子DNA 片段荧光素酶表达载体测序鉴定 | 第28-29页 |
·双荧光素酶报告检测 | 第29-30页 |
3 讨论 | 第30-31页 |
4. 小结 | 第31-32页 |
第四章 中国荷斯坦奶牛 FCGRT 启动子 SNP 对 FcRn m RNA 表达的影响 | 第32-39页 |
1 材料与方法 | 第32-36页 |
·试验动物及采样 | 第32页 |
·试剂及仪器 | 第32-33页 |
·DNA 和RNA 提取 | 第33-34页 |
·cDNA 的合成 | 第34-35页 |
·RT-PCR 检测乳腺FcRn 基因mRNA 的表达量 | 第35页 |
·数据统计分析 | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-37页 |
·奶牛乳腺组织提取DNA 检测 | 第36页 |
·RT-PCR 内参基因和引物的PCR 检测 | 第36页 |
·FcRn 基因的扩增曲线及熔解曲线 | 第36-37页 |
·FCGRT 启动子对FcRn 表达相对定量结果 | 第37页 |
3. 讨论 | 第37-38页 |
4. 小结 | 第38-39页 |
第五章 体外激素处理对乳腺上皮细胞 FcRn m RNA 表达的影响 | 第39-44页 |
1 材料和方法 | 第39-41页 |
·乳腺上皮细胞的培养和富集 | 第39-40页 |
·激素处理 | 第40页 |
·乳腺上皮细胞RNA 提取和CDNA 的合成 | 第40页 |
·RT-PCR | 第40-41页 |
·数据分析 | 第41页 |
2 结果与分析 | 第41-42页 |
·胰岛素处理乳腺上皮细胞对FcRn mRNA 表达的影响 | 第41页 |
·甲状腺素乳腺上皮细胞对FcRn mRNA 表达的影响 | 第41-42页 |
·胰高血糖素乳腺上皮细胞对FcRn mRNA 表达的影响 | 第42页 |
3. 讨论 | 第42-43页 |
4. 小结 | 第43-44页 |
总结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |
附录 | 第52-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第58页 |