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拟南芥NH4+超敏突变体hsn1分子机制的相关研究

致谢第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第10-17页
第一章 文献综述第17-35页
 1.NH_4~+对植物根系生长和发育的作用第17-19页
     ·氮(N)源对植物根系生长和发育的作用第17页
     ·铵毒害第17-19页
       ·铵毒害的表型第18页
       ·铵毒害可能的机制第18-19页
 2.GDP—甘露糖焦磷酸化酶第19-28页
     ·维生素C第19-24页
       ·维生素C在植物体内的生理功能第20-22页
       ·维生素C的合成途径第22-24页
     ·蛋白质糖基化第24-28页
       ·蛋白质糖基化的功能第24-25页
       ·N—聚糖的分类第25-26页
       ·GDP-甘露糖和GDP—海藻糖植物体内的生物合成过程第26-28页
 3.未折叠蛋白反应(UPR)第28-35页
     ·UPR的信号传导途径第28-30页
     ·UPR的细胞生理学功能第30-32页
       ·内质网相关蛋白降解(ERAD)第30-31页
       ·UPR诱导后能导致细胞周期停止第31页
       ·UPR能调控细胞程序性死亡第31-32页
     ·UPR在疾病中的作用第32页
     ·UPR过程中BiP和PDI的作用第32-35页
       ·BiP第32-33页
       ·PDI第33-35页
第二章 突变体的筛选和表型分析第35-49页
 1.材料与方法第35-41页
     ·材料第35页
     ·方法第35-41页
       ·拟南芥种子表面灭菌第35-36页
       ·拟南芥的培养条件第36-37页
       ·突变体的筛选第37页
       ·根系参数的测量第37页
       ·铵离子浓度梯度实验第37页
       ·各种特殊培养基的配置第37-38页
       ·根尖淀粉粒染色方法第38页
       ·拟南芥杂交方法第38-39页
       ·GUS染色观察的方法第39-40页
       ·激光共聚焦(Confocal)扫描第40页
       ·铵含量的测定第40-41页
 2.结果第41-48页
     ·突变体筛选第41-42页
     ·突变体主根长是受NH_4~+抑制的第42-43页
     ·hsn1根系表型的铵离子特异性第43-44页
     ·突变体根系构型的特点第44-45页
     ·hsn1突变体在1/2MS培养基条件下主根发育不完整第45-47页
     ·hsn1突变体铵离子吸收,代谢第47-48页
 3.讨论第48-49页
     ·突变体hsn1的突变症状与铵离子有关第48页
     ·突变体hsn1并未丧失吸收铵离子的能力第48-49页
第三章 突变体hsn1的基因定位与克隆分析第49-73页
 1.材料与方法第49-63页
     ·材料第49页
     ·方法第49-63页
       ·F_2群体的构建及遗传分析第49页
       ·F_2群体DNA提取第49-50页
       ·图位克隆的方法第50-51页
       ·基因定位第51-53页
       ·基因克隆与测序分析第53页
       ·蛋白质同源性分析第53-54页
       ·RNA提取及反转录第54-55页
       ·目的基因转入拟南芥植株第55-57页
       ·原核蛋白表达分析第57-60页
       ·SDS-PAGE电泳:第60-61页
       ·Western blot第61-63页
       ·GMP酶活测定第63页
 2.结果第63-71页
     ·突变体的遗传分析第63-64页
     ·基因定位第64-65页
     ·候选基因的分析第65-68页
     ·野生型和突变体体内的GMP酶活测定:第68-70页
     ·GMP蛋白的同源与进化分析第70-71页
 3.讨论第71-73页
第四章 维生素C含量分析与植物体内糖基化水平测定第73-80页
 1.材料与方法第73-74页
     ·材料第73页
     ·方法第73-74页
       ·拟南芥生长条件第73页
       ·维生素C(AsA)含量的测定第73-74页
       ·植物体内糖基化水平的测定第74页
 2.结果第74-78页
     ·维生素C(AsA)含量测定第74-77页
     ·植物体内糖基化水平的测定第77-78页
 3.讨论第78-80页
第五章 拟南芥野生型和突变体hsn1地下部未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)和细胞死亡的检测第80-84页
 1.材料与方法第80-81页
     ·材料第80页
     ·方法第80-81页
       ·拟南芥生长条件和杂交方法第80页
       ·未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)的检测第80-81页
       ·植物细胞死亡的检测第81页
 2.结果与分析第81-82页
     ·未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)的检测第81-82页
     ·植物细胞死亡的检测第82页
 3.讨论第82-84页
第六章 结论与展望第84-87页
 1.结论第84-86页
 2.展望第86-87页
参考文献第87-105页
攻读博士学位期间完成的科研论文第105页

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