致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-35页 |
1.NH_4~+对植物根系生长和发育的作用 | 第17-19页 |
·氮(N)源对植物根系生长和发育的作用 | 第17页 |
·铵毒害 | 第17-19页 |
·铵毒害的表型 | 第18页 |
·铵毒害可能的机制 | 第18-19页 |
2.GDP—甘露糖焦磷酸化酶 | 第19-28页 |
·维生素C | 第19-24页 |
·维生素C在植物体内的生理功能 | 第20-22页 |
·维生素C的合成途径 | 第22-24页 |
·蛋白质糖基化 | 第24-28页 |
·蛋白质糖基化的功能 | 第24-25页 |
·N—聚糖的分类 | 第25-26页 |
·GDP-甘露糖和GDP—海藻糖植物体内的生物合成过程 | 第26-28页 |
3.未折叠蛋白反应(UPR) | 第28-35页 |
·UPR的信号传导途径 | 第28-30页 |
·UPR的细胞生理学功能 | 第30-32页 |
·内质网相关蛋白降解(ERAD) | 第30-31页 |
·UPR诱导后能导致细胞周期停止 | 第31页 |
·UPR能调控细胞程序性死亡 | 第31-32页 |
·UPR在疾病中的作用 | 第32页 |
·UPR过程中BiP和PDI的作用 | 第32-35页 |
·BiP | 第32-33页 |
·PDI | 第33-35页 |
第二章 突变体的筛选和表型分析 | 第35-49页 |
1.材料与方法 | 第35-41页 |
·材料 | 第35页 |
·方法 | 第35-41页 |
·拟南芥种子表面灭菌 | 第35-36页 |
·拟南芥的培养条件 | 第36-37页 |
·突变体的筛选 | 第37页 |
·根系参数的测量 | 第37页 |
·铵离子浓度梯度实验 | 第37页 |
·各种特殊培养基的配置 | 第37-38页 |
·根尖淀粉粒染色方法 | 第38页 |
·拟南芥杂交方法 | 第38-39页 |
·GUS染色观察的方法 | 第39-40页 |
·激光共聚焦(Confocal)扫描 | 第40页 |
·铵含量的测定 | 第40-41页 |
2.结果 | 第41-48页 |
·突变体筛选 | 第41-42页 |
·突变体主根长是受NH_4~+抑制的 | 第42-43页 |
·hsn1根系表型的铵离子特异性 | 第43-44页 |
·突变体根系构型的特点 | 第44-45页 |
·hsn1突变体在1/2MS培养基条件下主根发育不完整 | 第45-47页 |
·hsn1突变体铵离子吸收,代谢 | 第47-48页 |
3.讨论 | 第48-49页 |
·突变体hsn1的突变症状与铵离子有关 | 第48页 |
·突变体hsn1并未丧失吸收铵离子的能力 | 第48-49页 |
第三章 突变体hsn1的基因定位与克隆分析 | 第49-73页 |
1.材料与方法 | 第49-63页 |
·材料 | 第49页 |
·方法 | 第49-63页 |
·F_2群体的构建及遗传分析 | 第49页 |
·F_2群体DNA提取 | 第49-50页 |
·图位克隆的方法 | 第50-51页 |
·基因定位 | 第51-53页 |
·基因克隆与测序分析 | 第53页 |
·蛋白质同源性分析 | 第53-54页 |
·RNA提取及反转录 | 第54-55页 |
·目的基因转入拟南芥植株 | 第55-57页 |
·原核蛋白表达分析 | 第57-60页 |
·SDS-PAGE电泳: | 第60-61页 |
·Western blot | 第61-63页 |
·GMP酶活测定 | 第63页 |
2.结果 | 第63-71页 |
·突变体的遗传分析 | 第63-64页 |
·基因定位 | 第64-65页 |
·候选基因的分析 | 第65-68页 |
·野生型和突变体体内的GMP酶活测定: | 第68-70页 |
·GMP蛋白的同源与进化分析 | 第70-71页 |
3.讨论 | 第71-73页 |
第四章 维生素C含量分析与植物体内糖基化水平测定 | 第73-80页 |
1.材料与方法 | 第73-74页 |
·材料 | 第73页 |
·方法 | 第73-74页 |
·拟南芥生长条件 | 第73页 |
·维生素C(AsA)含量的测定 | 第73-74页 |
·植物体内糖基化水平的测定 | 第74页 |
2.结果 | 第74-78页 |
·维生素C(AsA)含量测定 | 第74-77页 |
·植物体内糖基化水平的测定 | 第77-78页 |
3.讨论 | 第78-80页 |
第五章 拟南芥野生型和突变体hsn1地下部未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)和细胞死亡的检测 | 第80-84页 |
1.材料与方法 | 第80-81页 |
·材料 | 第80页 |
·方法 | 第80-81页 |
·拟南芥生长条件和杂交方法 | 第80页 |
·未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)的检测 | 第80-81页 |
·植物细胞死亡的检测 | 第81页 |
2.结果与分析 | 第81-82页 |
·未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)的检测 | 第81-82页 |
·植物细胞死亡的检测 | 第82页 |
3.讨论 | 第82-84页 |
第六章 结论与展望 | 第84-87页 |
1.结论 | 第84-86页 |
2.展望 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-105页 |
攻读博士学位期间完成的科研论文 | 第105页 |