麝鼠肠炎沙门氏菌PCR诊断方法的建立
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 引言 | 第9-17页 |
| 1 沙门氏菌的概况 | 第9-10页 |
| 2 沙门氏菌感染途径和致病机制 | 第10-11页 |
| 3 沙门氏菌检测方法的研究进展 | 第11-16页 |
| 4 本课题研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 材料与方法 | 第17-27页 |
| 1 材料 | 第17-21页 |
| ·试验病料 | 第17页 |
| ·特异性试验所需材料 | 第17页 |
| ·标准菌株与载体 | 第17-18页 |
| ·试剂 | 第18页 |
| ·试验用溶液及其配制 | 第18-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2 方法 | 第21-27页 |
| ·肠炎沙门氏菌的分离鉴定 | 第21页 |
| ·肠炎沙门氏菌标准菌株DNA的制备 | 第21-22页 |
| ·引物的设计与合成 | 第22页 |
| ·PCR反应 | 第22-23页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第23页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·重组连接反应 | 第23页 |
| ·重组连接后质粒DNA的转化 | 第23-24页 |
| ·克隆的筛选 | 第24页 |
| ·质粒DNA的小量制备--碱裂解法 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的单酶切鉴定 | 第25页 |
| ·阳性质粒PCR鉴定 | 第25页 |
| ·序列分析 | 第25页 |
| ·最适退火温度筛选 | 第25-26页 |
| ·特异性试验 | 第26页 |
| ·敏感性试验 | 第26页 |
| ·临床试验 | 第26-27页 |
| 结果 | 第27-34页 |
| 1 肠炎沙门氏菌的分离鉴定 | 第27-28页 |
| 2 PCR扩增 | 第28-29页 |
| 3 重组质粒的筛选和鉴定 | 第29-30页 |
| 4 序列测定及同源性分析 | 第30-31页 |
| 5 退火温度的筛选 | 第31页 |
| 6 特异性试验 | 第31-32页 |
| 7 敏感性试验 | 第32页 |
| 8 应用试验 | 第32-33页 |
| 9 PCR检测结果与实验室分离方法结果的比较 | 第33-34页 |
| 讨论 | 第34-36页 |
| 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 作者简介 | 第41-42页 |
| 附录(攻读学位期间发表论文目录) | 第42页 |
