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白叶枯病菌hrpX/hrpG双基因敲除突变体的构建及特性研究

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
1 文献综述第10-23页
   ·水稻白叶枯病菌第10-11页
   ·水稻黄单胞菌T3SS第11-13页
   ·HRP 基因簇第13-16页
   ·III 型分泌系统的效应子蛋白第16-18页
     ·avr 基因第16-17页
     ·T3SS 的伴侣分子第17-18页
   ·HRPX 调节子第18-19页
   ·基因芯片第19-21页
   ·目的与意义第21-23页
2 研究内容第23-36页
   ·材料与方法第23-25页
     ·仪器及试剂、供试菌株与载体、培养条件第23-25页
   ·HRPX/HRPG 基因的克隆第25-30页
     ·引物设计与合成第25页
     ·基因组DNA 的提取第25页
     ·PCR 扩增第25-26页
     ·凝胶回收第26页
     ·PCR 产物与pMD19‐Tsimple 载体连接第26-27页
     ·连接产物的转化第27-28页
     ·重组质粒的快速筛选第28页
     ·质粒DNA 的提取和纯化第28-29页
     ·酶切验证第29-30页
   ·敲除载体的构建第30-32页
     ·MluI 酶切第30页
     ·Kan 片段的扩增第30-31页
     ·Kan 片段与pMD18‐T 载体连接第31页
     ·酶切第31页
     ·连接第31-32页
     ·测序第32页
     ·敲除载体的构建第32页
   ·敲除载体的转化第32-33页
     ·感受态细胞的制备第32-33页
   ·突变体的验证第33-34页
     ·PCR 方法第33-34页
     ·致病性测定第34页
     ·电镜观察第34页
   ·基因芯片的制备第34-36页
     ·水稻的培养第34页
     ·菌株的培养第34页
     ·喷雾接种第34页
     ·取材第34页
     ·RNA 的提取第34-35页
     ·送样第35页
     ·数据分析第35-36页
3 结果与分析第36-43页
   ·白叶枯病菌HRPX/HRPG 基因的克隆结果第36页
   ·HRPX/HRPG 敲除载体的构建结果第36页
   ·HRPX/HRPG 敲除载体的酶切图谱第36-37页
   ·突变体的验证及检测第37-38页
     ·PCR 扩增结果第37-38页
     ·致病性检测结果第38页
     ·电镜观察菌株形态第38页
   ·基因芯片的制备第38-43页
     ·喷雾接菌及RNA 提取结果第38-39页
     ·基因芯片结果第39-43页
4 结论第43-44页
参考文献第44-51页
附录第51-57页
致谢第57-58页
攻读学位期间发表的学术论文目录第58页

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