中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-23页 |
·水稻白叶枯病菌 | 第10-11页 |
·水稻黄单胞菌T3SS | 第11-13页 |
·HRP 基因簇 | 第13-16页 |
·III 型分泌系统的效应子蛋白 | 第16-18页 |
·avr 基因 | 第16-17页 |
·T3SS 的伴侣分子 | 第17-18页 |
·HRPX 调节子 | 第18-19页 |
·基因芯片 | 第19-21页 |
·目的与意义 | 第21-23页 |
2 研究内容 | 第23-36页 |
·材料与方法 | 第23-25页 |
·仪器及试剂、供试菌株与载体、培养条件 | 第23-25页 |
·HRPX/HRPG 基因的克隆 | 第25-30页 |
·引物设计与合成 | 第25页 |
·基因组DNA 的提取 | 第25页 |
·PCR 扩增 | 第25-26页 |
·凝胶回收 | 第26页 |
·PCR 产物与pMD19‐Tsimple 载体连接 | 第26-27页 |
·连接产物的转化 | 第27-28页 |
·重组质粒的快速筛选 | 第28页 |
·质粒DNA 的提取和纯化 | 第28-29页 |
·酶切验证 | 第29-30页 |
·敲除载体的构建 | 第30-32页 |
·MluI 酶切 | 第30页 |
·Kan 片段的扩增 | 第30-31页 |
·Kan 片段与pMD18‐T 载体连接 | 第31页 |
·酶切 | 第31页 |
·连接 | 第31-32页 |
·测序 | 第32页 |
·敲除载体的构建 | 第32页 |
·敲除载体的转化 | 第32-33页 |
·感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
·突变体的验证 | 第33-34页 |
·PCR 方法 | 第33-34页 |
·致病性测定 | 第34页 |
·电镜观察 | 第34页 |
·基因芯片的制备 | 第34-36页 |
·水稻的培养 | 第34页 |
·菌株的培养 | 第34页 |
·喷雾接种 | 第34页 |
·取材 | 第34页 |
·RNA 的提取 | 第34-35页 |
·送样 | 第35页 |
·数据分析 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-43页 |
·白叶枯病菌HRPX/HRPG 基因的克隆结果 | 第36页 |
·HRPX/HRPG 敲除载体的构建结果 | 第36页 |
·HRPX/HRPG 敲除载体的酶切图谱 | 第36-37页 |
·突变体的验证及检测 | 第37-38页 |
·PCR 扩增结果 | 第37-38页 |
·致病性检测结果 | 第38页 |
·电镜观察菌株形态 | 第38页 |
·基因芯片的制备 | 第38-43页 |
·喷雾接菌及RNA 提取结果 | 第38-39页 |
·基因芯片结果 | 第39-43页 |
4 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-51页 |
附录 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第58页 |