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L03菌株种类鉴定及其几丁质酶分离纯化与性质研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
第一章 前言第12-26页
   ·植物病害生物防治研究进展第12-13页
   ·微生物几丁质酶第13-21页
     ·微生物产几丁质酶的研究概况第13-14页
       ·产几丁质酶微生物种类第13-14页
       ·产几丁质酶微生物的生态分布第14页
     ·产几丁质酶菌株的筛选与测定第14-15页
     ·微生物产酶特点第15-16页
       ·多样性第15页
       ·诱导性第15页
       ·分泌性第15-16页
       ·分子生物学特点第16页
     ·几丁质酶类型第16-17页
     ·几丁质酶性质第17-18页
       ·几丁质酶分子量第17页
       ·几丁质酶等电点第17页
       ·几丁质酶对酸碱的适应性第17页
       ·几丁质酶水解反应温度第17-18页
       ·几丁质酶对金属离子的敏感性第18页
     ·几丁质酶催化机理第18-19页
     ·提高菌株产酶能力的方法第19-21页
   ·几丁质酶的应用第21-24页
     ·对植物真菌病害的防治第21-22页
     ·对植物线虫病害的防治第22-23页
     ·对植物有害昆虫的防治第23页
     ·在转基因育种中的应用第23-24页
     ·几丁质酶在其他领域中的应用第24页
   ·本研究的目的意义第24-26页
第二章 产几丁质酶菌株的筛选第26-32页
   ·材料和方法第26-28页
     ·土样采集第26页
     ·培养基制备第26页
       ·胶体几丁质制备第26页
       ·几丁质培养基制备第26页
       ·其他培养基第26页
     ·各种溶液、缓冲液配制第26-27页
     ·产酶菌株筛选方法第27页
     ·几丁质酶活力测定方法第27-28页
       ·菌株培养和粗酶液提取第27页
       ·标准曲线制定第27页
       ·二硝基水杨酸方法测定酶活性第27-28页
   ·结果与分析第28-31页
     ·产酶菌株数量第28-30页
     ·几丁质酶活性第30-31页
       ·N-乙酰氨基葡萄糖标准曲线第30页
       ·几丁质酶活性测定第30-31页
   ·讨论第31-32页
第三章 产几丁质酶菌株的鉴定第32-40页
   ·实验材料与方法第32-35页
     ·培养基第32页
     ·主要试剂第32页
     ·各种溶液及其配置方法第32-33页
     ·形态及生理生化特征第33页
       ·培养特征观察第33页
       ·菌体形态第33页
       ·革兰氏染色反应第33页
       ·生理生化性状测定第33页
     ·分子生物学方法鉴定第33-35页
       ·CTAB 法提取细菌总基因组DNA第33-34页
       ·16SrDNA 扩增及测序第34-35页
   ·结果与分析第35-39页
     ·菌体形态第35页
     ·菌落形态第35页
     ·生理生化反应第35页
     ·16SrDNA 序列分析第35-39页
   ·讨论第39-40页
第四章 L03 菌株几丁质酶分离纯化及性质研究第40-55页
   ·实验材料和方法第40-43页
     ·实验试剂与溶液配制第40-41页
     ·粗酶液提取方法第41页
     ·酶液纯化方法第41-42页
       ·Phenyl-Sepharose 6 Fast Flow 疏水层析第41-42页
       ·DEAE Sepharose Fast Flow 阴离子交换层析第42页
       ·Sephadex G-75 凝胶过滤层析第42页
     ·几丁质酶蛋白分子量测定第42-43页
     ·酶学性质试验第43页
       ·酶反应的最适温度和热稳定性第43页
       ·酶反应的最适pH 和酸碱稳定性第43页
       ·金属离子对酶活性的影响第43页
     ·几丁质酶对病原真菌细胞壁的降解作用第43页
   ·结果与分析第43-52页
     ·粗酶液提取第43-44页
     ·几丁质酶的纯化第44-47页
       ·Phenyl-Sepharose 6 Fast Flow 疏水层析第44-45页
       ·DEAE Sepharose Fast Flow 离子交换层析第45-46页
       ·Sephadex G-75 凝胶过滤层析第46-47页
     ·几丁质酶分子量第47-48页
     ·L03 菌株几丁质酶酶学性质第48-51页
       ·酶反应的最适温度和热稳定性第48-49页
       ·酶反应的最适pH 和对酸碱的稳定性第49-50页
       ·金属离子对酶活性的影响第50-51页
     ·几丁质酶对病原真菌细胞壁的降解作用第51-52页
   ·讨论第52-55页
第五章 L03 菌株产几丁质酶条件研究第55-61页
   ·实验材料与方法第55-56页
     ·发酵培养基第55页
     ·细菌生长量与几丁质酶活性的关系测定第55页
     ·最适碳源的测定第55页
     ·最适氮源的测定第55页
     ·产酶培养条件的优化试验第55-56页
   ·试验结果第56-58页
     ·细菌生长量与酶活性的关系第56-57页
     ·产酶最适碳源种类第57页
     ·产酶最适氮源种类第57-58页
     ·产酶培养条件的优化第58页
   ·讨论第58-61页
参考文献第61-70页
致谢第70-71页
附表第71-73页

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