| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-35页 |
| ·植物对环境盐分胁迫的渗透调节 | 第13-22页 |
| ·盐胁迫及植物的主要耐盐机制 | 第13-14页 |
| ·渗透调节机制 | 第14-15页 |
| ·有机溶质 | 第15-18页 |
| ·无机离子 | 第18-21页 |
| ·不同渗透物的相互作用 | 第21页 |
| ·提高植物耐盐能力的方法 | 第21-22页 |
| ·杜氏藻对盐分变化的渗透响应 | 第22-33页 |
| ·杜氏藻 | 第22-23页 |
| ·杜氏藻的耐盐渗透调节 | 第23-30页 |
| ·耐盐渗透信号传导机制 | 第30-31页 |
| ·杜氏盐藻耐盐机制研究中分子生物学技术的应用 | 第31-33页 |
| ·本论文的研究内容、目的和意义 | 第33-35页 |
| 第二章 盐度变化对杜氏盐藻生长、细胞形态及甘油含量的影响 | 第35-52页 |
| ·前言 | 第35页 |
| ·材料与方法 | 第35-38页 |
| ·藻种 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35-36页 |
| ·生化试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·杜氏盐藻的梯度盐度培养 | 第36-37页 |
| ·低渗和高渗胁迫处理 | 第37页 |
| ·甘油含量的检测 | 第37-38页 |
| ·统计分析 | 第38页 |
| ·实验结果 | 第38-49页 |
| ·梯度盐度下杜氏盐藻的生长曲线 | 第38-40页 |
| ·细胞形态变化 | 第40-44页 |
| ·甘油含量的检测 | 第44-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 第三章 盐度变化对盐藻甘油合成途径中四种酶活性的影响及3-磷酸甘油脱氢酶同工酶电泳分析 | 第52-74页 |
| ·前言 | 第52页 |
| ·材料与方法 | 第52-58页 |
| ·生化试剂 | 第52页 |
| ·主要仪器 | 第52-53页 |
| ·杜氏盐藻的梯度盐度培养 | 第53页 |
| ·低渗和高渗盐胁迫处理 | 第53页 |
| ·粗酶液的提取 | 第53-54页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第54页 |
| ·NAD~+为辅酶的G3PDH 活性测定 | 第54-55页 |
| ·G3PP 活性测定 | 第55-56页 |
| ·DHAR 活性的测定 | 第56-57页 |
| ·DHAK 活性的测定 | 第57页 |
| ·G3PDH 的同工酶电泳分析 | 第57-58页 |
| ·统计分析 | 第58页 |
| ·实验结果 | 第58-71页 |
| ·G3PDH 活性的检测 | 第58-63页 |
| ·G3PP 活性的检测 | 第63-65页 |
| ·DHAR 活性的检测 | 第65-68页 |
| ·DHAK 活性的检测 | 第68-69页 |
| ·G3PDH 同工酶电泳 | 第69-71页 |
| ·讨论 | 第71-73页 |
| ·本章小结 | 第73-74页 |
| 第四章 盐度变化对杜氏盐藻中一种以 NAD~+为辅酶的3-磷酸甘油脱氢酶基因表达水平的影响 | 第74-112页 |
| ·前言 | 第74-75页 |
| ·材料与方法 | 第75-91页 |
| ·质粒、菌种及培养基 | 第75页 |
| ·生化试剂及试剂盒 | 第75页 |
| ·主要仪器 | 第75-76页 |
| ·杜氏盐藻的培养 | 第76页 |
| ·杜氏盐藻总RNA 的提取及检测 | 第76-78页 |
| ·RT-PCR | 第78页 |
| ·盐藻G3PDH 基因保守片段的扩增 | 第78-79页 |
| ·通过染色体步移PCR 获得盐藻G3PDH 基因的cDNA 序列 | 第79-81页 |
| ·DNA 片段的回收 | 第81-82页 |
| ·感受态细胞的制备、转化和筛选 | 第82-83页 |
| ·G3PDH 基因cDNA 及蛋白质的生物信息学分析 | 第83-84页 |
| ·G3PDH 基因ORF 扩增引物的设计及ORF 序列的扩增 | 第84页 |
| ·质粒的提取 | 第84-85页 |
| ·G3PDH 原核表达载体的构建及转化 | 第85-86页 |
| ·G3PDH 基因表达蛋白的SDS-PAGE 检测 | 第86-88页 |
| ·杜氏盐藻的梯度盐度培养 | 第88-89页 |
| ·低渗和高渗胁迫处理 | 第89页 |
| ·杜氏盐藻总RNA 的提取 | 第89-90页 |
| ·逆转录 | 第90页 |
| ·实时定量PCR | 第90-91页 |
| ·统计分析 | 第91页 |
| ·实验结果 | 第91-109页 |
| ·杜氏盐藻G3PDH 基因cDNA 的克隆 | 第91-94页 |
| ·杜氏盐藻G3PDH 基因cDNA 及蛋白质的生物信息学分析 | 第94-102页 |
| ·杜氏盐藻G3PDH 基因的酶切位点分析 | 第102-103页 |
| ·杜氏盐藻G3PDH ORF 的扩增 | 第103页 |
| ·原核表达载体pET-32a-G3PDH 的构建和转化 | 第103-105页 |
| ·SDS-PAGE 电泳检测G3PDH 重组蛋白表达 | 第105页 |
| ·杜氏盐藻G3PDH 基因的实时定量RT-PCR 结果 | 第105-109页 |
| ·讨论 | 第109-111页 |
| ·本章小结 | 第111-112页 |
| 第五章 杜氏盐藻中Ca~(2+)介导的渗透信号传导对胞内甘油水平和3-磷酸甘油脱氢酶活性的调节作用 | 第112-128页 |
| ·前言 | 第112-113页 |
| ·材料与方法 | 第113-116页 |
| ·生化试剂 | 第113页 |
| ·主要仪器 | 第113-114页 |
| ·杜氏盐藻的培养 | 第114页 |
| ·Ca~(2+)荧光指示剂探针孵育 | 第114页 |
| ·Ca~(2+)通道阻滞剂预处理 | 第114页 |
| ·渗透胁迫处理 | 第114页 |
| ·Ca~(2+)荧光扫描 | 第114-115页 |
| ·Ca~(2+)通道阻滞剂处理及渗透胁迫后细胞内甘油含量的检测 | 第115页 |
| ·Ca~(2+)通道阻滞剂处理及渗透胁迫后细胞内G3PDH 活性的测定 | 第115-116页 |
| ·统计分析 | 第116页 |
| ·实验结果 | 第116-125页 |
| ·Ca~(2+)浓度变化 | 第116-120页 |
| ·甘油含量变化 | 第120-121页 |
| ·G3PDH 活性变化 | 第121-125页 |
| ·讨论 | 第125-127页 |
| ·本章小结 | 第127-128页 |
| 结论与展望 | 第128-131页 |
| 参考文献 | 第131-145页 |
| 附录 | 第145-147页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第147-149页 |
| 致谢 | 第149-150页 |
| 附录 | 第150页 |
