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拟南芥CBL和CIPK参与冷胁迫信号通路的研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-12页
第一章 前言第12-33页
   ·植物耐受低温胁迫的研究进展第12-20页
     ·低温胁迫对植物的影响第12-15页
     ·植物抗冷/冻机理第15-20页
   ·低温胁迫下植物钙信号转导的分子机制研究现状第20-23页
     ·低温胁迫下钙信号的产生第20-21页
     ·植物细胞钙离子结合蛋白及钙信号通路在植物对低温胁迫的应答第21-23页
   ·CBL-CIPK第23-31页
     ·小分子钙离子结合蛋白CBL第23-26页
     ·CBL特异性相互作用蛋白激酶CIPK第26-28页
     ·CBL-CIPK复合体参与各种逆境胁迫的信号转导第28-31页
   ·立题依据第31-33页
第二章 材料与方法第33-40页
   ·实验材料第33-34页
     ·植物材料第33页
     ·微生物材料第33-34页
   ·实验方法第34-40页
     ·CIPK7和CBL1基因克隆第34页
     ·半定量RT-PCR第34-35页
     ·原核表达载体构建第35页
     ·融合蛋白的诱导表达与纯化第35-36页
     ·CIPK7、CBL1蛋白特异性多克隆抗体的制备与纯化第36页
     ·GST pull-down实验第36-37页
     ·亲合层析纯化第37页
     ·cbl1纯合突变体的鉴定第37页
     ·电解质渗漏率测定第37页
     ·脯氨酸含量测定第37-38页
     ·Real-time荧光定量PCR分析第38页
     ·Western blot免疫印迹分析第38-39页
     ·可溶性糖含量测定第39-40页
第三章 实验结男第40-60页
   ·低温胁迫诱导拟南芥CIPK7基因的表达第40-42页
     ·CIPK7基因的克隆第40页
     ·CIPK7基因的组织特异性分布第40-41页
     ·低温诱导CIPK7基因的表达第41-42页
   ·CIPK7和CBL1融合蛋白的原核表达纯化与抗体制备第42-47页
     ·GST-CBL1、GST-CIPK7和CBL1-His原核表达载体构建第42-44页
     ·GST-CBL1、GST-CIPK7和CBL1-His融合蛋白的诱导表达与纯化第44-47页
     ·CBL1和CIPK7蛋白多克隆抗体的制备和效价检测第47页
   ·CIPK7与CBL1蛋白的相互作用第47-49页
     ·CIPK7与CBL1蛋白的体外相互作用第47-48页
     ·CIPK7与CBL1蛋白的半体内相互作用第48-49页
   ·CBL1参与冷胁迫信号通路的调控第49-55页
     ·CBL1基因受冷胁迫诱导表达第50页
     ·cbl1纯合突变体的鉴定第50-51页
     ·cbl1突变体对冷胁迫更敏感第51-54页
     ·cbl1突变体中冷胁迫响应基因表达模式改变第54-55页
   ·CIPK7参与冷胁迫信号通路第55-60页
     ·CIPK7基因在野生型和cbl1突变体中受冷胁迫的诱导表达第55-56页
     ·CIPK7蛋白在野生型和cbl1突变体中受冷胁迫的诱导表达第56-58页
     ·可溶性总糖含量测定第58-60页
第四章 讨论第60-65页
第五章 结论第65-66页
参考文献第66-78页
在读期间发表论文情况第78-79页
致谢第79页

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