中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-12页 |
第一章 前言 | 第12-33页 |
·植物耐受低温胁迫的研究进展 | 第12-20页 |
·低温胁迫对植物的影响 | 第12-15页 |
·植物抗冷/冻机理 | 第15-20页 |
·低温胁迫下植物钙信号转导的分子机制研究现状 | 第20-23页 |
·低温胁迫下钙信号的产生 | 第20-21页 |
·植物细胞钙离子结合蛋白及钙信号通路在植物对低温胁迫的应答 | 第21-23页 |
·CBL-CIPK | 第23-31页 |
·小分子钙离子结合蛋白CBL | 第23-26页 |
·CBL特异性相互作用蛋白激酶CIPK | 第26-28页 |
·CBL-CIPK复合体参与各种逆境胁迫的信号转导 | 第28-31页 |
·立题依据 | 第31-33页 |
第二章 材料与方法 | 第33-40页 |
·实验材料 | 第33-34页 |
·植物材料 | 第33页 |
·微生物材料 | 第33-34页 |
·实验方法 | 第34-40页 |
·CIPK7和CBL1基因克隆 | 第34页 |
·半定量RT-PCR | 第34-35页 |
·原核表达载体构建 | 第35页 |
·融合蛋白的诱导表达与纯化 | 第35-36页 |
·CIPK7、CBL1蛋白特异性多克隆抗体的制备与纯化 | 第36页 |
·GST pull-down实验 | 第36-37页 |
·亲合层析纯化 | 第37页 |
·cbl1纯合突变体的鉴定 | 第37页 |
·电解质渗漏率测定 | 第37页 |
·脯氨酸含量测定 | 第37-38页 |
·Real-time荧光定量PCR分析 | 第38页 |
·Western blot免疫印迹分析 | 第38-39页 |
·可溶性糖含量测定 | 第39-40页 |
第三章 实验结男 | 第40-60页 |
·低温胁迫诱导拟南芥CIPK7基因的表达 | 第40-42页 |
·CIPK7基因的克隆 | 第40页 |
·CIPK7基因的组织特异性分布 | 第40-41页 |
·低温诱导CIPK7基因的表达 | 第41-42页 |
·CIPK7和CBL1融合蛋白的原核表达纯化与抗体制备 | 第42-47页 |
·GST-CBL1、GST-CIPK7和CBL1-His原核表达载体构建 | 第42-44页 |
·GST-CBL1、GST-CIPK7和CBL1-His融合蛋白的诱导表达与纯化 | 第44-47页 |
·CBL1和CIPK7蛋白多克隆抗体的制备和效价检测 | 第47页 |
·CIPK7与CBL1蛋白的相互作用 | 第47-49页 |
·CIPK7与CBL1蛋白的体外相互作用 | 第47-48页 |
·CIPK7与CBL1蛋白的半体内相互作用 | 第48-49页 |
·CBL1参与冷胁迫信号通路的调控 | 第49-55页 |
·CBL1基因受冷胁迫诱导表达 | 第50页 |
·cbl1纯合突变体的鉴定 | 第50-51页 |
·cbl1突变体对冷胁迫更敏感 | 第51-54页 |
·cbl1突变体中冷胁迫响应基因表达模式改变 | 第54-55页 |
·CIPK7参与冷胁迫信号通路 | 第55-60页 |
·CIPK7基因在野生型和cbl1突变体中受冷胁迫的诱导表达 | 第55-56页 |
·CIPK7蛋白在野生型和cbl1突变体中受冷胁迫的诱导表达 | 第56-58页 |
·可溶性总糖含量测定 | 第58-60页 |
第四章 讨论 | 第60-65页 |
第五章 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-78页 |
在读期间发表论文情况 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |