| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第1章 前言 | 第13-39页 |
| ·引言 | 第13-15页 |
| ·左右不对称模式建成的过程和分子机制 | 第15-25页 |
| ·左右不对称模式建成的过程和相关模型 | 第15-22页 |
| ·影响左右不对称模式建成的分子信号途径 | 第22-25页 |
| ·斑马鱼中左右器官左右模式的建成 | 第25-31页 |
| ·左右对称信号的打破 | 第25-26页 |
| ·信号从KV到侧板中胚层的传递 | 第26-28页 |
| ·器官的左右定位 | 第28页 |
| ·肠道旋转中侧板中胚层的不对称内卷 | 第28-29页 |
| ·心肌细胞迁移和心管的旋转 | 第29-31页 |
| ·RA的生物学功能及在左右不对称模式建成中的作用 | 第31-34页 |
| ·RA的基本知识介绍 | 第31-32页 |
| ·RA的生物学功能 | 第32页 |
| ·RA在左右不对称模式建成中的作用 | 第32-34页 |
| ·Geminin在细胞周期和胚胎发育中的作用 | 第34-36页 |
| ·Geminin在细胞周期中的作用 | 第34-35页 |
| ·Geminin在胚胎发育中的作用 | 第35-36页 |
| ·结束语和本课题开展的意义 | 第36-39页 |
| 第2章 材料和方法 | 第39-53页 |
| ·实验动物及饲养 | 第39页 |
| ·试剂、耗材和仪器 | 第39页 |
| ·培养基和主要试剂的配制 | 第39-41页 |
| ·LB培养基的配制 | 第39-40页 |
| ·各种缓冲液的配制 | 第40-41页 |
| ·质粒和菌株 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-51页 |
| ·斑马鱼总RNA的提取 | 第42页 |
| ·反转录制备cDNA | 第42页 |
| ·电感受态细胞的制备 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·反义探针的制备 | 第44-45页 |
| ·正义mRNA的合成与纯化 | 第45页 |
| ·全胚胎原位杂交(Whole mount in situ hybridization) | 第45-47页 |
| ·整胚抗体显色反应(Whole mount antibody staining) | 第47页 |
| ·细胞凋亡实验(TUNEL experiment) | 第47页 |
| ·Western Blot | 第47-48页 |
| ·荧光定量PCR | 第48-49页 |
| ·mRNA和MO胚胎注射 | 第49-50页 |
| ·KV特异性基因敲降胚胎注射 | 第50页 |
| ·KV中荧光磁珠的注射与运动跟踪 | 第50页 |
| ·药物处理 | 第50页 |
| ·胚胎热激实验 | 第50-51页 |
| ·组织切片利DAPI染色 | 第51页 |
| ·实验数据统计及分析 | 第51-53页 |
| 第3章 RA信号途径在器官左右不对称模式建成中的时空调节性作用研究 | 第53-83页 |
| ·引言 | 第53-54页 |
| ·实验结果 | 第54-76页 |
| ·RA信号阻断剂在不同时期对消化器官和心脏不对称性的影响 | 第54-59页 |
| ·在2体节前侧板中胚层左侧Nodal信号介导RA信号调控了消化器官左右不对称模式建成 | 第59-65页 |
| ·KV和KV中纤毛的功能介导了RA对Nodal信号的调控 | 第65-67页 |
| ·Fgf8信号部分介导了RA对KV中cha的调控以控制侧板中胚层中nodal信号的表达 | 第67-69页 |
| ·在2体节后RA信号通过影响bmp4在心脏区域不对称分布来调控心脏左右模式的建成 | 第69-76页 |
| ·讨论 | 第76-82页 |
| ·RA在2体节前后分别调控了消化道器官和心脏左右模式的建成 | 第76页 |
| ·RA特异的调控了器官左右模式的建成 | 第76-77页 |
| ·DEAB和BMS453以不同的机制抑制RA信号途径 | 第77-79页 |
| ·心脏前体细胞的发生和迁移可能参与到了心脏左右模式建成过程中 | 第79页 |
| ·BMP4、FGF8和RA在调控纤毛发生过程中的关系 | 第79-80页 |
| ·RA在调控器官左右模式建成中的时空调控关系 | 第80-82页 |
| ·结论 | 第82-83页 |
| 第4章 细胞周期因子Geminin在斑马鱼左右不对称模式建成中作用机制的研究 | 第83-101页 |
| ·引言 | 第83-85页 |
| ·实验结果 | 第85-97页 |
| ·参与了心脏和消化器官左右不对称模式建成的调控 | 第85-88页 |
| ·Geminin特异性的参与了左右不对称模式发生的调控 | 第88-89页 |
| ·Geminin功能缺失后Nodal和不对称基因表达受到了影响 | 第89-91页 |
| ·Geminin不参与在左右不对称模式建成过程中Middle line的调控 | 第91页 |
| ·Geminin功能缺失影响KV和纤毛的形成和功能 | 第91-93页 |
| ·Geminin细胞自主性的调控KV和纤毛的功能以调控器官左右不对称模式的建立 | 第93-94页 |
| ·在左右模式建成中Geminin和Fgf8信号途径共同调控KV和纤毛的功能 | 第94-97页 |
| ·讨论 | 第97-99页 |
| ·结论 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-119页 |
| 附录 | 第119-127页 |
| 致谢 | 第127-129页 |
| 博士在读期间发表论文及科研工作 | 第129页 |
