| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-22页 |
| 1 课题的提出 | 第11-12页 |
| 2 柑橘遗传转化研究进展 | 第12-15页 |
| ·柑橘遗传转化的种类 | 第12页 |
| ·柑橘遗传转化方法 | 第12-15页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化机理 | 第12-13页 |
| ·影响根癌农杆菌介导的遗传转化率的影响因子 | 第13-15页 |
| 3 利用基因工程进行柑橘无核育种 | 第15-20页 |
| ·柑橘无核机理概述 | 第15页 |
| ·传统的柑橘无核育种方法 | 第15页 |
| ·利用基因工程创造无核柑橘 | 第15-20页 |
| ·雄性不育基因工程的研究进展 | 第16-17页 |
| ·单性结实基因工程的研究进展 | 第17-19页 |
| ·通过诱导雄性不育与单性结实共同作用形成无核果实 | 第19-20页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 材料和方法 | 第22-32页 |
| 1 实验材料 | 第22-24页 |
| ·供试植物材料 | 第22页 |
| ·供试农杆菌菌株和质粒 | 第22-23页 |
| ·主要生化试剂 | 第23-24页 |
| 2 培养条件及培养基配方 | 第24-25页 |
| 3 外植体材料的准备 | 第25页 |
| 4 根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第25-32页 |
| ·根癌农杆菌的准备 | 第25-27页 |
| ·质粒DNA的抽提 | 第25-27页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·农杆菌菌液的制备 | 第27页 |
| ·卡那霉素和头孢霉素的敏感性实验 | 第27页 |
| ·侵染与共培养 | 第27-28页 |
| ·筛选培养 | 第28页 |
| ·再生与移栽 | 第28页 |
| ·柑橘基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·转化材料的PCR鉴定 | 第29-31页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·反应体系 | 第30-31页 |
| ·扩增程序 | 第31页 |
| ·GUS染色-组织化学分析 | 第31-32页 |
| 结果与分析 | 第32-43页 |
| 1 农杆菌DH5α菌株增殖曲线的测定及摇菌时间的确定 | 第32页 |
| 2 转化受体材料对卡那霉素的敏感性试验 | 第32-33页 |
| 3 上胚轴切段对头孢霉素的敏感性实验 | 第33页 |
| 4 柑橘不同外植体的再生 | 第33-40页 |
| ·早实枳实生苗茎段转化 | 第33-39页 |
| ·早实枳实生苗茎段的转化率分析 | 第34页 |
| ·早实枳实生苗茎段再生体系的筛选 | 第34-35页 |
| ·早实枳的转化再生 | 第35-36页 |
| ·椪柑实生苗上胚轴切段转化 | 第36-37页 |
| ·椪柑上胚轴切段再生体系的筛选 | 第37页 |
| ·椪柑的转化再生 | 第37-38页 |
| ·其它柑橘基因型上胚轴切段的遗传转化 | 第38-39页 |
| ·愈伤组织的遗传转化 | 第39-40页 |
| 5 抗性植株及愈伤组织的分子鉴定 | 第40-43页 |
| ·再生植株的PCR鉴定 | 第40-42页 |
| ·抗性愈伤组织的分子检测 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-47页 |
| 1 不同类型外植体的遗传转化效率 | 第43-45页 |
| ·实生苗为外植体的遗传转化 | 第43-44页 |
| ·愈伤组织的遗传转化 | 第44-45页 |
| 2 提高农杆菌介导的遗传转化率的方法 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-56页 |
| 致谢 | 第56页 |