| 中文摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-18页 |
| 符号说明 | 第18-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-37页 |
| 1. 概述 | 第19-20页 |
| 2 外部形态结构与渗透胁迫响应 | 第20-21页 |
| 3 渗透胁迫与生理生化代谢 | 第21-30页 |
| ·渗透调节物质与渗透胁迫 | 第21页 |
| ·光合作用与渗透胁迫 | 第21-22页 |
| ·活性氧代谢与渗透胁迫 | 第22-26页 |
| ·细胞内活性氧的产生途径 | 第22-23页 |
| ·细胞内活性氧的清除系统 | 第23-25页 |
| ·细胞的氧化还原平衡 | 第25-26页 |
| ·渗透胁迫与辅酶NAD(H)和NADP(H) | 第26-30页 |
| ·NAD(H)和NADP(H)与细胞物质代谢和能量代谢 | 第26页 |
| ·胁迫条件下依赖于NAD~+的蛋白核糖基化修饰以及植物中的PARP研究进展 | 第26-28页 |
| ·NAD的拯救合成途径—NAD-recycling | 第28-29页 |
| ·NAD(H)和NADP(H)与植物激素ABA的关系 | 第29-30页 |
| ·细胞氧化损伤的检测 | 第30页 |
| 4 植物遭受非生物胁迫的信号传导—ROS信号传导 | 第30-34页 |
| ·ROS信号的接受 | 第31页 |
| ·ROS与MAPK信号传导途径 | 第31-32页 |
| ·ROS与ABA介导的信号途径 | 第32-33页 |
| ·氧化胁迫响应基因研究进展 | 第33-34页 |
| 5 培育抗非生物胁迫新种质的方法 | 第34-35页 |
| 6 本研究的目的意义及主要内容 | 第35-37页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第35页 |
| ·本论文的主要研究内容 | 第35-37页 |
| 第二章 山融3号抗渗透胁迫相关生物学性状初步调查 | 第37-44页 |
| 前言 | 第37页 |
| 1 材料 | 第37页 |
| 2 方法 | 第37-38页 |
| ·幼苗经历长期控水后的存活率测定 | 第37页 |
| ·渗透胁迫条件下种子萌发期胚芽鞘及主根的长度测定 | 第37-38页 |
| ·苗期在长期渗透胁迫条件下根系的测定 | 第38页 |
| ·离体叶片失水率测定 | 第38页 |
| ·数据处理、作图及统计学分析 | 第38页 |
| 3. 结果与分析 | 第38-43页 |
| ·长期控水对山融3号和济南177幼苗存活率的影响 | 第38-39页 |
| ·PEG胁迫对种子萌发期胚芽鞘及主根伸长的影响 | 第39-40页 |
| ·苗期长期渗透胁迫对山融3号和济南177三叶一心期幼苗根系生长的影响 | 第40-42页 |
| ·山融3号和济南177离体叶片失水率的区别 | 第42-43页 |
| 4 结论 | 第43-44页 |
| 第三章 山融3号抗渗透胁迫相关生理指标测定 | 第44-67页 |
| 前言 | 第44-45页 |
| 1 材料 | 第45页 |
| 2 方法 | 第45-50页 |
| ·脯氨酸提取及含量测定 | 第45-46页 |
| ·可溶性糖的提取及含量测定 | 第46页 |
| ·叶片相对含水量及叶片汁液渗透势的测定 | 第46-47页 |
| ·丙二醛的提取及测定 | 第47页 |
| ·氧自由基及各种酶粗提液的制备 | 第47页 |
| ·氧自由基含量的测定 | 第47-48页 |
| ·抗氧化酶活性测定 | 第48页 |
| ·抗坏血酸和谷胱甘肽含量的测定 | 第48-49页 |
| ·生理指标净积累的计算 | 第49页 |
| ·田间生长麦苗旗叶叶绿素荧光参数测定 | 第49-50页 |
| ·数据处理 | 第50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-63页 |
| ·最适PEG处理浓度的确定 | 第50-53页 |
| ·不同浓度PEG胁迫处理后脯氨酸含量的变化 | 第50-51页 |
| ·不同浓度PEG胁迫处理后POD活性的变化 | 第51-53页 |
| ·脯氨酸、可溶性糖的积累 | 第53页 |
| ·渗透胁迫条件下叶片相对含水量和渗透势 | 第53-55页 |
| ·氧自由基含量 | 第55-56页 |
| ·丙二醛含量 | 第56-57页 |
| ·抗氧化酶SOD、POD及APX活性 | 第57-59页 |
| ·非酶促抗氧化剂——抗坏血酸和谷胱甘肽的含量 | 第59-61页 |
| ·灌浆期干旱处理对旗叶叶绿素荧光参数的影响 | 第61-63页 |
| ·最大光化学效率Fv/Fm | 第61页 |
| ·相对电子传递速率(ETR)的光响应动力学曲线 | 第61-62页 |
| ·光系统Ⅱ实际光化学效率(Yield)和非光化学淬灭系数(qN)的光诱导动力学曲线 | 第62-63页 |
| 4 结论和讨论 | 第63-67页 |
| ·山融3号比济南177更能耐受较高浓度PEG的渗透胁迫 | 第63-64页 |
| ·山融3号渗透调节能力高于济南177 | 第64页 |
| ·山融3号具有较强的抗氧化酶活力 | 第64-65页 |
| ·由叶绿素荧光参数反应出山融3号具有较强的光合能力 | 第65-67页 |
| 第四章 山融3号和济南177幼苗在PEG胁迫处理下根和叶基因表达谱分析 | 第67-104页 |
| 前言 | 第67-68页 |
| 1 材料 | 第68页 |
| 2 方法 | 第68-78页 |
| ·Trizol法提取总RNA及RNA的完整性检测 | 第68-69页 |
| ·用于芯片分析的对照及处理根和叶RNA的纯化 | 第69页 |
| ·cDNA的合成与纯化 | 第69-72页 |
| ·cRNA的合成和纯化 | 第72-74页 |
| ·cRNA的片段化及杂交液的配制 | 第74-75页 |
| ·芯片杂交、洗脱、染色及扫描 | 第75页 |
| ·芯片杂交的数据分析 | 第75-78页 |
| ·芯片相关探针信息分析 | 第75-76页 |
| ·芯片检测结果初步比对 | 第76页 |
| ·差异表达探针的筛选及功能注释 | 第76页 |
| ·部分差异表达基因的RT-PCR验证 | 第76-78页 |
| 3 结果与分析 | 第78-102页 |
| ·RNA纯度、质量及完整性 | 第78-79页 |
| ·芯片杂交结果初步分析 | 第79-81页 |
| ·芯片的均一化处理 | 第81-82页 |
| ·山融3号和济南177渗透胁迫前后差异表达探针分析 | 第82-89页 |
| ·对照条件下根叶差异表达探针分析 | 第82-86页 |
| ·PEG介导的渗透胁迫处理对根叶差异表达探针的影响 | 第86-88页 |
| ·PEG胁迫条件下差异表达探针在山融3号中对渗透胁迫的响应分析 | 第88-89页 |
| ·山融3号和济南177渗透胁迫前后部分功能注释的探针分析 | 第89-99页 |
| ·部分差异表达探针的RT-PCR验证 | 第99-102页 |
| 4 结论与讨论 | 第102-104页 |
| 第五章 山融3号渗透胁迫响应基因TaCEO1的等位变异 | 第104-132页 |
| 1 材料 | 第104页 |
| 2 方法 | 第104-114页 |
| ·总RNA提取及逆转录成cDNA | 第104页 |
| ·山融3号TaCEO1全长的克隆 | 第104-111页 |
| ·山融3号TaCEO1 EST片段的扩增及序列测定 | 第104-108页 |
| ·山融3号TaCEO1全长mRNA的扩增 | 第108-111页 |
| ·山融3号、济南177及长穗偃麦草TaCEO1基因组序列的克隆 | 第111-113页 |
| ·利用缺体四体系对TaCEO1的染色体定位 | 第113-114页 |
| 3 结果与分析 | 第114-129页 |
| ·TaCEO1对应探针Ta.23268的芯片检测结果 | 第114-115页 |
| ·山融3号TaCEO1全长mRNA的特点 | 第115-119页 |
| ·山融3号TaCEO1的来源分析 | 第119-121页 |
| ·TaCEO1的基因结构及编码产物功能域预测 | 第121-127页 |
| ·hTaCEO1与植物中已知同源基因的聚类分析 | 第127-128页 |
| ·TaCEO1的染色体定位 | 第128-129页 |
| 4 讨论 | 第129-132页 |
| ·山融3号中TaCEO1的等位基因在体细胞融合过程中发生了广泛的变异 | 第129-130页 |
| ·小麦TaCEO1-1定位于4A染色体上 | 第130页 |
| ·hTaCEO1的功能与济南177中有所不同 | 第130-132页 |
| 第六章 hTaCEO1的功能鉴定 | 第132-179页 |
| 1 材料 | 第132-133页 |
| 2 方法 | 第133-155页 |
| ·TaCEO1的半定量RT-PCR检测 | 第133-134页 |
| ·hTaCEO1的原核表达分析 | 第134-138页 |
| ·hTaCEO1原核表达载体的构建 | 第134-136页 |
| ·hTaCEO1在大肠杆菌中的表达 | 第136-138页 |
| ·hTaCEO1的酵母突变体互补试验 | 第138-142页 |
| ·酵母表达载体构建 | 第138-140页 |
| ·酵母突变体转化互补试验 | 第140-142页 |
| ·hTaCEO1在模式植物拟南芥中的功能鉴定 | 第142-153页 |
| ·CaMV35S启动子植物表达载体的构建 | 第142-145页 |
| ·拟南芥野生型的转化 | 第145-150页 |
| ·hTaCEO1-1在拟南芥中的功能鉴定 | 第150-153页 |
| ·hTaCEO1-1转化小麦 | 第153-155页 |
| ·含Ubiquitin启动子的植物表达载体的构建 | 第153页 |
| ·小麦的转化 | 第153-155页 |
| 3 结果与分析 | 第155-173页 |
| ·不同胁迫条件下TaCEO1的表达模式 | 第155页 |
| ·hTaCEO1-1和hTaCEO1-2的原核表达 | 第155-157页 |
| ·hTaCEO1-1和hTaCEO1-2对酵母突变体yap~(-1)的作用 | 第157-158页 |
| ·hTaCEO1-1转基因拟南芥的获得 | 第158-160页 |
| ·hTaCEO1-1对转基因拟南芥种子萌发的影响 | 第160-161页 |
| ·hTaCEO1-1对转基因拟南芥植株生长的影响 | 第161-163页 |
| ·TaCEO1-1对转基因拟南芥ROS的影响 | 第163-164页 |
| ·TaCEO1-1对转基因拟南芥细胞内辅酶Ⅰ和辅酶Ⅱ的影响 | 第164-165页 |
| ·外源施加过氧化氢对转基因拟南芥的影响 | 第165-168页 |
| ·转基因拟南芥逆境胁迫相关基因的表达 | 第168-170页 |
| ·各种非生物胁对转基因拟南芥的影响 | 第170-171页 |
| ·蔗糖浓度对转基因拟南芥生长的影响 | 第171-172页 |
| ·hTaCEO1-1转基因小麦的获得 | 第172-173页 |
| 4 讨论 | 第173-179页 |
| ·酵母突变体互补试验证明hTaCEO1-1比hTaCEO1-2具有较强的抗氧化能力 | 第174页 |
| ·hTaCEO1-1改变了转基因拟南芥细胞的氧化还原状态、促进了转基因植株的生长 | 第174-176页 |
| ·hTaCEO1-1激活了ROS途径、促进了转基因拟南芥对过氧化氢及其它非生物胁迫的抗性 | 第176-177页 |
| ·hTaCEO1-1在增强体细胞杂种山融3号对各种非生物胁的迫抗性中可能发挥了重要作用 | 第177-178页 |
| ·来自单子叶植物的hTaCEO1-1与双子叶模式植物拟南芥中的同源蛋白CEO1(RCD1)功能有所不同 | 第178-179页 |
| 总结 | 第179-181页 |
| 参考文献 | 第181-194页 |
| 致谢 | 第194-196页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第196页 |
