简单节杆菌生物催化倍他米松中间体C1,2位脱氢的研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-21页 |
| ·甾体化合物的结构与临床应用 | 第8-9页 |
| ·甾体化合物的微生物转化 | 第9-14页 |
| ·甾体微生物转化的发现和发展 | 第10页 |
| ·甾体微生物转化的特点 | 第10页 |
| ·甾体化合物微生物转化反应类型 | 第10-12页 |
| ·甾体微生物转化影响因素的研究 | 第12-14页 |
| ·用于甾体化合物C_(1,2)位脱氢的微生物 | 第14-15页 |
| ·甾体化合物C_(1,2)位脱氢的机理 | 第15-16页 |
| ·甾体化合物C_(1,2)位脱氢的酶学性质 | 第16-17页 |
| ·本论文的立项背景及内容 | 第17-21页 |
| ·倍他米松的用途 | 第18页 |
| ·倍他米松生产的研究进展 | 第18-19页 |
| ·甾体化合物C_(1,2)位微生物脱氢的研究进展 | 第19-20页 |
| ·本论文的研究内容 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-28页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·实验仪器 | 第21-22页 |
| ·实验菌种 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·发酵及转化条件 | 第23页 |
| ·底物β-米松环氧物投料方法 | 第23页 |
| ·固体粉末直接投料 | 第23页 |
| ·有机溶剂悬浮投料 | 第23页 |
| ·水溶液悬浮投料 | 第23页 |
| ·生物量的测定 | 第23-24页 |
| ·比浊法 | 第23页 |
| ·细胞干重的测定 | 第23-24页 |
| ·发酵液浊度与细胞干重的关系 | 第24页 |
| ·C_(1,2)位脱氢酶活力的测定 | 第24-25页 |
| ·2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)显色法 | 第24页 |
| ·底物转化法 | 第24-25页 |
| ·β-米松环氧物转化率的测定 | 第25-26页 |
| ·薄层层析法(TLC) | 第25-26页 |
| ·高效液相色谱法(HPLC) | 第26页 |
| ·7L发酵罐发酵工艺 | 第26-28页 |
| ·种子的制备 | 第26页 |
| ·发酵 | 第26-28页 |
| 3 结果与讨论 | 第28-55页 |
| ·优良菌株的筛选 | 第28-30页 |
| ·保藏菌株的β-米松环氧物脱氢性能研究 | 第28页 |
| ·菌株的分离与纯化 | 第28-29页 |
| ·菌株TCCC 11037-50的形态特征 | 第29-30页 |
| ·适宜斜面培养时间的确定 | 第30页 |
| ·摇瓶发酵条件优化 | 第30-43页 |
| ·发酵培养基组成成分单因素试验 | 第30-35页 |
| ·摇瓶发酵条件的单因素优化 | 第35-38页 |
| ·响应面试验设计优化发酵条件 | 第38-43页 |
| ·间歇培养过程中简单节杆菌生长及酶活曲线 | 第43-44页 |
| ·摇瓶转化条件的研究 | 第44-52页 |
| ·摇床转速对β-米松环氧物转化的影响 | 第44-45页 |
| ·底物加入方式的选择 | 第45-50页 |
| ·分批投料对转化率的影响 | 第50-51页 |
| ·两次投料的研究 | 第51页 |
| ·底物预诱导对细胞生长的影响 | 第51-52页 |
| ·底物预诱导对倍他米松环氧物脱氢产物产量的影响 | 第52页 |
| ·脱氢反应的7L发酵罐实验研究 | 第52-55页 |
| 4 结论 | 第55-56页 |
| 5 展望 | 第56-57页 |
| 6 参考文献 | 第57-61页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第61-62页 |
| 8 致谢 | 第62页 |
