| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩写词表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| ·托品烷生物碱概述 | 第11-12页 |
| ·托品烷生物碱的合成方式 | 第12-13页 |
| ·托品烷生物碱的代谢途径 | 第13-16页 |
| ·腐胺N－甲基转移酶（PMT） | 第13-15页 |
| ·莨菪碱6β－羟化酶（H6H） | 第15页 |
| ·托品酮还原酶I（TRI）和托品酮还原酶II （TRII） | 第15-16页 |
| ·托品烷生物碱代谢工程策略 | 第16-19页 |
| ·单基因转化策略 | 第17-18页 |
| ·双基因转化策略 | 第18页 |
| ·转录调控因子策略 | 第18-19页 |
| ·反义RNA 策略 | 第19页 |
| ·转运子策略 | 第19页 |
| ·三分三植物性状及其药用成分鉴定 | 第19-21页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-39页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·三分三托品烷生物碱合成关键酶基因的克隆 | 第24-30页 |
| ·三分三无菌苗的获得 | 第24页 |
| ·三分三总RNA 的提取与检测 | 第24-25页 |
| ·检测RNA 的质量与纯度 | 第25-26页 |
| ·三分三AatrI、AatrII cDNA 的克隆 | 第26-30页 |
| ·三分三AATRI、AATRII 的组织表达谱分析 | 第30-31页 |
| ·三分三AATRI、AATRII 在甲基茉莉酸诱导下的表达 | 第31页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第31-33页 |
| ·三分三毛状根诱导条件的优化 | 第33-35页 |
| ·C58C1 介导AATRI、AATRI&AAH6H 遗传转化三分三 | 第35-36页 |
| ·三分三转基因毛状根PCR 检测 | 第36-38页 |
| ·三分三毛状根中托品烷生物碱含量的测定 | 第38-39页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第39-63页 |
| ·总RNA 的提取 | 第39页 |
| ·三分三托品酮还原酶I 和II CDNA(AATRI、AATRII)的克隆及序列分析 | 第39-45页 |
| ·AatrI 的克隆 | 第39-40页 |
| ·AatrII 的克隆 | 第40-43页 |
| ·AaTRI 和AaTRII 序列的生物信息学分析 | 第43-45页 |
| ·AATRI、AATRII 分子进化树 | 第45-46页 |
| ·AATRI、AATRII 组织表达谱分析 | 第46-47页 |
| ·AATRI 和AATRII 甲基茉莉酸诱导下的表达模式 | 第47-48页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第48-50页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1304~+ + AatrI 的构建 | 第48-49页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1304~++ AatrI+Aah6h 的构建 | 第49-50页 |
| ·三分三毛状根诱导条件的优化 | 第50-52页 |
| ·毛状根的诱导 | 第50页 |
| ·毛状根的液体培养 | 第50-52页 |
| ·C58C1 介导AATRI、AATRI&AAH6H遗传转化三分三 | 第52-55页 |
| ·单基因AatrI 的转化 | 第52-53页 |
| ·双基因AatrI&Aah6h 的转化 | 第53-55页 |
| ·三分三毛状根中托品烷生物碱含量的测定 | 第55-63页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)方法的建立 | 第55-57页 |
| ·单转AatrI 的三分三毛状根托品烷生物碱含量测定 | 第57-58页 |
| ·双转AatrI & Aah6h 的三分三毛状根托品烷生物碱含量测定 | 第58-63页 |
| 第四章 总结与展望 | 第63-65页 |
| ·研究结论 | 第63页 |
| ·后续研究方向 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 硕士期间发表的论文及成果 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
