| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-22页 |
| ·关于PML-NBS | 第9-15页 |
| ·概念 | 第9-11页 |
| ·研究进展 | 第11-15页 |
| ·蛋白质(类)泛素化 | 第15-21页 |
| ·蛋白质(类)泛素化的研究进展 | 第15-16页 |
| ·小泛素类似修饰物SUMO | 第16-17页 |
| ·SUMO 化修饰 | 第17-18页 |
| ·SUMO 化的生物学功能 | 第18-21页 |
| ·本研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-37页 |
| ·材料 | 第22-26页 |
| ·实验材料及试剂 | 第22页 |
| ·试验试剂 | 第22-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·试验方法 | 第27-37页 |
| ·技术路线 | 第27页 |
| ·引物的设计及合成 | 第27-28页 |
| ·人PMLⅢ基因原核表达载体的构建 | 第28页 |
| ·用DNA 胶回收试剂盒法从凝胶中回收PCR 产物 | 第28-29页 |
| ·酶切质粒pGEX-4T-1-PML-Ⅲ的PCR 回收产物 | 第29页 |
| ·酶切载体质粒pGEX-4T-1 (+) | 第29页 |
| ·用DNA 快速纯化回收试剂盒从溶液中回收酶切产物 | 第29页 |
| ·酶切后PCR 产物与pGEX-4T-1 (+)载体连接 | 第29-30页 |
| ·Inoue 法制备超级感受态细胞（DH5α） | 第30页 |
| ·转化 | 第30-37页 |
| 第三章 结果 | 第37-47页 |
| ·人PMLⅢ基因N 端1-6008P 片段的扩增 | 第37页 |
| ·人PMLⅢ基因原核表达载体PGEX-4T-1(+)-PMLⅢ的构建和鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组质粒PGEX-4T-1(+)-PMLⅢ在大肠杆菌中的表达及纯化 | 第38-39页 |
| ·融合蛋白GST-PML 的纯化及融合蛋白酶切鉴定 | 第39-41页 |
| ·兔抗人PML 多克隆抗体鉴定 | 第41-42页 |
| ·ELISA 检测 | 第41页 |
| ·Western blot 检测 | 第41-42页 |
| ·人PML-Ⅲ基因真核表达载体PCMV-MYC/HA- PML-Ⅲ的构建和鉴定 | 第42-44页 |
| ·PMLⅢ蛋白在亚细胞结构的定位分布 | 第44-45页 |
| ·PMLⅢ蛋白和SUMO 蛋白在细胞内共定位的研究 | 第45-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-49页 |
| ·PMLⅢ基因扩增片段和载体的选择 | 第47页 |
| ·原核表达系统的选择 | 第47页 |
| ·兔抗人PMLⅢ多克隆抗体的制备 | 第47-48页 |
| ·多克隆抗体的鉴定 | 第48页 |
| ·SUMO-1 对PML 的修饰 | 第48-49页 |
| 第五章 总结及展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附录 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
