| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-12页 |
| 1 引言 | 第12-22页 |
| ·马流感概述 | 第12页 |
| ·EIV 的结构与理化特性 | 第12-14页 |
| ·病毒的形态结构 | 第12-13页 |
| ·病毒的基因组结构 | 第13-14页 |
| ·病毒的理化特性 | 第14页 |
| ·EIV 生物学特性 | 第14页 |
| ·血凝特性 | 第14页 |
| ·抗原性 | 第14页 |
| ·EIV 基因编码蛋白的结构和功能 | 第14-20页 |
| ·血凝素蛋白(Hemagglutinin,HA) | 第16页 |
| ·神经氨酸酶蛋白(Neuraminidase, NA) | 第16-17页 |
| ·聚合酶蛋白(Polymerase) | 第17页 |
| ·核蛋白(Nucleoprotein,NP) | 第17-18页 |
| ·基质蛋白（Matrix,M） | 第18-19页 |
| ·非结构蛋白(Nonstructural protein,NS ) | 第19-20页 |
| ·EIV 的复制 | 第20-21页 |
| ·病毒粒子的侵入与脱壳 | 第20页 |
| ·转录 | 第20页 |
| ·病毒基因组的复制 | 第20-21页 |
| ·病毒基因表达的调控 | 第21页 |
| ·病毒的装配及释放 | 第21页 |
| ·EIV 的进化 | 第21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 试验一 EIV 内蒙古株全基因组序列测定及分析 | 第22-67页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·病毒 | 第22页 |
| ·SPF 鸡胚 | 第22页 |
| ·载体和菌种 | 第22-23页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| ·引物 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-27页 |
| ·病毒的增殖及保存 | 第23-24页 |
| ·病毒总RNA 的提取 | 第24页 |
| ·RT-PCR | 第24-25页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| ·目的片段的纯化和回收 | 第26页 |
| ·连接克隆载体 | 第26页 |
| ·转化 | 第26页 |
| ·重组子的菌落PCR 鉴定 | 第26-27页 |
| ·序列测定 | 第27页 |
| ·序列比较分析 | 第27页 |
| ·遗传进化分析 | 第27页 |
| ·结果 | 第27-65页 |
| ·基因的扩增与克隆 | 第27-29页 |
| ·重组子的菌落PCR 鉴定结果 | 第29-32页 |
| ·重组子测序鉴定 | 第32-53页 |
| ·序列比较分析 | 第53-57页 |
| ·遗传进化分析 | 第57-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| ·结论 | 第67页 |
| 3 试验二 EIV NS1 基因的原核表达 | 第67-79页 |
| ·材料 | 第67-68页 |
| ·引物 | 第67页 |
| ·质粒和菌种 | 第67页 |
| ·试剂 | 第67-68页 |
| ·方法 | 第68-74页 |
| ·NS1 基因的PCR 扩增及纯化 | 第68-69页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第69-71页 |
| ·NS1 融合蛋白的表达及分析 | 第71-73页 |
| ·重组蛋白表达最佳诱导条件的确定 | 第73-74页 |
| ·结果 | 第74-77页 |
| ·NS1 基因的扩增 | 第74页 |
| ·重组表达载体双酶切鉴定 | 第74页 |
| ·目的基因表达和SDS－PAGE 分析 | 第74-75页 |
| ·表达产物的可溶性分析 | 第75页 |
| ·表达产物的Western－blot 检测与分析 | 第75页 |
| ·最佳诱导条件的确定 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| ·关于 pET-32a 原核表达系统 | 第77页 |
| ·宿主菌的选择 | 第77页 |
| ·马流感病毒内蒙古分离株 NS1 蛋白的原核表达 | 第77-78页 |
| ·结论 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-84页 |
| 附录 | 第84-89页 |
| 作者简介 | 第89页 |
