| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-29页 |
| ·MDV 研究简述 | 第13-23页 |
| ·MD | 第13-14页 |
| ·MDV 形态学特征 | 第14页 |
| ·分子生物学特征 | 第14-17页 |
| ·马立克氏病病毒主要的致瘤相关基因 | 第17-19页 |
| ·MDV 的致病机理 | 第19-20页 |
| ·MD 疫苗及防控 | 第20-23页 |
| ·细菌人工染色体技术 | 第23-26页 |
| ·BAC 载体系统简述 | 第23-24页 |
| ·BAC 载体修饰技术 | 第24-26页 |
| ·MDV 细菌人工染色体研究进展 | 第26-28页 |
| ·MDV BAC 技术 | 第26页 |
| ·MDV BAC 构建策略 | 第26-27页 |
| ·MDV BAC 研究进展 | 第27-28页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 第二章 MDV CVI988 细菌人工染色体重组病毒转移载体的构建 | 第29-35页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·质粒、菌种、病毒与试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-32页 |
| ·MDV CVI988 株感染细胞总 DNA 的提取 | 第29-30页 |
| ·MDV CVI988 重组病毒转移载体同源臂及加压筛选标记基因的扩增 | 第30页 |
| ·BAC 载体核心序列片段的制备 | 第30-31页 |
| ·重组病毒转移载体 pUA1B1-gpt -BAC 的构建 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-33页 |
| ·转移载体同源臂及筛选标记基因的鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组病毒转移载体 pUA1B1-gpt-BAC 的鉴定 | 第33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| ·pUA1B1-gpt-BAC 重组病毒转移载体插入位点的选择 | 第33页 |
| ·BAC 载体基本功能基因的完整性的重要性 | 第33页 |
| ·重组病毒转移载体 pUA1B1-gpt-BAC 中的两个 LoxP 的重要意义 | 第33-35页 |
| 第三章 MDV CVI988 株重组病毒的构建 | 第35-42页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·菌种、细胞、病毒与试剂 | 第35页 |
| ·主要设备与仪器 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-39页 |
| ·电转化转移载体质粒 pUA1B1-gpt-BAC 到 DH10B 宿主菌 | 第36-37页 |
| ·转移载体 pUA1B1-gpt-BAC 质粒的提取和纯化 | 第37页 |
| ·MDV CVI988 感染细胞总 DNA 的制备 | 第37页 |
| ·转移载体质粒与 Total-DNA 的共转染 | 第37-38页 |
| ·重组病毒rv-MDV CVI988 的获得 | 第38页 |
| ·重组病毒rv-MDV CVI988 的鉴定 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-41页 |
| ·转移载体与病毒感染细胞总 DNA 的共转染获得重组病毒 | 第39页 |
| ·重组病毒 BAC 功能区的 PCR 鉴定结果 | 第39-40页 |
| ·重组病毒rv-BAC-MDV CVI988 与野生病毒wt-MDV CVI988 体外生长曲线的比较 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·MDV 感染细胞总 DNA 中 MDV 基因组完整性的意义 | 第41页 |
| ·用gpt 做筛选标记是获得重组病毒的关键 | 第41-42页 |
| 第四章 BAC 分子克隆化病毒的获得 | 第42-51页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·菌种、细胞、病毒与试剂 | 第42页 |
| ·设备与仪器 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-47页 |
| ·大肠杆菌 DH10B 感受态细胞的制备 | 第42页 |
| ·重组病毒感染 CEF 细胞总 DNA 的提取 | 第42-43页 |
| ·电转化筛选pBAC-CVI988 转化子 | 第43页 |
| ·pBAC-CVI988 转化子的初步鉴定 | 第43页 |
| ·pBAC-CVI988 BAC 的 PCR 鉴定 | 第43-47页 |
| ·结果 | 第47-49页 |
| ·电转化筛选 BAC 转化子 | 第47页 |
| ·pBAC-CVI988 中 BAC 序列的 PCR 鉴定结果 | 第47-48页 |
| ·pBAC-CVI988 中病毒基因组的 PCR 鉴定结果 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·重组病毒感染细胞总 DNA 提取时机的掌握 | 第49页 |
| ·电转条件的优化 | 第49-50页 |
| ·重组病毒的细胞总 DNA 和 BAC 转化子质粒的凝胶电泳 | 第50页 |
| ·BAC 分子克隆化病毒的拯救 | 第50-51页 |
| 第五章 全文结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简历 | 第58页 |
