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乙烯诱导伏令夏橙果实脱落过程中重要功能基因的克隆、表达与功能分析

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
第1章 文献综述第12-28页
   ·基因芯片技术的产生与发展第12-17页
     ·基因芯片概念及其种类第12-15页
     ·基因芯片应用第15-16页
     ·柑橘基因组芯片现状第16-17页
   ·荧光定量PCR技术第17-19页
     ·荧光定量PCR的原理及应用第17页
     ·荧光定量PCR的分类第17-19页
   ·全长cDNA克隆技术第19-20页
     ·全长cDNA克隆的策略第19页
     ·全长cDNA克隆的方法分类第19-20页
   ·RNAI/PTGS原理及应用第20-23页
     ·RNAi的发现第21页
     ·RNAi/PTGS原理第21页
     ·RNAi/PTGS的应用第21-23页
   ·乙烯代谢第23-25页
     ·乙烯的生物学作用第23页
     ·乙烯代谢途径第23页
     ·乙烯代谢途径相关基因的研究第23-25页
   ·脱落研究第25-28页
     ·低氧应答基因与脱落的关系第25页
     ·伤害诱导基因与脱落的关系第25-26页
     ·乙烯受体与脱落的关系第26-28页
第2章 绪论第28-30页
   ·研究的目的与意义第28页
   ·研究的主要内容第28-29页
   ·技术路线第29-30页
第3章 材料与方法第30-44页
   ·植物材料及处理第30页
   ·大肠杆菌、农杆菌及载体第30-31页
   ·常用试剂和培养基第31-32页
   ·主要仪器第32页
   ·实验方法第32-41页
     ·柑橘果实离层总RNA提取方法第32-33页
     ·芯片数据产生及分析第33-34页
     ·RNA反转录及RealTime-PCR方法第34-35页
     ·基因全长cDNA克隆第35-37页
     ·利用RNAi/PTGS技术及超量表达技术构建重组质粒第37-41页
   ·外植体材料的准备第41-44页
     ·农杆菌侵染液的制备第41页
     ·BASTA抗性筛选第41-42页
     ·上胚轴的转化过程第42-44页
第4章 乙烯诱导果实脱落的柑橘基因组芯片分析第44-52页
 引言第44页
   ·材料与方法第44-45页
   ·结果与分析第45-52页
     ·RNA提取第45页
     ·芯片杂交及差异表达基因筛选第45-46页
     ·数据可靠性分析第46-50页
     ·差异基因功能分析第50-52页
第5章 伏令夏橙果实离层CsHRP的克隆、表达和特征分析第52-60页
 引言第52页
   ·材料与方法第52-53页
   ·结果与分析第53-60页
     ·CsHRP的全长cDNA克隆与结构分析第53-55页
     ·CsHRP生物信息学分析第55页
     ·RealTime-PCR结果分析第55-56页
     ·CsHRP的RNAi/PTGS载体构建第56-60页
       ·CsHRP正、反向片段的克隆第56页
       ·CsHRP RNAi干涉载体的构建第56-58页
       ·CsHRP的超量表达载体构建第58-60页
第6章 伏令夏橙伤害诱导基因家族(CsWIP)的克隆和分析第60-76页
 引言第60页
   ·材料与方法第60-62页
     ·材料处理和乙烯定量分析第60-61页
     ·伤害诱导基因的克隆和表达研究所用引物设计第61-62页
   ·结果与分析第62-76页
     ·叶片萎蔫、脱落、及乙烯的产生过程第62-63页
     ·CsWIP家族基因的克隆第63-64页
     ·CsWIP基因家族核苷酸序列分析第64-66页
     ·CsWIP家族蛋白分析第66-68页
     ·CsWIP基因家族的诱导表达特征第68-70页
     ·CsWIP1的RNAi/PTGS载体构建第70-72页
     ·CsWIP1的超量表达载体构建第72-73页
     ·植株转化抗性筛选结果第73-76页
第7章 伏令夏橙果实离层ETR2的克隆、表达和特征分析第76-84页
 引言第76页
   ·材料与方法第76-77页
   ·结果分析第77-84页
     ·ETR2的全长cDNA克隆第77-79页
     ·ETR2蛋白质结构预测分析第79-82页
     ·RealTime-PCR结果分析第82-84页
第8章 讨论与总结第84-88页
   ·柑橘基因芯片讨论与结论第84页
   ·对低氧应答基因(CsHRP)的讨论与结论第84-85页
   ·对伤害诱导基因(CsWIPs)的讨论与结论第85-87页
   ·对乙烯受体基因(ETR2)的讨论与结论第87-88页
参考文献第88-100页
致谢第100-102页
参与课题与发表文章目录第102-104页
附录Ⅰ 缩略词表第104页

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