摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
第1章 文献综述 | 第12-28页 |
·基因芯片技术的产生与发展 | 第12-17页 |
·基因芯片概念及其种类 | 第12-15页 |
·基因芯片应用 | 第15-16页 |
·柑橘基因组芯片现状 | 第16-17页 |
·荧光定量PCR技术 | 第17-19页 |
·荧光定量PCR的原理及应用 | 第17页 |
·荧光定量PCR的分类 | 第17-19页 |
·全长cDNA克隆技术 | 第19-20页 |
·全长cDNA克隆的策略 | 第19页 |
·全长cDNA克隆的方法分类 | 第19-20页 |
·RNAI/PTGS原理及应用 | 第20-23页 |
·RNAi的发现 | 第21页 |
·RNAi/PTGS原理 | 第21页 |
·RNAi/PTGS的应用 | 第21-23页 |
·乙烯代谢 | 第23-25页 |
·乙烯的生物学作用 | 第23页 |
·乙烯代谢途径 | 第23页 |
·乙烯代谢途径相关基因的研究 | 第23-25页 |
·脱落研究 | 第25-28页 |
·低氧应答基因与脱落的关系 | 第25页 |
·伤害诱导基因与脱落的关系 | 第25-26页 |
·乙烯受体与脱落的关系 | 第26-28页 |
第2章 绪论 | 第28-30页 |
·研究的目的与意义 | 第28页 |
·研究的主要内容 | 第28-29页 |
·技术路线 | 第29-30页 |
第3章 材料与方法 | 第30-44页 |
·植物材料及处理 | 第30页 |
·大肠杆菌、农杆菌及载体 | 第30-31页 |
·常用试剂和培养基 | 第31-32页 |
·主要仪器 | 第32页 |
·实验方法 | 第32-41页 |
·柑橘果实离层总RNA提取方法 | 第32-33页 |
·芯片数据产生及分析 | 第33-34页 |
·RNA反转录及RealTime-PCR方法 | 第34-35页 |
·基因全长cDNA克隆 | 第35-37页 |
·利用RNAi/PTGS技术及超量表达技术构建重组质粒 | 第37-41页 |
·外植体材料的准备 | 第41-44页 |
·农杆菌侵染液的制备 | 第41页 |
·BASTA抗性筛选 | 第41-42页 |
·上胚轴的转化过程 | 第42-44页 |
第4章 乙烯诱导果实脱落的柑橘基因组芯片分析 | 第44-52页 |
引言 | 第44页 |
·材料与方法 | 第44-45页 |
·结果与分析 | 第45-52页 |
·RNA提取 | 第45页 |
·芯片杂交及差异表达基因筛选 | 第45-46页 |
·数据可靠性分析 | 第46-50页 |
·差异基因功能分析 | 第50-52页 |
第5章 伏令夏橙果实离层CsHRP的克隆、表达和特征分析 | 第52-60页 |
引言 | 第52页 |
·材料与方法 | 第52-53页 |
·结果与分析 | 第53-60页 |
·CsHRP的全长cDNA克隆与结构分析 | 第53-55页 |
·CsHRP生物信息学分析 | 第55页 |
·RealTime-PCR结果分析 | 第55-56页 |
·CsHRP的RNAi/PTGS载体构建 | 第56-60页 |
·CsHRP正、反向片段的克隆 | 第56页 |
·CsHRP RNAi干涉载体的构建 | 第56-58页 |
·CsHRP的超量表达载体构建 | 第58-60页 |
第6章 伏令夏橙伤害诱导基因家族(CsWIP)的克隆和分析 | 第60-76页 |
引言 | 第60页 |
·材料与方法 | 第60-62页 |
·材料处理和乙烯定量分析 | 第60-61页 |
·伤害诱导基因的克隆和表达研究所用引物设计 | 第61-62页 |
·结果与分析 | 第62-76页 |
·叶片萎蔫、脱落、及乙烯的产生过程 | 第62-63页 |
·CsWIP家族基因的克隆 | 第63-64页 |
·CsWIP基因家族核苷酸序列分析 | 第64-66页 |
·CsWIP家族蛋白分析 | 第66-68页 |
·CsWIP基因家族的诱导表达特征 | 第68-70页 |
·CsWIP1的RNAi/PTGS载体构建 | 第70-72页 |
·CsWIP1的超量表达载体构建 | 第72-73页 |
·植株转化抗性筛选结果 | 第73-76页 |
第7章 伏令夏橙果实离层ETR2的克隆、表达和特征分析 | 第76-84页 |
引言 | 第76页 |
·材料与方法 | 第76-77页 |
·结果分析 | 第77-84页 |
·ETR2的全长cDNA克隆 | 第77-79页 |
·ETR2蛋白质结构预测分析 | 第79-82页 |
·RealTime-PCR结果分析 | 第82-84页 |
第8章 讨论与总结 | 第84-88页 |
·柑橘基因芯片讨论与结论 | 第84页 |
·对低氧应答基因(CsHRP)的讨论与结论 | 第84-85页 |
·对伤害诱导基因(CsWIPs)的讨论与结论 | 第85-87页 |
·对乙烯受体基因(ETR2)的讨论与结论 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-100页 |
致谢 | 第100-102页 |
参与课题与发表文章目录 | 第102-104页 |
附录Ⅰ 缩略词表 | 第104页 |