摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-24页 |
·植物核型分析研究进展 | 第16-18页 |
·常规的核型分析方法 | 第16页 |
·染色体显带的分型 | 第16-17页 |
·荧光原位杂交的分型 | 第17-18页 |
·植物自交不亲和信号传导研究进展 | 第18-20页 |
·自交不亲和的遗传机制 | 第18-19页 |
·配子体自交不亲和 | 第19-20页 |
·孢子体自交不亲和 | 第20页 |
·细胞遗传图谱的研究进展 | 第20-21页 |
·荧光原位杂交研究进展 | 第21-24页 |
·荧光原位杂交技术的原理及特点 | 第22页 |
·荧光原位杂交的建立与发展 | 第22-24页 |
第二章 构建染色体图谱FISH体系的建立 | 第24-46页 |
引言 | 第24页 |
·材料与方法 | 第24-30页 |
·材料 | 第24-25页 |
·载玻片的硅化处理 | 第25-26页 |
·甘蓝根尖中期染色体的制备 | 第26页 |
·酶解去壁低渗火焰干燥法制片过程中相关因子的研究 | 第26-27页 |
·甘蓝绒毡层细胞中期染色体和花粉母细胞减数分裂染色体的制备 | 第27页 |
·伸展DNA纤维的制备 | 第27-28页 |
·探针的标记与标记效果的检测 | 第28页 |
·荧光原位杂交 | 第28-30页 |
·结果与分析 | 第30-41页 |
·甘蓝中期染色体制片技术体系的建立 | 第30-33页 |
·甘蓝绒毡层细胞中期染色体和粗线期染色体制片技术体系的建立 | 第33-36页 |
·伸展DNA纤维技术体系的建立 | 第36-37页 |
·荧光原位杂交体系的建立 | 第37-41页 |
·讨论 | 第41-46页 |
·关于染色体制片技术的探讨 | 第41-44页 |
·影响荧光原位杂交重要因素的探讨 | 第44-46页 |
第三章 高分辨率5S rDNA-FISH研究 | 第46-66页 |
前言 | 第46-47页 |
·材料与方法 | 第47-53页 |
·材料 | 第47页 |
·主要试剂 | 第47页 |
·甘蓝基因组DNA的提取与纯化 | 第47-48页 |
·5S rDNA的PCR扩增 | 第48-49页 |
·PCR产物胶回收 | 第49页 |
·PCR产物的转化与测序 | 第49-51页 |
·绒粘层细胞中期染色体和减数分裂时期染色体的的制备 | 第51页 |
·DNA纤维的制备 | 第51页 |
·5S rDNA探针标记 | 第51-52页 |
·荧光原位杂交 | 第52-53页 |
·结果与分析 | 第53-61页 |
·甘蓝根尖中期染色体的核型分析 | 第53-55页 |
·5S rDNA克隆与序列分析 | 第55-56页 |
·5S rDNA基因的序列比对分析 | 第56-58页 |
·不同浓缩度的中期染色体的5S rDNA-FISH分析 | 第58页 |
·甘蓝粗线期染色体5S rDNA-FISH分析 | 第58页 |
·甘蓝减数分裂其它时期的5s rDNA-FISH分析 | 第58-60页 |
·甘蓝伸长染色体纤维的5S rDNA-FISH分析 | 第60-61页 |
·讨论 | 第61-66页 |
·甘蓝核型分析方法的探讨 | 第61-62页 |
·5S rDNA编码区序列特征 | 第62-63页 |
·5S rDNA的绒毡层细胞中期染色体定位的讨论 | 第63页 |
·5S rDNA的染色体定位的位点数的讨论 | 第63-64页 |
·5S rDNA的伸长DNA纤维定位的讨论 | 第64页 |
·载体DNA的伸长度对FISH分辨率的影响 | 第64-65页 |
·DNA Fiber-FISH的信号特征 | 第65-66页 |
第四章 甘蓝2号染色体细胞遗传图谱的构建 | 第66-80页 |
前言 | 第66-67页 |
·材料与方法 | 第67-71页 |
·材料 | 第67页 |
·绒毡层细胞中期染色体的制备 | 第67页 |
·基因组DNA的提取与纯化 | 第67页 |
·探针的筛选与引物设计 | 第67页 |
·探针的PCR扩增 | 第67-69页 |
·电泳检测 | 第69页 |
·PCR产物胶回收 | 第69页 |
·探针的测序与比对分析 | 第69页 |
·双色荧光原位杂交 | 第69-71页 |
·结果与分析 | 第71-77页 |
·探针的筛选与扩增 | 第71页 |
·pO147-1、pR94-1和pN120-1的序列测定与比对分析 | 第71-72页 |
·探针的标记及标记效率的检测 | 第72-73页 |
·不同长度的杂交探针在绒毡层细胞中期染色体上检出率的探索 | 第73页 |
·pO147在甘蓝绒毡层细胞中期染色体的检测 | 第73页 |
·pR94在甘蓝绒毡层细胞中期染色体的检测 | 第73-74页 |
·pN120在甘蓝绒毡层细胞中期染色体的检测 | 第74-76页 |
·2号染色体细胞遗传图谱的构建 | 第76-77页 |
·讨论 | 第77-80页 |
·标记探针的筛选 | 第77-78页 |
·探针DNA的长度对FISH检出率的影响 | 第78页 |
·标记探针的杂交信号特征与芸(?)属作物基因组拷贝数的关系 | 第78-79页 |
·构建细胞遗传图谱的意义 | 第79-80页 |
第五章 MLPK与SRK基因的染色体定位 | 第80-88页 |
引言 | 第80-81页 |
·材料与方法 | 第81-82页 |
·材料 | 第81页 |
·绒毡层细胞中期染色体和粗线期染色体的制备 | 第81页 |
·探针的制备 | 第81页 |
·探针的标记 | 第81页 |
·双色荧光原位杂交 | 第81-82页 |
·结果与分析 | 第82-85页 |
·MLPK与SRK的标记 | 第82页 |
·MLPK与SRK在绒毡层细胞中期染色体的double FISH分析 | 第82-83页 |
·MLPK和SRK在粗线期染色体上的double FISH分析 | 第83-84页 |
·甘蓝染色体图谱的构建 | 第84-85页 |
·讨论 | 第85-88页 |
·MLPK与SRK在中期染色体上的FISH信号特点分析 | 第85页 |
·MLPK与SRK在粗线期染色体上的FISH信号特点分析 | 第85-86页 |
·对MLPK和SRK定位结果的探讨 | 第86-88页 |
第六章 结论 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-98页 |
附件 | 第98-104页 |
致谢 | 第104-106页 |
发表论文及参加课题一览表 | 第106页 |