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甘蓝染色体图谱的构建及SI基因的定位研究

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-16页
第一章 文献综述第16-24页
   ·植物核型分析研究进展第16-18页
     ·常规的核型分析方法第16页
     ·染色体显带的分型第16-17页
     ·荧光原位杂交的分型第17-18页
   ·植物自交不亲和信号传导研究进展第18-20页
     ·自交不亲和的遗传机制第18-19页
     ·配子体自交不亲和第19-20页
     ·孢子体自交不亲和第20页
   ·细胞遗传图谱的研究进展第20-21页
   ·荧光原位杂交研究进展第21-24页
     ·荧光原位杂交技术的原理及特点第22页
     ·荧光原位杂交的建立与发展第22-24页
第二章 构建染色体图谱FISH体系的建立第24-46页
 引言第24页
   ·材料与方法第24-30页
     ·材料第24-25页
     ·载玻片的硅化处理第25-26页
     ·甘蓝根尖中期染色体的制备第26页
     ·酶解去壁低渗火焰干燥法制片过程中相关因子的研究第26-27页
     ·甘蓝绒毡层细胞中期染色体和花粉母细胞减数分裂染色体的制备第27页
     ·伸展DNA纤维的制备第27-28页
     ·探针的标记与标记效果的检测第28页
     ·荧光原位杂交第28-30页
   ·结果与分析第30-41页
     ·甘蓝中期染色体制片技术体系的建立第30-33页
     ·甘蓝绒毡层细胞中期染色体和粗线期染色体制片技术体系的建立第33-36页
     ·伸展DNA纤维技术体系的建立第36-37页
     ·荧光原位杂交体系的建立第37-41页
   ·讨论第41-46页
     ·关于染色体制片技术的探讨第41-44页
     ·影响荧光原位杂交重要因素的探讨第44-46页
第三章 高分辨率5S rDNA-FISH研究第46-66页
 前言第46-47页
   ·材料与方法第47-53页
     ·材料第47页
     ·主要试剂第47页
     ·甘蓝基因组DNA的提取与纯化第47-48页
     ·5S rDNA的PCR扩增第48-49页
     ·PCR产物胶回收第49页
     ·PCR产物的转化与测序第49-51页
     ·绒粘层细胞中期染色体和减数分裂时期染色体的的制备第51页
     ·DNA纤维的制备第51页
     ·5S rDNA探针标记第51-52页
     ·荧光原位杂交第52-53页
   ·结果与分析第53-61页
     ·甘蓝根尖中期染色体的核型分析第53-55页
     ·5S rDNA克隆与序列分析第55-56页
     ·5S rDNA基因的序列比对分析第56-58页
     ·不同浓缩度的中期染色体的5S rDNA-FISH分析第58页
     ·甘蓝粗线期染色体5S rDNA-FISH分析第58页
     ·甘蓝减数分裂其它时期的5s rDNA-FISH分析第58-60页
     ·甘蓝伸长染色体纤维的5S rDNA-FISH分析第60-61页
   ·讨论第61-66页
     ·甘蓝核型分析方法的探讨第61-62页
     ·5S rDNA编码区序列特征第62-63页
     ·5S rDNA的绒毡层细胞中期染色体定位的讨论第63页
     ·5S rDNA的染色体定位的位点数的讨论第63-64页
     ·5S rDNA的伸长DNA纤维定位的讨论第64页
     ·载体DNA的伸长度对FISH分辨率的影响第64-65页
     ·DNA Fiber-FISH的信号特征第65-66页
第四章 甘蓝2号染色体细胞遗传图谱的构建第66-80页
 前言第66-67页
   ·材料与方法第67-71页
     ·材料第67页
     ·绒毡层细胞中期染色体的制备第67页
     ·基因组DNA的提取与纯化第67页
     ·探针的筛选与引物设计第67页
     ·探针的PCR扩增第67-69页
     ·电泳检测第69页
     ·PCR产物胶回收第69页
     ·探针的测序与比对分析第69页
     ·双色荧光原位杂交第69-71页
   ·结果与分析第71-77页
     ·探针的筛选与扩增第71页
     ·pO147-1、pR94-1和pN120-1的序列测定与比对分析第71-72页
     ·探针的标记及标记效率的检测第72-73页
     ·不同长度的杂交探针在绒毡层细胞中期染色体上检出率的探索第73页
     ·pO147在甘蓝绒毡层细胞中期染色体的检测第73页
     ·pR94在甘蓝绒毡层细胞中期染色体的检测第73-74页
     ·pN120在甘蓝绒毡层细胞中期染色体的检测第74-76页
     ·2号染色体细胞遗传图谱的构建第76-77页
   ·讨论第77-80页
     ·标记探针的筛选第77-78页
     ·探针DNA的长度对FISH检出率的影响第78页
     ·标记探针的杂交信号特征与芸(?)属作物基因组拷贝数的关系第78-79页
     ·构建细胞遗传图谱的意义第79-80页
第五章 MLPK与SRK基因的染色体定位第80-88页
 引言第80-81页
   ·材料与方法第81-82页
     ·材料第81页
     ·绒毡层细胞中期染色体和粗线期染色体的制备第81页
     ·探针的制备第81页
     ·探针的标记第81页
     ·双色荧光原位杂交第81-82页
   ·结果与分析第82-85页
     ·MLPK与SRK的标记第82页
     ·MLPK与SRK在绒毡层细胞中期染色体的double FISH分析第82-83页
     ·MLPK和SRK在粗线期染色体上的double FISH分析第83-84页
     ·甘蓝染色体图谱的构建第84-85页
   ·讨论第85-88页
     ·MLPK与SRK在中期染色体上的FISH信号特点分析第85页
     ·MLPK与SRK在粗线期染色体上的FISH信号特点分析第85-86页
     ·对MLPK和SRK定位结果的探讨第86-88页
第六章 结论第88-90页
参考文献第90-98页
附件第98-104页
致谢第104-106页
发表论文及参加课题一览表第106页

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