Abstract | 第1-6页 |
摘要 | 第6-10页 |
Chapter 1 Introduction | 第10-26页 |
·Significance of the research | 第10-11页 |
·Literature review | 第11-18页 |
·Research progress on biological control of plant diseases | 第11-12页 |
·The damage of fungal plant pathogens on food production | 第12页 |
·The definition of plant disease biological control | 第12-15页 |
·Taxonomic characteristics of Chaetomium | 第15页 |
·Biological mechanism of Chaetomium species | 第15-16页 |
·The biocontrol properties of C globosum | 第16-17页 |
·C globosum genome dynamics | 第17-18页 |
·Research progress on Serine Proteases | 第18-25页 |
·Categorization of proteases | 第18页 |
·Microbial proteases | 第18-19页 |
·Serine proteases | 第19-23页 |
·E coli application to research | 第23-25页 |
·Funding and objectives of the research | 第25-26页 |
·Funding of this research | 第25页 |
·Main objectives of the research | 第25-26页 |
Chapter 2 Materials and methods | 第26-42页 |
·Materials | 第26-31页 |
·Microbial strains and plasmids | 第26-27页 |
·Culture media | 第27页 |
·Reagents and restriction enzymes used | 第27-28页 |
·Software used | 第28页 |
·Primers | 第28-29页 |
·Preparation of buffers and typical reagents | 第29-31页 |
·Instruments used | 第31页 |
·Experimental Techniques | 第31-42页 |
·ser gene sequencing | 第31-32页 |
·Cultivation of C globosum mycelia | 第32页 |
·ser gene cloning | 第32-35页 |
·Preparing CaC12 Competent E coli Cells | 第35页 |
·Plasmid Extraction | 第35页 |
·Bioinformatical analysis | 第35-36页 |
·Cloning of the protease gene | 第36页 |
·Expression pattern analysis of the protease gene | 第36-38页 |
·Induced expression at different incubation periods | 第38-39页 |
·Induced expression at different IPTG concentrations | 第39页 |
·SDS-PAGE analysis | 第39页 |
·Protease activity analysis of transformants | 第39-41页 |
·Optimum pH of the enzyme | 第41页 |
·Optimum temperature of the enzyme | 第41-42页 |
Chapter 3 Gene cloning and sequence analysis | 第42-55页 |
·Isolation of DNA and RNA | 第42-46页 |
·Isolation of high-quality DNA from C globosum | 第42页 |
·Isolation of high-quality RNA from C globosum | 第42页 |
·Synthesis of the cDNA template | 第42-44页 |
·C globosum ser gene sequence analysis | 第44-46页 |
·Bioinformatical Analysis of the ser gene sequence | 第46-53页 |
·Conserved Sequences in Translated Protein Sequence | 第47页 |
·SignalP Analysis | 第47-48页 |
·Amino Acid composition | 第48页 |
·Modeling of the ser gene | 第48-49页 |
·Multiple sequence alignment | 第49-51页 |
·Phylogenetic analysis of the subtilisin superfamily | 第51-53页 |
·Taxonomic classification of fungal strains | 第53页 |
·Chapter summary | 第53-55页 |
Chapter 4 Gene cloning and expression analysis | 第55-63页 |
·Transformation of E coli | 第55-61页 |
·pET-52b(+) vector extraction | 第55页 |
·Restriction Digestion of the ser gene and pET-52b(+) vector | 第55-56页 |
·Transformation of E coli Top 10 | 第56页 |
·Transformation into E coli BL21 for Expression | 第56-57页 |
·Recombinant Vector Restriction Digest | 第57页 |
·SDS-PAGE Analysis | 第57-59页 |
·Characterization of the recombinant protease | 第59-61页 |
·Discussion | 第61-63页 |
Conclusion | 第63-64页 |
References | 第64-72页 |
Acknowledgements | 第72页 |